Получение перевиваемых культур клеток, адаптированных к росту в питательных средах с пониженным содержанием сыворотки крови КРС

• Автор: Анисимова, Любовь Ивановна
• Шифр специальности: 03.00.23
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2002
• Место защиты: Покров
• Количество страниц: 142 с. : ил

В разработанной малосывороточной питательной среде стабилизирована клональная перевиваемая линия клеток ПСс4 размах варьирования числа хромосом от до , модальное число , величина модального класса . Установлена высокая чувствительность линии клеток ПСс4 к вирусу бешенства. Вакцинные штаммы ТС и РБ вируса бешенства накапливались до активности вируса в культуре ПСВНИИВВиМ, которая являлась контрольной 4,5 ККИДзосм3 или 6,5 МЛ Досм3 для штамма ТС и 4,1 ККИДзосм3 или 6, МЛДсм3 для штамма РБ. Полученная сублиния перевиваемых клеток ПСВНИИВВиМ, культивируемая в среде Игла МЕМ, содержащей 5 сыворотки крови КРС, нашла применение в НИР и в производстве вакцинных препаратов против бешенства, чумы КРС, парагриппа КРС. Полученная клональная перевиваемая линия клеток ПСс4, культивируемая в разработанной питательной среде, содержащей 0,5 сыворотки крови КРС, рекомендована в качестве клеточного субстрата для применения в НИР и для разработки новых вакцинных препаратов против бешенства. Разработанные методические рекомендации но поддержанию и хранению клональной перевиваемой линии клеток ПСс4, полученной из сублинии перевиваемых клеток ПСВНИИВВиМ, утверждены директором ВНИИВВиМ и применяются в научнопрактической работе лаборатории и института. Биологическая характеристика сублинии перевиваемых клеток почки сайги ПСВНИИВВиМ. Пропись питательной среды, обеспечивающей рост клеток ПС в присутствии 0,5 сыворотки крови КРС. Клоны клеток сублинии ПСВНИИВВиМ, растущие в разработанной малосывороточной питательной среде и их культуральные, цитоморфологические, кариологические характеристики и вирусрепродуцирующие свойства. Культуральные, цитоморфологические, кариологические и вирусрепродуцирующие характеристики стабильной клональной перевиваемой линии клеток почки сайги ПСс4 и ее использование в вирусологической практике. Материалы диссертации доложены и обсуждены на заседаниях Ученого Совета ВНИИВВиМ г. Международной научнопрактической конференции, посвященной летию ВНИИВВиМ Диагностика, профилактика и меры борьбы с особо опасными и экзотическими болезнями животных, Покров, г. Научной сессии Россельхозакадемии Состояние, проблемы и перспективы развития ветеринарной науки России, Москва, г. Результаты основных научных исследований подтверждены комиссионными испытаниями. По материалам исследований опубликовано научных работ. Исследования по определению чувствительности клеток линии Г1С к вирусам различных таксономических групп проводились совместно с сотрудниками лаборатории Биологии и культивирования вирусов и лаборатории Диагностики, цитоморфологические и кариологические исследования проводились совместно с сотрудниками лаборатории Культур клеток и органов с музеем клеточных штаммов, за что автор выражает искреннюю благодарность Е. П. Прилепской, Н. Ю. Смысловой, . И. Закутскому, В. В. Недосекову, Л. Д. Конаковой, Т. Ф. Горшковой, Луницыну. Остальные исследования выполнены автором самостоятельно. Перевиваемые линии клеток ПЛК в последние годы заняли ведущее место в биотехнологии производства ветеринарных противовирусных препаратов в качестве субстрата для накопления вируса, поэтому получение новых линий и штаммов клеток из тканей и органов сельскохозяйственных животных и изучение спектра их чувствительности к вирусам является актуальной проблемой вирусологии . Всемирная организация здравоохранения в году рассмотрела возможность использования перевиваемых линий клеток в биотехнологии 6 и определила требования к ним 7. В России также разработаны методические указания по аттестации ПЛК 0. По мнению В. Клеточный субстрат должен быть достаточно чувствительным к данному вирусу и обеспечивать накопление его в приемлемых количествах. Должен быть хорошо изучен и охарактеризован по биологическим, культуральным, морфологическим и другим свойствам. Не содержать посторонних агентов, потенциально опасных для млекопитающих. Не обладать туморогенностыо. Культивироваться на обычных питательных средах с минимальным содержанием сыворотки крови КРС. Обладать высокой стандартностью и стабильностью культуральных, морфологических, кариологических характеристик. Не содержать микоплазм, грибов и бактерий.