Получение антигена МРВ83 Mycobacterium bovis для диагностики туберкулеза животных методом ИФА

• Автор: Аракелов, Армен Борисович
• Шифр специальности: 03.00.23
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2006
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 152 с. : ил.

СОДЕРЖАНИЕ
ВВЕДЕНИЕ

1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. Эпизоотическая ситуация по туберкулзу в России.

1.2. Современные методы диагностики ту беркулза животных

1.3. Иммуногенетический аспект противотуберкулезного гуморального ответа

1.4. Применение моноклональных антител в диагностике туберкулеза животных.

1.5. Антигены, применяемые в лабораторной диагностике туберкулеза животных.

2. СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ

2.1. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ

2.1.1. Материалы.

2.1.2. Методы
2.2. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ.
2.2.1. Получение хроматографических фракций микобактерий
разных видов и исследование их белкового состава.
2.2.2. Получение моноклональных антител против антигена МРВ i vi и изучение их иммунобиологических
свойств
2.2.3. Выявление в хроматографических фракциях микобактерий разных видов антигена МРВ с помощью моноклональных антител 264.
2.2.4. Определение видоспецифичности антигена МРВ
для микобактерий.
2.2.5. Разработка тестсистемы ИФА для диагностики туберкулеза животных.
2.2.6. Оценка специфичности и чувствительности разработанной тестсистемы ИФА с использованием сывороток крови здоровых и больных туберкулезом коров.
2.2.7. Расчет себестоимости приготовления тестсистемы ИФА для диагностики туберкулеза животных и определение экономической эффективности ее применения в сравнительном аспекте
3. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ ИССЛЕДОВАНИЙ.
4. ВЫВОДЫ
5. ПРАКТИЧЕСКОЕ ИСПОЛЬЗОВАНИЕ НАУЧНЫХ РЕЗУЛЬТАТОВ.
6. РЕКОМЕНДАЦИИ ПО ИСПОЛЬЗОВАНИЮ
НАУЧНЫХ ВЫВОДОВ.
7. СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАННОЙ ЛИТЕРАТУРЫ
ПРИЛОЖЕНИЯ.
ВВЕДЕНИЕ
Актуальность


. , хроническое течение туберкулеза объясняется медленным размножением возбудителя i viv и длительностью инкубационного периода от недель до нескольких лет. По данным Благодарного Я. Определенное значение в распространении болезни имеют также зараженные и больные козы, свиньи, овцы, лошади, кошки, собаки. Кузин Л. И. считает, что козы наиболее восприимчивы к бычьему виду возбудителя туберкулеза. У коз, реагирующих на туберкулин, обнаруживали типичные для туберкулеза изменения и выделяли М. Никаноров А. И. установил важную роль микобактерий человеческого и птичьего типов в эпизоотологии туберкулеза маралов. Урбан В. П. , изучая природу повторных вспышек туберкулеза, отмечал, что от больных собак выделялись М. М. vi в и М. Доказанным фактом является то, что от больных людей животные могут заразиться как бычьим, так и человеческим видами микобактерий . Кузина I. . выделяла от коров крупного рогатого скота 7,5 культур микобактерий туберкулеза человеческого вида, а Козлов . . и соавт. По сообщениям Аликаевой А. П. 8, характер передачи возбудителя туберкулеза зависит от локализации его в зараженном организме и путей выделения, а внедрение в новый организм от ворот инфекции. Так, в молоке зараженных коров может быть до 5 млн. По данным Коромыслова , распространение туберкулеза через инфицированное молоко и необеззараженный обрат может происходить не только внутри неблагополучных хозяйств, но и являться одним из основных факторов эпизоотологических и эпидемических вспышек болезни. Колычев Н. М. установил, что в России вывоз необеззараженного навоза на поля приводит к тому, что на фермы поступают растительные корма, контаминированные возбудителем туберкулеза. По данным Филимонова . . , повторное возникновение туберкулеза чаще регистрируют в стадах, оздоровленных в результате систематического выявления и убоя животных, реагирующих на туберкулин. Без заноса возбудителя туберкулеза извне болезнь возникает повторно в ,5 хозяйств. В ,7 случаев рецидив туберкулеза в хозяйствах регистрируют в первые 34 года после их оздоровления. Хазипов II. Тузова Р. В. , и др. России туберкулез периодически выявляют в течение лет. В этих хозяйствах интервалы между снятием ограничений и повторным установлением болезни, в большинстве случаев, составляют 35 лет. Шаровым А. Н. установлена прямая зависимость повторного возникновения туберкулеза от длительности неблагополучия хозяйств и наличия в них больного скота. Если хозяйства оздоравливали с передержкой больных животных, то риск повторного возникновения болезни возрастал в 2 3 раза. По данным Шишкова В. П. с соавг. Основная причина рецидива туберкулеза наличие скрытых носителей возбудителя инфекции среди ремонтного молодняка, выращенного в условиях недостаточной изоляции в период неблагополучия фермы. Овдиенко П. П. с соавт. С возрастом реактивность повышается и туберкулез устанавливают у коров после первого или второго, иногда третьего отелов. Ремонтный молодняк, выращенный в условиях недостаточной изоляции в период неблагополучия хозяйства, может быть не только причиной повторного возникновения болезни в этих же хозяйствах, но и причиной повторного неблагополучия других хозяйств, оздоровленных методом замены неблагополучного поголовья. Ротов В. И. с соавт. Число таких животных в неблагополучном стаде может быть различным, в среднем 4 6 , что зависит от длительности неблагополучия хозяйства. Состояние анергии чаще выявляют у коров старше лет и связывают с блокадой Тсистемы иммунитета. Изза наличия в стаде животных, больных туберкулезом и находящихся в состоянии анергии, заболевание скота повторно возникало в оздоровленных стадах России в ,6 случаев. Повторное возникновение туберкулеза в оздоровленных хозяйствах Урбан В. П. объясняет сохранением возбудителя туберкулеза в организме животных в Ьформе и риверсией его в бактериальную форму. В таблице 1 представлены статистические данные о распространении туберкулеза крупного рогатого скота в РФ на г. Движение неблагополучных пунктов по годам Заболело, гол. Наличие на .