Разработка и совершенствование тест-систем на основе молекулярно-биологических методов для диагностики некробактериоза

• Автор: Романенко, Михаил Николаевич
• Шифр специальности: 03.00.23
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2004
• Место защиты: Шелково
• Количество страниц: 132 с. : ил.

Предложены и применяются несколько вариантов РИФ. Длительность, трудоемкость, недостаточная специфичность и чувствительность, применяемых в настоящее время методов, заставляет исследователей обратить особое внимание на разработку и внедрение в ветеринарную практику новых высокочувствительных и специфичных методов диагностики некробактериоза. В этой связи актуальным является внедрение методов диагностики на основе иммуноферментного анализа ИФА. Основными достоинствами ИФА являются высокая чувствительность, возможность анализа соединений с различной молекулярной массой, строго инструментальный учет результатов, что позволяет увеличить число проб, унифицировать методы и реагенты, а также вести прямую обработку информации. Таким образом, создание тестсистем для ускоренной диагностики некробактериоза на сегодняшний день является важной и актуальной задачей. Целью настоящей работы являлась разработка диагн ости кумов на основе очищенного антигена Г. Ьогит, определение белкового состава и изучение иммуногенных свойств его отдельных компонентов для использования их при создании иммуноферментной и люминесцентной тестсистем для диагностики некробактериоза при определении уровня антител в крови больных и переболевших животных и определения наличия антигенов Р. Ногит в гнойнонекротических очагах. Р.песгоркопт и изучить белковый состав антигена Р. Р.песгоркогит в гнойнонекротических очагах методом иммуноферментного анализа. Научная новизна. Российской Федерации разработана иммуноферментная тестсистема для диагностики некробактериоза КРС на основе очищенного антигена Г. Иогит. Разработана иммуноферментная, люминесцентная и гистохимическая тестсистемы, предназначенные для диагностики некробактериоза КРС. Созданы Набор для серологической иммуноферментной диагностики некробактериоза КРС НС, Набор для иммуноферментной диагностики некробактериоза КРС НА и Набор для люминесцентной диагностики некробактериоза КРС НЛ. Материалы работы использованы при составлении научнотехнической документации НД которая утверждается в установленном порядке. Наборы предназначается для индикации антигенов Г. Иогит и количественного определения анти Г. Иогит антител в сыворотках крови КРС. Внедрение в практику указанных наборов позволит проводить диагностику некробактериоза КРС в племенных и пользовательских хозяйствах при первых проявлениях клинических признаков, что будет способствовать оздоровлению хозяйств, обеспечению эпизоотологического благополучия, повышению сохранности и продуктивности поголовья, улучшению качества продукции. ИФА для определения уровня анти . ИФА для детекции антигенов . КРС. Некробактериоз инфекционная болезнь, проявляющаяся гнойнонекротичсскими поражениями всех органов и тканей организма. Экономический ущерб, причиняемый этой инфекцией, огромен. Он складывается из затрат, связанных с профилактикой и лечением больных, гибелью или преждевременной выбраковкой животных на мясо, потерей продуктивности и других расходов, обусловленных мероприятиями по ликвидации болезни. Некробактериоз поражает все виды домашних и диких животных, птиц, пресмыкающихся и человека 4, , 8, 6. Географически некробактериоз распространен на всех континентах, во всех странах, даже с высоко развитым животноводством. В Российской Федерации некробактериоз поражает ежегодно до 7 крупного рогатого скота и мелкого рогатого скота, занимая, таким образом, третье по распространнности место после лейкоза и туберкулза , , . Огромный ущерб болезнь наносит оленеводству из заболевших за год тыс. Существенны потери от некробактериоза в хозяйствах, содержащих крупный рогатый скот. Даже, несмотря на то, что поголовье скота за последние годы резко сократилось, заболеваемость не только не имеет тенденции к снижению, но и даже несколько возросла . Основным источником каждой вновь начинающейся эпизоотии среди крупного рогатого скота в первую очередь следует считать здоровых животных микробоносителей, а не больных, которые присоединяются позднее, так как бактерия представляет собой нормального обитателя пищеварительного тракта.