ДНК-диагностика вариантов генов каппа-казеина и бета-лактоглобулина у крупного рогатого скота

• Автор: Гладырь, Елена Александровна
• Шифр специальности: 03.00.23
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2001
• Место защиты: Дубровицы
• Количество страниц: 103 с. : ил

СОДЕРЖАНИЕ
ВВЕДЕНИЕ

1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. Маркерзависимая селекция

1.2. Молоко коров и его свойства

1.3. Полиморфизм генов белков молока крупного рогатого

1.3.1. Полимеразная цепная реакция ПЦР

1.3.2. Молекулярнобиохимический полиморфизм казеина молока

1.3.3. Молекулярнобиохимический полиморфизм сывороточных белков молока

1.3.4. Полиморфизм генов каппаказеина и беталактоглобулина и связь с хозяйственноценными признаками у крупного

рогатого скота

2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДИКА ИССЛЕДОВАНИЙ
2.1. Материалы исследований
2.1.1. Животные
2.1.2. Оборудован ие
2.1.3. Реактивы
2.2. Методика исследований
3. РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ
3.1. Оптимизация метода выделения ДНК из крови, ткани,
молока, спермы с использованием перхлората натрия
3.2. Оптимизация метода ГЦРПДРФ для анализа гена каппа
казеина крупного рогатого скота
3.3. Разработка метода ПЦРПДРФ для идентификации
вариантов гена беталактоглобулина крупного рогатого скота
3.4. Популяционногенетический анализ гена каппаказеина у
различных пород крупного рогатого скота Российской Федерации
3.5. Связь генотипов каппаказеина с молочной продуктивностью у исследованных пород крупного рогатого скота
3.6. Популяционногенетический анализ гена бета лакто глобули на у различных пород крупного рогатого скота Российской Федерации
3.7. Связь генотипов и аллелей гена беталактоглобулина с
молочной продуктивностью
ВЫВОДЫ
ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ
СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАННОЙ ЛИТЕРАТУРЫ


В связи с возросшими требованиями рынка к качеству молочной продукции, в частности к количеству и составу молочного белка, а так же к сыродельным характеристикам молока, возникает насущная необходимость в выявлении и использовании в селекции генетических маркеров, напрямую или косвенно связанных с качественными и количественными признаками молочной продуктивности. Целыо диссертационной работы являлось проведение ДНКдиагностики вариантов генов каппаказеина и беталактоглобулина у различных пород крупного рогатого скота Российской Федерации. Создать банк ДНК различных пород крупного рогатого скота. Оптимизировать методику определения полиморфизма г енов каппаказеина и беталактоглобулина крупного рогатого скота на основе анализа ПЦРПДРФ. Выявить полиморфизм генов каппаказеина и беталактоглобулина у различных пород крупного рогатого скота. Изучить генетическую структуру популяций по исследуемым генам. Установить взаимосвязи между аллелями генов каппаказеина и беталактоглобулина и показателями молочной продуктивности крупного рогатого скота. Научная новизна. Впервые разработаны методики определения шести аллельных вариантов гена каппаказеина и четырех аллельных вариантов гена беталактоглобулина крупного рогатого скота. Российской Федерации по исследуемым генам. Изучено влияние аллельных вариантов генов каппаказеина и беталактоглобулина на признаки молочной продуктивности крупного рогатого скота. Практическая ценность работы. Создан банк ДНК крупного рогатого скота четырех различных пород, который может быть использован для выявления полиморфизма других геЕЮвкандидатов локусов количественных признаков. Разработаны оптимальные методики выявления аллельных вариантов генов кап паказеина и беталактоглобулина, пригодные для проведения широкомасштабных популяционногенетических исследований. Исследовано влияние аллельных вариантов снов каппаказеина и беталактоглобулина на признаки молочной продуктивности крупного рогатого скота и даны рекомендации но возможному использованию данных маркеров в селекции. Основные положения, выносимые на защиту. Установлены тенденции влияния аллелей генов каппаказеина и бегалактоглобулина на отдельные признаки молочной продуктивности коров. Апробация работы. ВИЖ, п. ВИЖ, п. Дубровицы, . Публикации. В ходе выполнения диссертационной работы автором было опубликовано 3 научные работы, в том числе 1 методические рекомендации. Струю ура и объем работы. Диссертация изложена на 3 страницах, содержит таблиц, рисунков, состоит из введения, обзора литературы, материалов и методов, результатов исследований, выводов, практических предложений, списка литературы, который включает 0 источников, в том числе 3 на иностранных языках. Несмотря на то, что методы анализа групп крови, определения различных ферментов и сывороточных протеинов имеют широкое применение в генном картировании, в последнее время произошло смещение акцентов в исследованиях с биохимической генетики групп крови и молочных белков на молекулярногенетический уровень. Установленный методами молекулярной генетики полиморфизм длин рестрикционных фрагментов ПДРФ позволяет обнаружить отдельные позитивные гаплотипы или маркерные локусы, находящиеся в непосредственной связи с локусами продуктивности, с иммунным ответом или генами резистентности Брем Г. Причинами полиморфизма ДНК в большинстве случаев являются точковые мутации, которые или создают новый сайт рестрикции или приводят к потере уже существующего. Таким образом, между двумя точками энзиматического разрезания соответствующим рестрикционным ферментом образуются фрагменты различной длины, которые могут быть идентифицированы после их электрофоретического разделения. В отличие от групп крови и белков полиморфизм ДНК распределен по всему геному. В этой связи, вероятность наличия локуса, тесно сцепленного с генами наследственных пороков или признаков продуктивности, многократно повышается. Генетические маркеры могут применяться не только для диагностики наследственных аномалий, но и для выявления важных для животноводства генов. Для геномного анализа может быть использовано три типа маркеров функциональные гены, сегменты ДИК с неизвестными функциями и наследуемые хромосомные маркеры.