Экспериментальный морфогенез и биотехнология получения гаплоидов в культуре микроспор пшеницы

• Автор: Анапияев, Бахытжан Бейсенбекович
• Шифр специальности: 03.00.23
• Научная степень: Докторская
• Год защиты: 2001
• Место защиты: Алматы
• Количество страниц: 230 с. : ил

ОГЛАВЛЕНИЕ
ВВЕДЕНИЕ.

I.ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

Культура изолированных пыльников и микроспор зерновых культур

Современное состояние и перспективы

И.МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

2.1.Объекты исследования.

2.2.Методы исследования

2.2.1.Выращивание донорных растений

2.2.2. Определение стадии развития пыльцы

2.2.3. Холодовая предобработка колосьев, выделение

и культивирование пыльников
2.2.4. Культура изолированных микроспор пшеницы
2.2.5. Пересадка андроклинных структур и получение растенийрегенерантов
2.2.6. Методы изучения АДГ линий на устойчивость
к биотическим факторам среды.
2.2.7. Биохимические методы исследования андроклинных структур
и семян дигагшоидных линии пшеницы.
III. РЕЗУЛЬТАТЫ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ 3.ЭКСПЕРИМКНТАЛЬНЫЙ МОРФОГЕНЕЗ И РЕГЕНЕРАЦИЯ РАСТЕНИЙ В КУЛЬТУРЕ МИКРОСПОР ПШЕНИЦЫ I VI .
3.1.Развитие микроспор пшеницы i vi
3.2. Первичный эмбриоидогенез в культуре микроспор пшеницы
3.3. Морфогенез и регенерации растений в культуре андроклинных каллусов пшеницы
4. биохимические ОСОБЕННОСТИ ПРОЦЕССОВ МОРФОГЕНЕЗА В КУЛЬТУРЕ АНДРОКЛИННЫХ КАЛЛУСОВ ПШЕНИЦЫ.
4.1.Активность ферментов амилолигического комплекса и морфогенетический потенциал андроклинных каллусов пшеницы
4.2.Активность нитратредуктазы у морфогенных
и неморфогенных андроклинных каллусов пшеницы
4.3Изучение активности глютаматдегидрогеназы в андроклинных каллусах пшеницы
4.4.Изучение активности ферментного комплекса МДГГОА Г для оценки морфогенетического потенциала андроклинных каллусов пшеницы. .
5. БИОТЕХНОЛОГИЯ СОЗДАНИЯ АНДРОКЛИННЫХ ДИГАПЛОИДПЫХ ЛИНИЙ ПШЕНИЦЫ
6. ИСПОЛЬЗОВАНИЕ ГАПЛОИДНОЙ БИОТЕХНОЛОГИИ В
ПРАКТИЧЕСКОЙ СЕЛЕКЦИИ ПШЕНИЦЫ
6.1. Культура микроспор сортов и гибридов мягкой
пшеницы ii iv
6.2.Культура микроспор сортов и гибридов твердой
пшеницы ii
6.3. Культура микроспор отдаленных гибридов пшеницы
7. ГАПЛОИДНАЯ БИОТЕХНОЛОГИЯ В ЭКОЛОГИЧЕСКОЙ СЕЛЕКЦИИ ПШЕНИЦЫ
7.1. Использование гаплоидной биотехнологии в экологической селекции пшеницы на засухоустойчивость
7.2. Использование гаплоидной биотехнологии в селекции пшеницы на устойчивость к биотическим факторам среды .
8. ИЗУЧЕНИЕ ФИЗИОЛОГО БИОХИМИЧЕСКИХ ХАРАКТЕРИСТИК ДИГАПЛОИДНЫХ ЛИНИЙ ПШЕНИЦЫ .
8.1. Изучение активности ферментов амилолитического комплекса
в зерне андроклинных дигаплоидных линии пшеницы.
8.2. Урожайность, генетическая стабильность и технологические качества зерна андроклинных дигаплоидных АДГ линий
пшеницы.
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
РЕКОМЕНДАЦИИ ПО ИСПОЛЬЗОВАНИЮ
РЕЗУЛЬТАТОВ ИССЛЕДОВАНИЙ
ПЕРЕЧЕНЬ УСЛОВНЫХ ОБОЗНАЧЕНИЙ, СИМВОЛОВ
И ТЕРМИНОВ
СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАННЫХ ИСТОЧНИКОВ


Как правило, процесс регенерации растений в культуре изолированных пыльников и микроспор является двухступенчатым на среде с 2,4Д индуцируется процессы каллусогенеза и эмбриоидогенеза, затем образовавшиеся андроклинные структуры необходимо перенести на среду для регенерации. Однако в последние годы стала возможной одноступенчатая процедура регенерации растений, то есть без пересадки каллусов и эмбриоидов на среды для регенерации. Д на НУК в концентрации 0,1,0 мгл. При этом максимальный выход регенерантов составил 7, i . В литературе встречается немало работ, посвященных исследованию влияния различных минеральных компонентов питательной среды на культуру пыльников i, , ii . V, i, . При использовании различных концентраций 3 от 0 до мМ значительно максимально до раз усиливалась индукция каллусов. При этом увеличивался выход зеленых растений и повышалось отношение зеленые регенерантыальбиносы. Эти показатели у разных сортов пшеницы менялись поразному. Эффект 3 на каллусогенез обусловливается одним 3, а на регенерацию растений как К, так и 3. Действие 3 на каллусогенез и регенерацию растений у пшеницы не зависело от присутствия в среде , , . В работах по культуре пыльников пшеницы используются разнообразные источники углеводов, таких как сахароза, глюкоза, мелибиоза и другие. Основным из них является сахароза, которая применяется чаще всего в концентрации от 6 до Хохлов и др. Суханов и др. , i, . . Для пшеницы оптимальная концентрация сахарозы 9 на среде , . Суханов и др. Сахароза является не только эффективным источником углеводов, но и регулятором осмотического давления питательной среды Ни, . Нередко для увеличения выхода эмбриоидов и количества зеленых регенерантов в культуре пыльников применяются различные экстракты гидролизат казеина, кокосовое молоко, картофельный экстракт . , , , , , Базько, . Среди выше приведенных натуральных экстрактов водный раствор картофеля привлек наибольшее внимание благодаря высокой частоте индукции из микроспор каллусов и растений. В культуре пыльников пшеницы чаше всего применяют водный экстракт картофеля . , , Дьячук и др. В культуре соматических клеток растений в состав питательных сред добавляются различные аминокислоты, которые стимулируют рост и развитие клеток i . i . Аналогичное действие наблюдается в культуре репродуктивных клеток зерновых злаков , , . Среди аминокислот наиболее частое применение находит глицин в концентрации 2 мгл i . . , , . В последней работе агар был заменен на агарозу. В результате этих процедур на модифицированной картофельной среде 3 . В некоторых работах показано преимущество жидких питательных сред по сравнению с твердыми агаризованными средами i, X . , X, . Культура пыльников на жидких средах не только увеличивает выход каллусов и эмбриоидов, но также способствует спонтанному выходу микроспор из пыльников , , , . Као, Као, , , , . Добавление активированного угля 5 гл в жидкие питательные среды 6 также увеличивает в 1,8 раза отзывчивость микроспор в культуре пыльников пшеницы Васильев, . При культивировании пыльников дедифференцировка и каллусогенез могут происходить не только в репродуктивных гаплоидных клетках, но и в соматических диплоидных тканях Шамина, . Поэтому разработка методов культуры изолированных микроспор имеет важное значение. В последнее время учеными проводятся работы, посвященные разработке и усовершенствованию процедур и методов культуры изолированных микроспор пшеницы . Аиапияев, . v, , . i . i . , , , ячменя ii . i . ii . Преимуществом культуры изолированных микроспор является то, что ингибиторы спорофитного развития или вещества, содержащиеся в пыльнике, не оказывают отрицательного действия на микроспоры.