Биологические свойства бактериоцинов фитопатогенных ксантомонад - возбудителей бактериозов растений

• Автор: Садомов, Владимир Эдуардович
• Шифр специальности: 03.00.23
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2000
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 123 с. : ил.

1.0БЮР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1.Характеристика отдельных фитопатогенов X i.

1.1.1. Рол X iiv i, .

Свойства отдельных иаюваров вида X. i.

1.1.2.1. X i v.i.

1.1.2.2. X i v.

1.1.2.3. X i v. .

1.1.2.4. X i v. i.

1.1.2.5. X i v. i.

1.1.2.6. X i v. i.

1.1.2.7. X i v. v.

1.1.2.8. X i v. ii.
. X i v. vii.
1.1.3. Ксянтомонады возбудители бактериальных болешей растений.
1.1.4. Методы борьбы с возбудителями бактериальны болезней растений.
.1.2. Бактериоцины и их применение в растениеводстве.
Ш. Типы бактсриоцннов.
1.2.2. Макромолекулярные бакгерноинны.
1.2.2 Дефектные бактериофаги.
. Ьакзериоиины типа i.
2. Бактсриоцины фнтопатогенных микроорганизмов.
1.2.4. Применение бакгериоцинов в растениеводстве.
1.2.4.1. Контроль бактериозов с помощью ингаккных микроорганизмов, продуцирующих бактсриоцины.
1.2.4.2. Контроль бактериозов растений, осуществляемый с помощью препаратов очищенных бактериоцинов.
2. МАТЕРИАЛЫ и МЕТОДЫ
2.1. Бактерии
2.2. Бактериальные и эукариотические вирусы.
2.3. Питательные среды.
2.4. Получение и очистка Кппоцинон псевдомонад.
2.5. Выделение макрочолекулярных бактсриоиинон из клеток патоваров X. i.
2.6. Определение чувствительности ксантомонад к бактсрионинам методом споттсстирова н и и.
2.7. Флуоримстрия.
2.8. Электроорпснтацнонная спектроскопии систем бактериоцмнмикрооргзнизм.
2.9. Изучение электрофоретической подвижности клеток, обработанных бякгериоцииами.
2 Анализ редуцирующей активности ксантомонад в системах бактериоцинклеткаянус зеленый.
2 Выделение нуклеиновых кислот дефектных ксантомонадных фагов и анализ их свойств.
2Электроиная микроскопия.
3. РЕЗУЛЬТАТЫ
3.1. Изучение чувствительности патоваров X. i к пиоцннам отдельных представителей родя .
3.1.1. Выделение очищенных препаратов пиоцинов.
3.1.2. Исследование спектров антимикробного действия пиоцинои по отношению к
па товарам X. i.
ЗЛА Ингибирование роста X. i v. i X. i v. i пиоцином . и
3.1.4. Электронномикросконическос исследование взаимодействия между нноцииом и клеткой X. i v. i.
3.1.5. Изучение чувствительности ксантомонад к псевдомонадным фагам.
3.1.6. Флуориметрня суспензий АНСксантомонадабактериоцин.
3.1.7. Элсктроориситяциоииый анализ бактериальных суспензий, обработанных фатами и бактериоцинамн.
3.1.8. Определение злекгрокинетического ЭКП потенциала микроорганизмов.
3.1.9. Опенка подвижности микроорганизмов, обработанных пноцннами н фагами.
3.1 Исследование влияния пиоцина на способность клеток X.i v. i редуцировать янус зеленый.
3.2. Выделение н частичная характеристика надмолекулярных бактсриоиинон фитопаю синих представителей X. i.
3.2.1. Дефектные фаги патовара X. i v. i
3.2.1.1. Морфология дефект ных фагов X.i v. i.
3.2.1.2. Антимикробная активность частиц X1 по отношению к иатоварам X. i.
3.2.1 АЭлекгронномнкроскопичсскос изучение взаимодействия частиц X1 с клетками патоваров X. i.
3.2.1.4. Флуориметрня систем АНСксантомоиадаX.
3.2.1.5. Элсктроориснтационияи спектроскопия препаратов ксантомомададефсктный фаг.
3.2.1.6. Исследование влияния дефектного фага X1 на дыхательную активность ксантомонад.
3.2.1.7. Изучение нуклеиновой кислоты дефектного фага XI.
3.2.2. Выделение и частичная характеристика бактериоцниа X.i v. ii.
3.2.2.1. Морфология и размеры макромолскулнрного бактериоииня X. i v. ii.
3.2.2.2. Антимикробная активность ксаитонина СР1 по отношению к патоварам X. i. Микробиологические тесты.
3.2.2. Изучение взаимодействия ксантоцнна СР1 с чувствительными ксантомонадами на основе биофизических методов.
3.2.2.4. Изучение серологического родства между пиоиинами и ксаитоцнном СР1.
4. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ
ВЫВОДЫ
ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ
ВВЕДЕНИЕ


Бактсриоцииогения ксантомонад практически неисследованная область микробиологии. Отсюда очевидна необходимость проведения поиска ксантомонадных бактериоцинов и изучения их свойств. К настоящему времени из всех известных надмолекулярных бактсриоцинов наиболее исследованными являются пиоцины типа i. Данные ДНКДНК гибридизации свидетельствуют о близком родстве между представителями родов и X. В связи с этим резонна постановка вопроса о чувствительности ксантомонад к псевдомонадным пиоцннам типа и о дальнейшем практическом применении данных бактериоцинов в растениеводстве. Цель работы. Изучение способности патоваров X. Изучить бактериоциногенность патоваров X. Провести исследование свойств выделенных надмолекулярных бактериоцинов ксантомонад. Изучить антимикробную активность псевдомонадных пиоцинов по отношению к патоварам X. Оценить перспективы практического использования псевдомонадных и ксантомоиадных макромолекулярных бактериоцинов в идентификации патоваров X. Научная новизна. Впервые представлены доказательства антимикробного действия пиоцинов псевдомонад по отношению к отдельным патоварам X. Выделены и частично охарактеризованы два ранее не описанных макромолекулярных бактериоцина, продуцируемых клетками X. X. i v. Теоретическое и практическое значение. Чувствительность ксантомонад к псевдомонадным бактериоцииам подтверждает заключение о филогенетическом родстве представителей родов и X. Селективное антимикробное действие псевдомонадных и ксантомонадных бактериоцинов на патовары X. В работе аргументирована перспективность применения пиоцинов и ксантоцина в качестве средств зашиты растений от ксантомоиадных бактериозов. Цель настоящего литературного обзора освещение прелпосылок диссертационной работы и аргументация целесообразности поставленных задач. Первая часть обзора посвящена описанию отдельных фитопатогенных форм X. Во второй части рассмотрено явление бактериоциногении, изложена известная на сегодня информация о надмолекулярных бактериоцинах и проанализирован предшествующий опыт применения антимикробных i белковой природы в растениеводстве. Характеристика отдельных фитопатогенов X i. Род X iiv i, . Представители имеют следующие общие свойства. Бактерии представляют собой палочки размером 0,0,7 х 0,,0 мкм. Клетки не продуцируют внутриклеточно полнроксибутират. Грамотрицательиы. Микроорганизмы подвижны за счет функционирования одного или нескольких жзутиков. Облигатные аэробы, имеют строго дыхательный тип метаболизма. Кислород является конечным электронным акцептором. Ксантомонады не восстанавливают нитраты и не являются денитрификаторами. Оптимальная температура роста культур ЗСГС, максимальная С. Клетки оксидазоотрицательны. Тест на каталазу положительный. Ксантомонады способны использовать различные углеводы и соли органических кислот в качестве источника углерода. Бактерии продуцируют желтый, пигмент за редким исключением. Показано, что пигменты . ХатЬотогш высоко специфические бро. Все виды рода ХапЛошопаз относятся к возбудителям бактериозов растений. Свойства отдельных па товаров вида X. СатревМв. В настоящее время вид Х. Ыя объединяет более 0 патопаров, каждый из которых вызывает бактериоз определенного растенияхозяина или нескольких близкородственных растений 2. Некоторые из патоваров почти идентичны 9, прочие в той или иной степени отличаются друг от друга , 1, 2. Ниже дано описание наиболее распространенных в наших широтах патоваров из коллекции, которая была использована в настоящей диссертационной работе. ХапМотопав сатревМв v. Палочки размером 0,,5 х 0,,0 мкм, подвижны посредством полярного жгутика. На агаре бактерии образуют желтые, гладкие, блестящие колонии. Желатин разжижают. Молоко свертывают и пептонизируют. Выделяют РМз и Н. Кислоту образуют из декстрозы, левулезы, галактозы, арабинозы, ксилозы, мальтозы, сахарозы, раффинозы, глицерина, маннита. Не образуют из рамнозы, лактозы, дульцита, салицина. Гидролизуют крахмал. Бактерии дают мукоидный рост на питательном агаре с добавлением 5ной глюкозы. Образуют ксантомонадины. Гидролизуют эскулин.