Разработка стандартной панели сывороток, содержащих и не содержащих IgG к цитомегаловирусу человека

• Автор: Ивченко, Светлана Николаевна
• Шифр специальности: 03.00.23
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2008
• Место защиты: Кольцово
• Количество страниц: 155 с. : ил.

1. Введение.

2. ЛИТЕРАТУРНЫЙ ОБЗОР.

2.1. Цитомегаловирусная инфекция

2.1.1. Цитомсгаловирус и ареал его распространения эпидемиологические аспекты

2.1.2. Этиология и патогенез первичной цитомегаловирусной инфекции

2.1.3. Вторичные инфекции, развивающиеся на фоне ЦМВИ.

2.2. Диагностика цитомегаловирусной инфекции

2.2.1. Антигены цитомегаловируса и их использование в диагностике.

2.2.2. Виды и эффективность диагностики цитомегаловирусной инфекции.

2.2.3. Гест системы для определения специфичных иммуноглобулинов к цитомегаловирусу

2.3. Разработка сывороточных панелей

2.3.1. Стандартные сывороточные панели, существующие в мире.
2.3.2. Биохимические характеристики сывороток для создания стандартных панелей
2.3.3. Критерии отбора сывороток для стандартной панели.
2.3.4. Стабилизирующие растворы.
3. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ.
3.1. Материалы
3.2. Методы.
4. РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ
4.1 Выбор метода отбора сывороток для создания панели образцов, содержащих и не
содержащих антитела класса в к цитомегаловирусу человека
4.1.1 Исследование антигенных свойств рекомбинантных аналогов белков рр0, р и рр цитомегаловируса человека
4.1.2 Подбор концентрации рекомбинантных антигенов для сорбции.
4.1.3 Оптимизация условий анализа иммуноферментного
4.1.4 Оценка качества лабораторной модели иммунофсрментной тестсистемы
4.2 Разработка стандартной панели сывороток для оценки качества
иммунофсрментных тестсистем, выявляющих антитела класса О к цитомсгаловирусу человека при диагностике ЦМВ инфекции.
4.2.1 Требования к панелям и входящим в их состав образцам.
4.2.2 Формирование панели сывороток, предназначенной для контроля качества тест
систем, выявляющих ДО антитела к цитомсгаловирусу.
4.2.3 Разработка жидкой панели сывороток для оценки качества тестсистем,
выявляющих иммуноглобулины класса в к цитомегаловирусу человека
4.2.3.1 Выбор способа стабилизации жидких образцов панели
4.2.3.2 Оценка стабилизирующих эффектов ультрафильтрации и консервации.
4.2.3.3 Изучение стабилизирующих эффектов облучения электронами
4.2.3.4 Изучение стабилизирующих эффектов консервантов и стабилизаторов
4.2.3.5 Исследование стабильности жидкой панели при хранении.
4.2.4 Разработка лиофилизированной панели сывороток для оценки качества тест
систем, выявляющих иммуноглобулины класса в к цитомегаловирусу человека
4.2.4.1 Отработка способа получения лиофилизированных образцов.
4.2.4.2 Исследование стабильности лиофилизированной панели при хранении
5. Заключение
6. Выводы
7. Литература.
8. Приложение
Список использованных


На разных этапах выполнения работы в ней принимали участие сотрудники ГНЦ ВБ Вектор В. И. Масычева, М. А. Суслопаров, И. М. Суслопаров, А. Н. Канев, а также сотрудники ГИСК им Л. А.Тарасевича И. П. Ладыженская, В. Г. Петухов, сотрудники производственной фирмы ЗАО Медикобиологический союз О. Н. Надточий, АЛI. Мезенцев, О. Г. Васенева, И. В. Валеева. Всем, принимавшим участие в данной работе, автор выражает искреннюю признательность. Искреннюю благодарность автор приносит генеральному директору ЗАО Медикобиологический союз М. В. Лосеву и заведующему лабораторией ИЯФ СО РАН Ауслендеру В. Особую благодарность автор выражает М. С. Воробьевой, профессору, доктору медицинских наук, член корреспонденту РАЕН, руководителю лаборатории ГИСК им. Л.А. Тарасевича М3 и СР РФ. Автор сердечно благодарит всех своих коллег, принимавших участие в работе. Диссертация изложена на 4 страницах, содержит таблиц, рисунок. Состоит из введения, обзора литературы, материалов и методов, результатов и обсуждений, выводов, списка литературы, приложений. Список литературы включает в себя 5 источников, из них 7 иностранных. Цитомегаловирусная инфекция протекает и реактивируется в условиях вторичного иммунодефицита. Поэтому только глубокое понимание особенностей инфекционного агента, его эпидемиологии, патогенеза позволяет выявить те критические звенья заболевания, которые позволяют адекватно выявить ту, или иную стадию и форму протекания инфекционного процесса. История изучения цитомегаловируса человека насчитывает несколько десятков лет. Огромное количество проведенных исследований но созданию вирусологической, серологической иммунодиагностики и генодиагностики позволяют опереться на уже накопленный опыт исследователей всего мира при создании новых, более качественных видов диагностики этой инфекции. Цитомегаловпрус и ареал его распрост ранения эпидемиологические аспекты Сероэпидемиологические исследования показывают, что цитомегаловирусная инфекция широко распространена среди человеческих популяций от развитых, промышленных сообществ до различных групп аборигенов . Частота обнаружения антител к цитомегаловирусу у людей в различных странах от до 0. Меньший уровень инфицированности зарегистрирован в Европе, Австралии и Северной Америке, более высокий в менее развитых странах Африки и ЮгоВосточной Азии. У детей этот показатель варьирует от ,3 до ,9 3. Выявление антител к ЦМВ в крови беременных женщин высоко во всех странах, а у вирус обнаруживается в моче и слюне 1. Цитомегаловирусом инфицируется от 0,5 до 2,5 всех новорожденных и грудных детей . ЦМВИ 3. По данным отечественных исследователей врожденная ЦМВИ выявляется у 0,,5 детей. При аутопсии тканей умерших новорожденных детей частота выявления ЦМВ от 2,2 у детей, умерших в возрасте от 7 до суток, до ,4 у умерших во втором полугодии частота генерализованных форм ЦМВИ в разные сроки колеблется от 1,5 до . Известны пути распространения цитомегаловирусной инфекции. Это вертикальная передача реактивированного эндогенного вируса , передача вируса от ребенка к ребенку и от ребенка к родителю . А также распространение вируса от детей к обслуживающему их персоналу, распространение вируса ог ребенка к матери и к плоду 5. Характерно внутрибольничное распространение ЦМВ в детском стационаре 2, приобретение донорских штаммов трансплантированными больными и реинфекция новыми штаммами иммуносупрсссироватшых больных, дегей, и сексуально активных женщин ,. Цитомегалия широко распространенное заболевание. Например, населения Великобритании в возрасте до лет имели случаи ЦМВ инфекции. Подавляющее большинство эпизодов инфекции асиптомны. Активные формы инфекции бывают у беременных и новорожденных 3, у людей с иммунными дефектами специфическими Тклеточными дефектами, у больных СПИД и у иммуносупрессивных после трансплантации пациентов , 0. Имеется эпидемиологическое подтверждение заражения инфекционным вирусом через поверхность слизистой оболочки. Входными воротами инфекции могут быть эпителий мочеполового тракта, верхних отделов пищевого или дыхательного факта.