Индукция морфогенеза в культуре соматических тканей сливы домашней : Prunus domestica L.

• Автор: Муратова, Светлана Александровна
• Шифр специальности: 03.00.23
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2002
• Место защиты: Мичуринск
• Количество страниц: 186 с. : ил

Содержание
ВВЕДЕНИЕ.

Г ЛАВА 1. Обзор литературы.

1.1. Регенерация растении из соматических тканей

1.1.1 .Клональное микроразмножение косточковых культур i vi

1.1.1.1. Введение в культуру

1.1.1.2. Субкультивирование побегов

1.1.1.3. Укоренение побегов

1.1.1.4.еревод растений в нестерильные условия.

1.1.2. Индукция морфогенеза из изолированных тканей

1.1.3. Подбор оптимальных условий регенерации

1.1.4. Гснетнческая стабильность растений, полученных методами
культуры тканей.
1.2. Агробактериальная трансформация .
1.2.1. i естественные векторы переноса генетической
информации в растения.
1.2.2. Механизм вирулентности агробактерий.
1.2.3. Конструирование обезоруженных векторов, промоторы, селективные и репортерные гены
1.2.4. Генетическая трансформация с использованием векторной системы i.
1.2.5. Регенерация транс генных растений
1.2.5.1. Выбор экспланта
1.2.5.2. Действие трансформационногоселекционного стресса
на эксплант
1.2.6. Перспективы генетической инженерии в селекции сливы
ГЛАВА 2. Цели и задачи исследований
ГЛАВА 3. Объекгы и методы исследований
3.1. Объекты исследований.
3.2. Культивирование сливы i vi
3.3. Регенерация сливы из листовых и стеблевых эксплаитов.
3.4. Определение чувствительности к антибиотикам листовых тканей
3.5. Бактериальные штаммы и плазмиды.
3.6. Трансформация листовых эксплшгтов и селекция каллусных клонов
3.7. Определение активности в трансгенных клетках.
3.8. Статистическая обработка результатов исследований
ГЛАВА 4. Результаты исследований.
4.1. Культивирование сливы i vi
4.1.1. Введение в культуру
4.1.2. Субкультивирование побегов.
4.1.3. Укоренение микрочеренков и перевод растений в нестерильные условия.
4.2. Регенерация сливы домашней из стеблевых и листовых эксплантов
4.2.1. Некоторые особенности морфогенеза в культуре листовых
дисков косточковых.
4.2.2. Влияние минерального состава среды на эффективность
регенерации из листовых эксплантов сливы домашей.
4.2.3. Влияние регуляторов роста растений на индукцию
морфогенеза в культуре листовых тканей сливы домашней
4.2.4. Влияние вида и концентрации углевода в среде на частоту
регенерации побегов из листовых эксплантов сливы домашней
4.2.5. Оценка регенерационною потенциала сортов сливы домашней.
4.2.6. Изменение морфогенетическою потенциала в зависимости от
типа и происхождения экспланта.
4.2.7. Влияние ориентации эксплантов на среде на каллусообразование
и органогенез в культуре высечек листьев сливы домашней.
4.2.8. Сравнение морфогенетического потенциала высечек листьев,
полученных i viv и i vi
4.3. Чувствительность к антибиотикам листовых тканей сливы
4.4. Образование и рост трансформированною каллуса на селективных средах
4.5. Определение активности
ЗАКЛЮЧЕНИЕ.
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ


При культивировании плодовых на этапах введения и пролиферации побегов общеприняты температура С, часовой световой день, освещенность люкс. Иногда условия культивирования изменяют. Гак, сообщается о положительном влиянии на рост и ветвление побегов i клон 25 сокращенного светотемнового цикла 4 час. ii . Вопросу укоренения побегов i vi посвящены многочисленные исследования, в ходе которых установлены некоторые закономерности, знание которых полезно для проведения работ по укоренению практически любых древесных культур. Калинин и др. Катаева, Бутенко, , . В качестве индукторов ризогенеза широко используются ауксины ИМК, ИУК и нафтилуксусная НУК кислоты. Стимуляторы роста типа ауксинов при поступлении в черенок усиливают обмен веществ и активизируют деятельность камбия, что проявляется в репродукции лучевых инициаций, приводящей к формированию придаточных корней Турецкая, Фаустов и др. Побеги разных культур специфично реагируют на тип применяемого ауксина, его концентрацию и способ введения. Чаще всего используют концентрации ауксинов в пределах 0,55,0 мгл. При меньших концентрациях отмечается низкий процент укоренения, более высокие концентрации способствуют сильному каллусообразованню в зоне ризогенеза. Значительные разногласия в выборе типа ауксина и его концентрации применительно к одним и тем же видам, повндимому, возникают изза различий в технологической чистоте используемых фнтогормонов и способе их применения, а также особенностей сортов и условий культивирования эксплантов. В частности, для сливы рекомендуют применять ИМК в составе питательной среды в концентрации 0,51,0 мгл i, i, vi, i, , Корнацкий, . Согласно другим источникам, наибольшая эффективность ИМК отмечена при концентрации 2,04,0 мгл i . , , . В качестве индуктора ризогенеза для сливы использовали также ИУК в концентрации 1,0 мгл i, ii, , 2,55,0 мгл , Минев и др. НУК в концентрации 0, мгл Шелифост и др. Эффективно совместное применение ауксина с хлорогеновой кислотой I , . Одновременное использование ауксина и флюроглицина на повышало частоту укоренения яблони , , и на персика . Флюроглицин увеличивал число укоренившихся черенков подвоев вишни и черешни на среде с ауксином и без него , , , . Присутствие ауксина в среде, при общей стимуляции ризогенеза, может ингибировать рост корней Полевой, . Поэтому используют альтернативные способы применения ауксинов. Указывалось на хорошие результаты по укоренению некоторых культур после кратковременного культивирования на среде с ауксинами . ii . , i, . Практикуется также добавление индуктора ризогенеза в питательную среду в конце этапа размножения или элонгации Высоцкий, . Установлена зависимость процесса ризогенеза от размера укореняемых микрочеренков. Побега яблони . Неделепа, Ганева, Корнацкий, длиной менее 1,5 см отличались пониженной жизнеспособностью, хуже укоренялись и формировали слабую корневую систему. Такие побеги целесообразно доращивать. Кроме того, на процесс укоренения влияют условия культивирования микрочеренков. Многие авторы процесс инициации корней с помощью ауксинов рекомендуют проводить в темноте, объясняя это усилением поглощения регулятора роста. . и Р. отмечают, что темповая фаза в начале укоренения побегов сливы в пределах 79 дней достаточна для получения 0 укорснясмости. Среднее число корней на укорененный побег увеличивалось в 2,8 раза у . . iii по сравнению с побегами, укореняемыми при стандартных условиях культивирования час. Эффективность темпового этапа показана на яблоне . i, , груше Vi, , персике . Существенное влияние на интенсивность укоренения и степень развития корневой системы оказывает температура. Однако, ее действие может быть очень специфичным для разных видов растений. i .