Энантиоселективные сорбенты с иммобилизованными макроциклическими гликопептидными антибиотиками

• Автор: Кузнецов, Михаил Александрович
• Шифр специальности: 03.00.23
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2008
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 131 с. : ил.

1. Введение.

2. Обзор литературы.

2.1. Эпаитиосслсктивность. Методы получения оптически чистых изомеров.

2.2. Метод ВЭЖХ для разделения энантномеров. Типы хиральных неподвижных фаз

2.3. Сорбенты с иммобилизованными макроциклнчсскимн гликонептидными антибиотиками.

2.3.1. Макроцнкличсскис гликопептидные антибиотики и получаемые па их основе хиральные селекторы
2.3.2. Способы иммобилизации макропнкличсских гликопелтиднмх антибиотиков на поверхности силикагеля.
2.4 Хроматографические свойства ХНФ с иммобилизованными хиральными селекторами на основе макроцикличсских гликонептидных антибиотиков
2.5. Влияние структуры селектора на хроматографические свойства сорбентов с иммобилизованными макроцнкличскими гликонептидными антибиотиками
2.6 Влияние структуры разделяемых энантиомеров па хроматографические свойства сорбеитов с иммобилизованными макроцнкличскими глнколептндпыми антибиотиками.
2.7. Возможные механизмы разделения на сорбентах с иммобилизованными макроциклнчсскимн гликонептидными антибиотиками.
2.8. Структура и свойства макроцикличсского глпкопептндного антибиотика эрсмомицина.
3. Экспериментальная часть.
3.1. Реагенты и растворители.
3.2.Методикп синтеза глнкозидов и агликона эремомнцина.
3.3. Методики иммобилизапии хиральных селекторов на силикагеле.
3.4. Хроматографический анализ.
4. Обсуждение результатов
4.1. Получение и очистка глпкозидов и агликона эремомицина.
4.2. Иммобилизация хиральных селекторов на силикагеле
4.3. Получение гибридного сорбента с иммобилизованным эрсмомицниом, модифицированным хиральным полиаиилино.м
4.4. Физикохимические нсслсдоваиип полученных хиральных неподвижных фаз.
4.4.1. ИКспсктроскопия
4.4.2.Спеп роскопия диффузного отражении компелсксов стетрацианохинодиметаном.
4.4.3. Электронная спектроскопия для химического анализа ЭСХА
4.5. Применение полученных сорбентов для разделения оптических изомеров.
4.5.1. Применение сорбентов для разделения энантио.мсров аминокислот и их производных.
4.5.1.1. Влияние структуры исследуемых аминокислот на энантиоселективность разделения.
4.5.1.2. Влияние условий разделения на энантиоселективность
4.5.1.3. Хроматографические характеристики сорбента с иммобилизованными ристоминином А. Зависимость селективности от способа иммобилизации гликопеп гидных антбиотикон на силикагель.
4.5.1.4. Влияние структуры селектора на энантносслскгнвность разделения
4.5.1.5. О структуре и локализации центра хирального распознавания аминокислот.
4.5.1.6. Разделение энантиомеров рфенилаланина и его производных.
4.5.2. Применение сорбентов для разделения энантиомеров рблокаторов.
4.5.3. Применение сорбентов для разделения энантиомеров профенов.
4.5.4. Другие возможности разработанных сорбентов в разделении энантиомеров
4.6. Изучение адсорбции Ь н ОМстноннна на сорбенте с иммобилизованным эрсмомнцнном.
5. Выводы
6. Список литературы.
7. Приложения
1. Введение
Актуальность


Минимальное число контактов не обязательно соответствует трем точкам связывания, если они рассматриваются как молекулярные взаимодействия. Вполне возможно, что молекулярную стерическую дифференциацию могут вызвать только стсрические взаимодействия. Тем не менее, в адсорбционной хроматографии всегда должен присутствовать какойлибо тип взаимодействия с сорбентом водородная связь, ионные, дипольдипольные, гидрофобные и яявзаимодействия. Водородная связь, как и ионные или дипольные взаимодействия, значительно усиливаются в неполярных растворителях, тогда как роль гидрофобных взаимодействий существенна в водных средах. В зависимости от рацемата, который необходимо разделить, применяются ВЭЖХ колонки с различными хиральными неподвижными фазами. В работе 2 хиральные неподвижные фазы подразделяются на пять основных типов в соответствии с механизмом образования диастсреомсрного комплекса между хиральным селектором и сорбатом. Тип . Фазы Пиркла фазы щеточного пита. ХНФ данного типа впервые были разработаны группой Пиркла 3 4, а также получены в работах 5 6 7. Эти фазы содержат высокоспецифичный низкомолекулярный хиральный селектор, содержащий ароматическую структуру с ядонорными или яакцепторными группами для яявзаимодействий, кислотную или основную часть для образования водородных связей и группу, создающую стерические затруднения. Таким образом, реализуется трехточечное взаимодействие селектора и рацемата. ХНФ типа I применяются для разделения энантиомеров ароматических соединений карбинолы, гидантоины, лактамы, фталиды, амиды, имиды, сульфоксиды, сульфиды в основном в условиях нормальнофазового режима, и редко в условиях обратнофазовой ВЭЖХ. Коммерчески доступные колонки выпускаются фирмой i i под названиями 0 1, 2, , , 2, 1. Тип II. Полисахариды и их производные. К хиральным неподвижным фазам этого типа относят силикагели, с адсорбированными на них полисахаридами целлюлоза, амилоза и их производными, содержащими шггритные, карбаматные, простые и сложные эфирные группы, получаемые модифицированием свободных гидроксильных групп 8. Изучению сорбентов этого типа посвящено множество работ И . Механизм хирального распознавания заключается в следующем. Молекулы рацемата взаимодействуют с полисахаридами путем образования водородных связей, образуя разные по силе удерживания изза стеричсских затруднений для каждого энантиомера комплексы. Основным производителем данного типа сорбентов является японская компания i i Ii, которая выпускает ВЭЖХ колонки под марками i и i. Они позиционируются на мировом рынке как самые универсальные колонки, способные разделить до всех рацематов. Они могут работать как в прямо так и в обратнофазовом режимах ВЭЖХ и используются для разделения соединений с аксиальной и планарной асимметрией аминов, кетонов, кислот, спиртов, эфиров и. Основным недостатком этих фаз является их несовместимость с большим кругом растворителей, отличных от спиртов, изза того, что селектор нанесен на поверхность адсорбциоиио. Однако эта проблема в последнее время решается путем разработки методов ковалентной иммобилизации производных целлюлозы и амилозы на поверхности силикагеля i I i I. III. Циклодекстрины. Декстрины кристаллические сахара Р1,4Эгликозиды, циклизованные в кольца, которые образуются при разрушении крахмала под действием микроорганизмов i . Самые малые по размеру циклодскстрины остатков, получившие название а, р и уциклодекстрины соответственно, образуют комплексывключения с различными соединениями подходящего размера. После того как был усовершенствован метод связывания циклодскстрина с силикагелем, они стали применяться в качестве хирального селектора условиях ВЭЖХ . В водных растворах циклодекстрины обычно имеют конформацию своего рода усеченного конуса с гидрофобной внутренней поверхностью. Гидрофобные молекулы, подобные бензолу или гексану, способны входить и выходить из полости, обратимо сорбируясь на такой поверхности. Энантиоселективность обусловлена хиральной структурой при входе в полость, образованной расположенными здесь гидроксильными 1рунпами в положениях 2 и 3 гликозидных остатков.