Конструирование лечебно-профилактических препаратов на основе живых генетически модифицированных микроорганизмов

• Автор: Белявская, Валентина Александровна
• Шифр специальности: 03.00.23
• Научная степень: Докторская
• Год защиты: 2002
• Место защиты: Кольцово
• Количество страниц: 305 с. : ил

Введение

Список сокращений.

Обзор литературы

Глава 1 Перспективы конструирования иротивокнфекционных препаратов на основе живых генетически модифицированных микроорганизмов для перорального
введения.
I. I Слизистый иммунитет и препараты цтокинов, вводимых перорально защита организма от проникновения инфекций
1.2 Лечебнопрофилактические препараты на основе живых нерекомбинантных микроорганизмовпробиотиков
1.3 Перспективы конструирования препаратов на основе генетически модифицированных микроорганизмов

1.3.1 А ттенуированные патогены как вектор доставки биологически активных молекул

в организм.

1.4 Клонирование гешюинжснсрных штаммов i ii.

1.5 Оценка степени риска интродукции ГММО в окружающую среду теоретические
прогнозы и экспериментальный анализ
Г лава 2 Материалы и методы.
Глава 3 Результаты и обсуждение.
3 I Конструирование генетически модифицированных микроорганизмов для разработки
нового поколения иммунобиологических и вакцинных препаратов.
3 1.1 Конструирование рекомбинантных пробиотических штаммов бацилл, продуцирующих интерферон альфа
3.1.2 Конструирование микробных консорциумов из рекомбинантных пробиотических штаммов.
3.1.3 Конструирование рекомбинантных вакцинных штаммов энтеробактерий, продуцирующих гетерологичные антигены.
3.2 И зучение целевых биологических эффектов интерферона при введении
живых генетически модифицированных .ii рВМВЮ5 в организм .
3.2.1 Изучение возможности доставки гстсрологичных антигенов в организм при введении рекомбинантных аттенуированных штаммов патогенов
3.3 Технолог ические аспекты производства препаратов рекомбинантных пробиотиков.
3.3.1 Разработка технологии поверхностного культивирования
3.3.2 Разработка технологии глубинного культивирования
3.3.3 Конструирование готовых таблетированных форм
3.4 Медикобиологические испытания препарата субалин
3.4.1 Влияние субалина на эффскторнмс клетки нсспснифнчсской резистентности.
3.4.2 Противоопухолевые свойства.
3.4.3 Дльювантныс свойства.
3.5 Экспериментальная оценка рисков интродукции в окружающую среду генетически модифицированного В.хиЬШй рВМВ
3.5.1 Влияние генетической модификации на безвредность В 5иЬШи .
3. Влияние генетической модификации на способность к выживанию и адаптации рекомбинантного штамма В.хиЫШз рВМВ
3.5 2,1 Разработка молекулярных методов мониторинга
3.5.2.2 Выживание и адаптация В.зиЬМк рВМВ5 в условиях, имитирующих окружающую среду.
3.5.3 Характеристика потенциальной принимающей среды и возможные негативные экологические воздействия интродукции
3.5.4 Оценка риска спонтанной передачи плазмиды природным реципиентам
3.5.5 Оценка риска изменения экологического ареала
3.6 Разработка схемы применения и исследование эффективности пробиотика субалина в сельском хозяйстве
3.6.1 Оптимизация схемы применения и изучение эффективности препарата
субалин в профилактике диарей и стресса в промышленном птицеводстве
3.6.2 Конструирование композиционных кормов с добавлением пробиотика субалина и испытание их эффективности в звероводстве
3.6.3 Исследование эффективности препарата субалин в профилактике и лечении
аэромоноза карпов в рыбоводческих хозяйствах.
Выводы.
Список литературы


Более того, как показано, пробиотики стимулируют факторы неспецифической защиты организма к патогенным микроорганизмам с целью их элиминации и модулируют иммунные ответы организма на потенциально опасные антигены Рекйцоп О. Гс . С. е а. Ыкшп Е. Л а. Сергеев В. А. и др. Покровский В И. Баз У. С1 а1. Лопатина Т. К. и др. Ъ. с а. Маагтаа Н. Неспсцифи чес кая иммупомоду. Пероральное введение лактобацилл стимулирует неспецифичсскую резистентность оргашпма к патогенным микроорганюмам и тем самым способствует удалению патогенов из ЖКТ Рсгсйубп в. ФНО, ИЛ6, что также свидетельствует о стимуляции исспсцифмчсскоги иммунитета . М., . I сроральнос использование . Е . Причем пробиотики, как показано, модулируют фагоцтггоз поразному у здоровых и больных аллергией субъектов У здоровых лиц они оказывают иммуностимулирующий эффект, в то время как у людей с аллергическими проявлениями подавляющий . Как известно, фагоцитоз предшествует продукции антител и принимает участие в развитии ранних стадий воспалительного процесса. Кроме того, пероральная терапия пробиотиками воспалений инфекционной ротавирусная диарея и неинфскционной ревматоидный артрит этиологии нормализует наработку токсических продуктов, стабилизирует микрофлору кишечника и тем самым предотвращает наработку провоспалителъных медиаторов, которые являются обязательным компонентом ответа лимфоидной ткани ЖКТ на потенциально вредные антигены просвета кишечника i . Ii . Провоспалителыше цнгокнны, такие как ИЛ1, ФНОальфа и ИФНгамма, играют особую роль при воспалении. В исследованиях на трансгенных по цитокинам мышах показано. В. , . Пероральная терапия пробиотиком . АТСС3 снижает концентрацию ФНОальфа в кале у больных атопическим дерматитом и с аллергией к молоку Н . Интересен факт, что и продукты молочнокислой ферментации, и живые или аттенуированные бактерии, потенциируют ИФНгамма. I К Е. М . Ii . Пробиотические бактерии опосредуют супрессию пролиферации лимфоцитов и продукции провоспалигсльных цитокинов, таких как ФНОальфа и ИЛ6. Гак. Результаты ряда исследований свидетельствуют о том, что пробиотики обладают рядом иммуиорегуляторных эффектов, в том числе адъювантной активностью. Пероральное использование i при острой ротавирусной диарее стимулирует специфический противовирусный иммунитет iа М, . Возможно, стимуляция противовирусного иммунитета обусловливает наблюдаемое более быстрое излечение больных диареей Механизм, лежащий в основе этого эффекта не определен, но, возможно специфические компоненты клеточной стенки бактерий могут обладать адъювантной активностью. Пробиотики используют с целью модулирования иммунных ответов организма при воздействии на организм потенциально опасных антигенов Оральное использование iii, как показано, стимулирует ашителообразование к овальбумину М. С. . Н. . Аналогично, наблюдаегся стпмуляцмя гуморального иммунного ответа к ротавирусным антигенам у детей с ротавирусной диареей, получавших . I. У новорожденных с аллергией к коровьему молок наблюдаегся гнперчувствительностъ к белкам молока и нарушение синтеза I. Курс лечения пробиотиками таких новорожденных вызывает значительное улучшение Ii Е. Микрофлора ЖКТ оказывает влияние на процесс представления антигенов в ЖКТ Показано, что пробиотики модифицируют структуру потенциально опасных антигенов и тем самым изменяют их нммуногенность. Эти данные указывают на перспективность использования пробиотических бактерий в качестве иммуномодулирующих средств. Таким образом, терапия пробиотиками потенциируег эндогенные барьеры защиты ЖКТ Потенцинрованне неспецифических факторов защиты в ЖКТ включает нормализацию повышенной проницаемости кишечника и измененной микроэкологии ЖКТ Другим возможным стабилизирующим ЖКТ эффектом может быть улучшение иммунологического барьера ЖКТ, особенно ответов, опосредующих наработку I и развитие воспаления кишечника Р. Ii Б. На основании этих данных можно сделать заключение, что пробиотики могут использоваться как новый инструмент при лечении дисфункций слизистых ЖКТ, включая острые гастроэнтериты, аллергию к пшце и воспалительные процессы в кишечнике , .