Оптимизация технологии получения растений-регенерантов яровой мягкой пшеницы в каллусной культуре in vitro

• Автор: Катасонова, Анна Александровна
• Шифр специальности: 03.00.23, 03.00.12
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2007
• Место защиты: Уфа
• Количество страниц: 150 с. : ил.

ГЛАВА 1. КУЛЬТУРА IN VITRO ЗАРОДЫШЕЙ ХЛЕБНЫХ ЗЛАКОВ (ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ)
1 Л. Развитие зародыша хлебных злаков in vivo
1Л Л. Общая характеристика строения зародышей хлебных злаков
1 Л.2. Периодизации эмбриогенеза in vivo зерновых злаков
1.2. Зародыши хлебных злаков как экспланты для культивирования in
vitro
1.2Л. Стадия развития зародыша, оптимальная для введения в культуру in vitro
1.2.2. Культивирование in vitro изолированных зародышей хлебных
злаков
1.2.3. Типы каллусов зародышевого происхождения
1.3. Получение растений-регенерантов из культивируемых in vitro зародышей злаков
1.3.1. Эмбриогенез как путь морфогенеза in vitro
1.3.2. Органогенез in vitro
1.3.3. Соматический эмбриогенез (эмбриоидогенез) in vitro
ГЛАВА 2. ОБЪЕКТ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
2.1. Объект исследования
2.2. Методы исследования
2.2.1. Метод культуры in vitro незрелых зародышей пшеницы
2.2.2. Метод световой микроскопии
2.2.3. Метод фенологических наблюдений
2.2.4. Статистическая обработка полученных результатов
ГЛАВА 3. РЕЗУЛЬТАТЫ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ
3.1. Развитие зародыша и периодизация эмбриогенеза яровой
мягкой пшеницы in vivo
3.1.1. Развитие зародыша яровой мягкой пшеницы in vivo
3.1.2. Периодизация эмбриогенеза in vivo яровой мягкой пшеницы
3.2. Отзывчивость на условия культуры in vitro разновозрастных зародышей яровой мягкой пшеницы
3.3. Морфологический и цито-гистологический анализ путей морфогенеза
в каллусной культуре пшеницы in vitro
3.3.1. Формирование морфогенетических очагов как начальный этап
путей морфогенеза в каллусной культуре in vitro
3.3.2. Геммогенез как путь морфогенеза in vitro в морфогенном каллусе
3.3.3. Ризогенез как путь морфогенеза in vitro в морфогенном каллусе
3.3.4. Гемморизогенез как путь морфогенеза in vitro в морфогенном каллусе
3.3.5. Соматический эмбриогенез как путь морфогенеза in vitro
в морфогенном каллусе
3.4. Влияние продолжительности культивирования на среде I
на частоту образования морфогенных структур и регенерационную способность каллусов
3.5. Регенерация растений яровой мягкой пшеницы в условиях in vitro
и ex vitro
3.5.1. Развитие растений-регенерантов в условиях in vitro
3.5.2. Развитие растений-регенерантов в условиях ex vitro
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
ВЫВОДЫ
СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАННОЙ ЛИТЕРАТУРЫ

ПРИНЯТЫЕ СОКРАЩЕНИЯ
2,4-Д - 2,4-дихлорфеноксиуксуная кислота,
АК - адвентивный корень,
АП - апекс побега,
АпКл - апикальная клетка,
АпП - апикальный полюс,
АпЧ - апикальная часть,
БзКл - базальная клетка,
БзП - базальный полюс,
БзЧ - базальная часть,
ВЛ - второй лист,
Д - дегенерация экспланта,
Зг - зигота,
ЗК - зародышевый корень,
К - каллус,
Кл - колеоптиль,
Кр - корень,
Крз - колеориза,
КЧ - корневой чехлик,
Л - лист,
Лг - лигула, мг - миллиграмм, мм - миллиметр,
МК - морфогенный каллус,
МО - морфогенетический очаг,
НМК - неморфо генный каллус,
П - проросток,
Пл - плерома,
ПЛ - первый лист,
Пр - периблема,
ПрПЛ - примордий первого листа,
Пч - почка,
С - суспензор,
СЗ - соматический зародыш,
СМ - световая микроскопия,
сут - сутки от искусственного опыления,
СЭ - элементы сосудистой системы,
ТЛ - третий лист,
Щ - щиток,
Эб - эпибласт,
Энсп - эндосперм,
Эп - эпидермис, х - увеличение

Морфогенные каллусы через каждые 5 сут в стерильных условиях ламинарного бокса переносили в пробирки с питательной средой для регенерации (среда II), также составленной по прописи Мигазі^е, Skoog [1962], но без добавления 2,4-Д (табл. 2).
Таблица
Состав питательной среды II для регенерации растений в морфогенном каллусе
Компоненты питательной среды, мг/л
NH4NO3 1650 Ре2804 х 7Н20 27
KN03 1900 №2ЭДТА х 2Н20 37
СаС12 х 2Н30 440 Тиамин - НС1 0
MgS02 х 7Н20 370 Пиридоксин - НС1 0
КН2Р04 170 Никотиновая кислота 0
MnS04 х 4Н20 22.3 Мезо-инозит
СоС12 х 6Н20 0.025 Глицин 2
ZnS04 х 7Н20 8.6 Кинетин 0
CuS04 х 5Н20 0.025 Сахароза 30000
Na2Mo04 х 2Н20 0.25 Агар 7000
Н3ВО3 6.2
Культивирование каллусов вели на светоплощадке при 16-часовом фотопериоде с интенсивностью освещения 10 ООО лк.
На 20-25-е сутки культивирования in vitro на морфогенных каллусах наблюдали начало формирования растений-регенерантов. Такие растения-регенеранты выращивали в пробирках на среде для регенерации до фенофазы кущения.