Противовирусное и иммуномодулирующее действие бетулина при вирусных респираторных инфекциях крупного рогатого скота

• Автор: Величко, Галина Николаевна
• Шифр специальности: 03.00.23
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2008
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 128 с. : ил.

ВВЕДЕНИЕ.

1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. Вирусные респираторные инфекции крупного рогатого скота

1.1.1. Распространение инфекционного ринотрахеита крупного

рогатого скота.

1.1.2. Распространение вирусной диареиболезни слизистых оболочек

крупного рогатого скота

1.2. Терапия вирусных болезней

1.2.1. Роль интерферона в терапии вирусных болезней.

1.2.2. Фармакологическое действие бетулина

1.3. Моделирование инфекционного процесса при вирусных

инфекциях в культуре клеток эндотелия кровеносных сосудов
1.3.1. Функции эндотелия кровеносных сосудов
1.3.2. Клеточные медиаторы, продуцируемые эндотелием
2. СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ
2.1. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ.
2.2. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ
2.2.1. Влияние бетулина на экспериментальную инфекцию, вызванную
вирусом инфекционного ринотрахеита у телят.
2.2.2. Действие бетулина на спонтанную смешанную инфекцию, вызван
ную вирусом инфекционного ринотрахеита и вирусной диареиболезни слизистых оболочек у крупного роютого скота
2.2.2.1. Профилактическое действие бетулина.
2.2.2.2. Действие бетулина на телят с признаками респираторной
болезни
2.2.2.3. Действие бетулина при хронической респираторной болезни
2.2.2А
2.2.3.1.
2.2.3.2.
2.2.5.
2.2.5.1.
2.2.5.2.
2.2.5.3.
2.2.5.4.
Влияние бетулина на вакцинацию крупного рогатого скота живой вакциной против инфекционного ринотрахеита, вирусной диареиболезни слизистых оболочек и
парагриппа
Функционирование системы интерферона у крупного рогатого скота разного возраста при экспериментальной и спонтанной
респираторной инфекции
Функционирование системы интерферона у крупного рогатого скота при экспериментальной инфекции вызванной вирусом
инфекционного ринотрахеита
Функционирование системы интерферона у крупного рогатого скота при спонтанной смешанной инфекции, вызванной вирусами инфекционного ринотрахеита и вирусной диареиболезни
слизистых оболочек
Противовирусное действие бетулина.
Моделирование инфекционного процесса, вызванного вирусами крупного рогатого скота, в культуре клеток эндотелия
кровеносных сосудов.
Отработка условий культивирования клеток эндотелия
кровеносных сосудов крупного рогатого скота.
Репродукция респираторных вирусов крупного рогатого скота в культуре клеток эндотелия кровеносных сосудов
крупного рогатого скота и человека
Индукция интерферона в культуре клеток эндотелия кровеносных сосудов вирусами инфекционного ринотрахеита, вирусной
диареиболезни слизистых оболочек и парагриппа
Продупия цитокинов в культуре клеток эндотелия кровеносных сосудов человека при инфировании вирусами инфекционного ринотрахеита, вирусной диареиболезни слизистых оболочек и паргриппа3.
2.2.6. Способность бетулина иидуцировть интерферон и цитокины в
культуре клеток эндотелия кровеносных сосудов
3. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ.
4. ВЫВОДЫ
5. ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ
6. СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ.
7. ПРИЛОЖЕНИЯ
СПИСОК УСЛОВНЫХ ОБОЗНАЧЕНИЙ И СОКРАЩЕНИЙ
ИРТ инфекционный ринотрахеит
ВДБС вирусная диареяболезнь слизистых оболочек
ИФН интерферон
ЭК эндотелиальные клетки
КРС крупный рогатый скот
реакция нейтрализации
ПЦР полимеразная цепная реакция
ИФА иммуноферментный анализ
ИЛ интерлейкины
МИ множественность инфицирования
МОВК перевиваемая культура клеток почки теленка
КСТ перевиваемая культура клеток коронарных сосудов теленка
ТЦЦ 5омл цитопатическое действие вируса
ВВС вирус везикулярного стоматита
ВБН вирус болезни Ньюкасла
РГАд реакция гемадсорбции
ФНОа фактор некроза опухоли
ГМК гладкомышечные клетки
ФГА фитогемагглютинин
МНС главный комплекс гистосовместимости
ВПГ вирус простого герпеса
РПЛ ринопневмония лошадей
ВВЕДЕНИЕ
Актуальность


При вирусном инфицировании происходит активация врожденного неспецифического иммунитета, проявляющегося в продукции факторов неспецифической защиты интерферона и цитокинов. От баланса между активностью инфицирующего агента и активностью противовирусных механизмов защиты зависит возникновение заболевания, его течение и исход. Перспективным направлением представляется подбор препаратов как этиотропного, так и иммунотропного действия. Наше внимание привлек препарат бетулин, выделенный из бересты и представляющий собой смесь тритерпеновых соединений, главным компонентом которого является пентациклический тритерпеновый спирт бетулин. При доклинических и клинических испытаниях бетулин проявил самые разнообразные свойства антисептическое, бактсриостатичсское и бактерицидное против кишечных бактерий ii i, i, i xi и , гепатопротекторную активность, антигипоксическое, антимутагенное, превентивное в отношении туберкулеза действия. Его противовирусная и интерферониндуцирующая активность выявлена при гриппе и гепатите С на лабораторных животных Дерябин П. Г., Исаева Е. И., Львов Д. К., Балакшин В. В., . Вышеизложенная информация послужила основой для проведения исследований, обобщенных в данной диссертации. Цель и задачи. Целью исследований было изучение лечебнопрофилактической эффективности бетулина при вирусных респираторных инфекциях КРС. ЭК продуцировать ИФН и цитокины при инфицировании респираторными вирусами и под воздействием бетулина. Научная новизна. Выявлена терапевтическая и профилактическая эффективность бетулина при экспериментальной инфекции, вызванной вирусом ОТТ. Установлена терапевтическая и профилактическая эффективность бетулина при смешанной инфекции, вызванной вирусами ИРТ и ВДБС. Впервые показана способность бетулина индуцировать синтез ИФН в организме телят при экспериментальной инфекции и вакцинации против ОТТ. Впервые установлено вирулицидное действие бетулина в отношении вирусов ОТТ и Г1Г3. Разработаны оптимальные условия выделения и культивирования ЭК кровеносных сосудов КРС. Разработаны модели инфекционного процесса, вызванного респираторными вирусами КРС на основе культур ЭК. Установлена обратная зависимость между способностью респираторных вирусов индуцировать ИФН и их репродукцией в культурах ЭК КРС и человека. Впервые показана способность бетулина индуцировать в культуре ЭК провоспалительные цитокины. Практическая значимость. Проведенные исследования позволяют рекомендовать бетулин для лечения и профилактики респираторных болезней, вызванных вирусами ОТТ и ВДБС получен патент Яи 3 С1, Способ лечения респираторных заболеваний крупного рогатого скота Г. Н.Величко, А. Ф.Шуляк, О. Н.Щегловитова, К. П.Юров, В. В.Балакшин, Г. А.Преснова, А. Н.Чистяков, . Культура эндотелия кровеносных сосудов КРС может служить моделью для изучения патогенеза вирусных болезней, оценки продукции ИФН и цитокинов при вирусных инфекциях и использовании лекаственных средств, для скрининга иммуномодуляторов. Разработаны и утверждены Ученым Советом ВИЭВ Методические рекомендации по культивированию эндотелиальных клеток кровеносных сосудов крупного рогатого скота и Методические рекомендации по применению бетулина при вирусных регшраторных болезнях крупного рогатого скота, протокол от октября г. Апробация работы. Материалы работы доложены на Международной конференции Актуальные проблемы обеспечения ветеринарного благополучия животноводства, г. Ялта, г. Аптека, Бельгия и международной фармацевтической выставке Испания, г Основные положения, выводы и практические предложения, изложенные в диссертации, обсуждены и одобрены на межлабораторном научнопроизводственном совещании научных сотрудников ГНУ ВИЭВ им. Я.Р. Коваленко Москва, . Публикации. По материалам диссертационной работы опубликовано 6 научных работ, в том числе 2 в журналах, рекомендованных ВАК получен патент на изобретение РФ рассмотрены Ученым Советом ВИЭВ 2 методические рекомендации. Струюура и объем работы. Список литературы содержит 6 источников, из них отечественные, 9 иностранные. Диссертация иллюстрирована таблицами, рисунками.