Система контроля качества медицинских иммунобиологических препаратов химическими и иммунохимическими методами

• Автор: Волкова, Рауза Асхатовна
• Шифр специальности: 03.00.23
• Научная степень: Докторская
• Год защиты: 2009
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 276 с. : ил.

ОГЛАВЛЕНИЕ
Введение.

Список сокращений

Глава 1.Обзор литературы

1. Новый этап развития вакцинологии.

2. Методы получения вакцин

2.1. Методы получения и очистки вирусных вакцин.

2.2. Методы получения очищенных полисахаридных вакцин.

2.3. Культуральные вирусные вакцины

3. Система обеспечения качества один из основных элементов ОМР.

3.1. Валидация аналитических методов.

3.2. Проведение валидации
3.3. Показатели точности
3.4. Управление качеством.
3.5. Стандартные образцы как средство метрологического
обеспечения аналитических методов контроля медицинских иммунобиологических препаратов МИБП.
4. Методы контроля показателей качества МИБП химическими, физикохимическими и иммуиохимическими методами.
5. Методы лабораторной диагностики вирусных гепатитов на основе амплификации нуклеиновых кислот
Глава 2. Материалы и методы исследования
Глава 3. Результаты и обсувденис
З.Г.Разработка методологии оценки валидационных характеристик
стандартизованных химических и.иммуиохимических методов контроля качества МИБП
1.1 .Определение белкового азота с реактивом Несслера.
1.1.1. Разработка стандартного образца для контроля правильности определения белкового азота
1.1.2.Оценка вапидационных характеристик методики определения белкового азота
1.2. Определение Виантигена в брюшнотифозной вакцине
Вианвак
1.2.1 .Аттестация ОСО содержания Виантигена.
1.2.2. Валидация методики ракетного иммуноэлектрофореза РИЭФ, применяемого для определения содержания Виантигена в брюшнотифозной вакцине Вианвак
3.2.Методология разработки новых химических и
иммунохимичеекпх методов контроля качества МИБП и оценки их валидационных характеристик.
2.1. Определение гетерологичных примесей в МИБП
2.1.1. Модификация и валидация метода РИЭФ для определения бычьего сывороточного альбумина БСА в культуральных вирусных вакцинах.
2.1.2. Разработка стандартного образца для определения содержания БСА методом РИЭФ.
2.1.3. Модификация и валидация методики РИЭФ с применением сыворотки против белков сыворотки рогатого скота СРС.
2.1.4. Валидация ИФА тестсистемы для определения БСА на примере Ii
Су i, I., США.
2.2 Определение консервантов в МИБП.
2.2.1. Разработка и валидация методики определения содержания мертиолята в анатоксинах, вирусных и бактерийных вакцинах с помощью атомноабсорбционного спектрометра .3.
2.2.2. Разработка и валидация методики количественного определения хлороформа в антитоксических сыворотках
2.2.3. Изучение возможности применения методики определения
фенола в МИБП с помощью газожидкостной хроматографии
3.3. Разработка стандартных образцов для химических и нммунохимических методов контроля качества МИБП
3.1.Разработка стандартного образца для определения содержания
белка в препаратах иммуноглобулина
3.2. Разработка стандартных образцов для внутрилабораторного контроля качества аналитических работ при контроле МИБП
3.2.1. Разработка стандартного образца для калибрования хроматографической колонки при определении молекулярного
состава иммуноглобулинов методом гельфильтрации
3.2.2. Разработка стандартных образцов и прецизионность комплексонометрического метода определения ионов алюминия
3.4.Валидация ПЦР тестсистем для количественного определения
ДНК вируса гепатита В
4. 1.Разработка стандартного образца содержания ДНК
гена НВэА вируса гепатита В
4.2. Валидация тестсистемы АмплиСенс НВУ Монитор БИТ
ФГУН ЦНИИЭ Роспотребнадзора для количественного определения ДНК вируса гепатита В с гибридизационнофлуоресцентной де
текцией результатов амплификации в режиме реального времени
Заключение.
Выводы.
Список литературы


Полисахариды в качестве антигенов относятся к тимуснезависимым антигенам . Антигены этой группы характеризуются многократным повторением структурно идентичных эпитопов. Подобное повторяющееся расположение антигенных детерминант приводит к многоточечному взаимодействию с Вклеткой, что и обеспечивает полноценное развитие этих клеток до зрелых, продуцирующих антитела плазмоцидов . Иммуногенность полисахаридных антигенов растет с повышением молекулярной массы молекулы. Полисахаридные вакцины являются безопасным типом вакцинных препаратов. Очищенный ПС не токсичен и, в отличие от очищенного белкового препарата, обладает минимальными аллергизирующими свойствами 4. Одними из первых были разработаны мешшгококковые вакцины ,,9. Химическая природа менингококковых полисахаридов детально изучена. С помощью метода ядсрномагнитного резонанса ЯМР в сочетании с химическими методами анализа удалось определить состав полисахарида, порядок расположения мономеров в цепи, положение связи, тип и конфигурации связи, локализацию оацетильных групп 6. Основу стандартизации менингококковых вакцин составляет характеристика химического состава и молекулярных параметров. При этом химические показатели позволяют оценить степень очистки, а молекулярные параметры дают информацию о степени полимерности, коррелирующей с иммунологической активностью препарата. Отечественные менингококковые вакцины А и С соответствуют требованиям ВОЗ . В настоящее время используются конъюгированные с белком менингококковые вакцины, что позволяет получить более полный иммунный ответ 8. Особую проблему представляет собой разработка вакцин против менингококка серогруппьт i 2,4,7. Полисахарид данного возбудителя ВПС не вызывает иммунного ответа ни у взрослых, ни у детей. Это объясняется иммунологической толерантностью людей к этому антигену, обусловленной с одной стороны полным химическим сходством ВПС со структурой ПС . I, постоянно обитающей в кишечнике человека, с другой стороны сходством его со структурой ганглиозидов мозга. Многочисленные попытки создания вакцины на основе белков менингококка В оказались неудачными. Однако перспективным оказалось направление, связанное с разработкой вакцины на основе генноинженерных пептидов представляющих собой активные эпитопы белков, внешней мембраны менингококка В 0,7. Интенсивно разрабатываются полисахаридные вакцины против пневмококка 8,4,8,9,7,3, а также Я. I тип 9,8, 5,8. Вакцины против брюшного тифа. Бактериальные кишечные инфекции, вызываемые многочисленными представителями семейства ii, ответственны за рост заболеваемости и смертности от инфекционных заболеваний. Среди наиболее эпидемиологически значимых кишечных инфекционных заболеваний следует отметить брюшной тиф. Несмотря на широкое применение антибиотикотерапии, брюшной тиф остается опасной инфекцией с высоким уровнем летальности 1. Несмотря на то, что вакцины против кишечных инфекций являются проблемной областью иммунопрофилактики 4,2, вакцинация против брюшного тифа уже в XIX веке была одним из элементов профилактики бактериальных кишечных инфекций. Применение убитой цельноклеточной брюшнотифозной вакциной в сочетании с улучшением санитарногигиенических стандартов жизни привела к существенному снижению случаев брюшного тифа в промышленноразвитых странах во второй половине XX века 2. Однако главным недостатком подобных вакцин, а также разработанных позднее субклеточных химических вакцин, является их высокая реактогенность 7. К концу XX века встает вопрос о необходимости создания эффективной и безопасной брюшнотифозной вакцины нового поколения . Перспективу для разработки такой вакцины открыли серьезные достижения в области создания бактериальных полисахаридных вакцин 4,. Высокомолекулярные фракции капсульного антигена . Молекулярная масса капсульных вакцинных ПС достигает ООО . Опасность представляет частичная деполимеризация молекул ПС. Фармакопейные требования ограничивают содержание низкомолекулярных фракций в вакцинном препарате, регламентируя выход не менее вещества до 0,.