Совершенствование биотехнологии производства питательных сред для культивирования чумного микроба на основе сырья животного и растительного происхождения

• Автор: Старцева, Ольга Леонидовна
• Шифр специальности: 03.00.23
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2005
• Место защиты: Ставрополь
• Количество страниц: 182 с. : ил.

ВВЕДЕНИЕ.
ГЛАВА 1 СОВРЕМЕННОЕ СОСТОЯИЕ ПРОБЛЕМЫ ПРОИЗВОДСТВА ПИТАТЕЛЬНЫХ СРЕД ДЛЯ МИКРОБИОЛОГИЧЕСКИХ ИССЛЕДОВАНИЙ ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
1.1 Среды на основе сырья животного происхождения и их использование при культивировании чумного микроба.

1.2 Растительное сырье как основа питательных сред

СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ

ГЛАВА 2 МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ.

2.1 Материалы исследования

2.1.1 Штаммы микроорганизмов

2.1.2 Реактивы, сырье.

2.1.3 Питательные среды.

2.1.4 Лабораторные животные.

2.2 Методы исследования.
2.2.1 Получение питательных сред
2.2.2 Методы получения питательных основ
2.2.3 Методы физикохимического контроля .
2.2.4 Методы биологического контроля .
2.3 Методы статистической обработки материала.
ГЛАВА 3 СОВЕРШЕНСТВОВАНИЕ ТЕХНОЛОГИИ ПОЛУЧЕНИЯ ПИТАТЕЛЬНЫХ СРЕД НА ОСНОВЕ ЖИВОТНОГО
3.1 Разработка ускоренного способа приготовления ферментативных мясных гидролизатов.
3.2 Сравнительная характеристика мясных основ, полученных ускоренным способом ферментации, в сравнении с классическим ферментативным и химическим видами гидролиза.
3.2.1 Определение физикохимических свойств питательных основ
3.2.2 Аминокислотный состав кислотных, щелочных и ферментативных
ги дрол изатов.
3.3 Качественная оценка питательных сред, приготовленных на основе кислотных, щелочных и ферментативных гидролизатов мяса
3.3.1 Характеристика сред по биологическим показателям.
3.3.2 Оценка качества сред по пигменто и индолообразованию тестштаммов
3.4 Сравнительная оценка качества полученных питательных сред
с коммерческими аналогами
ГЛАВА 4 ИЗУЧЕНИЕ ВОЗМОЖНОСТИ ИСПОЛЬЗОВАНИЯ СОИ ДЛЯ КОНСТРУИРОВАНИЯ МИКРОБИОЛОГИЧЕСКИХ СРЕД
4.1 Определение свойств соевых питательных основ.
4.1.1 Физикохимические показатели полученных гидролизатов.
4.1.2 Аминокислотный состав соевых гидролизатов
4.2 Разработка технологии приготовления питательных сред для культивирования чумного микроба на основе соевых
гидролизатов
4.2.1 Сравнительное изучение ростовых качеств питательных сред, приготовленных с использованием ферментативного
гидролизата сои бобов
4.2.2 Оценка ростовых качеств питательных сред, приготовленных
из щелочных и кислотных гидролизатов сои бобов.
4.2.3 Оценка ростовых качеств питательных сред, приготовленных
на ферментативной основе продуктов переработки сои.
4.2.4 Оценка качества соевых сред по пигменто и индолообразованию тестштаммов.
4.3 Биохимические свойства чумного микроба при культивировании
его на основе соевых питательных сред
4.4 Оценка сохранения качества плотных питательных сред при
хранении соевых основ.
ГЛАВА 5 ИЗУЧЕНИЕ ВОЗМОЖНОСТИ ИСПОЛЬЗОВАНИЯ ПИТАТЕЛЬНЫХ СРЕД НА ОСНОВЕ ФЕРМЕНТАТИВНЫХ ГИДРОЛИЗАТОВ СОИ ПРИ ПРОИЗВОДСТВЕ ЧУМНОЙ ВАКЦИНЫ
5.1 Использование питательных сред, приготовленных на ферментативных основах сои бобов, в качестве накопительных
при культивировании вакцинного штамма чумного микроба.
5.2 Изучение иммуногенных свойств вакцинного штамма
чумного микроба, выращенного на соевых средах.
ЗАКЛЮЧЕНИЕ .
ВЫВОДЫ .
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ


Ферментативный гидролиз по сравнению с вышеупомянутыми способами обладает рядом преимуществ, прежде всего, созданием высококачественных гидролизатов и мягкими режимами обработки, максимально сохраняющими набор аминокислот нативных белков в доступной и активной форме 2, 9. Питательные среды, приготовленные на основе белковых ферментативных гидролизатов с добавлением ростостимулирующих факторов, обеспечивают оптимальные условия для проявления физиологических особенностей микроорганизмов , 8, 9. Для увеличения скорости роста микроорганизмов и большего выхода биомассы в питательные среды вводят стимуляторы роста. В дрожжевые экстракты, аутолизаты, диализаты 9, , 3, 9, 4. Улучшить условия культивирования бактерий можно путем добавления к питательным средам некоторых ионообменных смол . Совершенствование существующих и разработка новых технологических процессов производства питательных основ и сред во многом определяется видом используемого сырья, его качеством, химическим составом, биологическими свойствами. При определении наиболее приемлемого и доступного сырья животного и растительного происхождения тщательное внимание уделяют определению биологической ценности используемых продуктов. В достаточно высокой степени о ценности отдельных субпродуктов свидетельствует их химический и аминокислотный состав. По аминокислотному составу, особенно по содержанию незаменимых аминокислот, сердце, мозги, селезенка очень близки к мясу. По содержанию лизина, треонина, изолейцина, лейцина и фенилаланина сердце и селезенка практически не отличаются от мяса. Кроме того, в субпродуктах содержатся витамины группы В, пантотеновая кислота, биотин, ниацин 4. В практике производства микробиологических питательных сред для культивирования различных микроорганизмов находят применение автолизаты и ферментолизаты селезенки 6, 7, ферментативные гидролизаты сердечной мышцы крупного рогатого скота 2. Настой из сердца и мозга используется для выращивания стрептококков и гонококков 3. Для выделения и культивирования патогенных грибов рекомендована, как наиболее подходящая, среда содержащая, кроме обычно используемых компонентов, еще и сердечномозговой экстракт 7. Еще в году и А. Ф.Б. Самсонов 0 занимался изучением характера роста чумного микроба на среде, приготовленной из гидролизатов печени и селезенки, взятых от теленка и собаки. В результате работы автор сделал вывод, что добавление лизатов этих органов значительно улучшает качество агара. Для получения вакцинных штаммов чумного микроба с повышенной устойчивостью к лиофилизации Н. В. Лопатина, Л. А. Наталии 0 использовали агар на основе селезенки с добавлением солей. При изучении выживаемости вакцинного штамма ii i V . V лиофилизированного в разных средах высушивания, суспензии микробных клеток готовили путем смыва микроорганизмов с поверхности селезеночного агара с добавлением белка пшеничных отрубей 9. Перспективным сырьевым источником для использования в микробиологической практике является кровь сельскохозяйственных животных. Добавление крови и ее сыворотки широко используется при выращивании ряда микроорганизмов 6, 6, 8, 9. Роль и значение их в составе питательных сред довольно разнообразно. Они обладают способностью адсорбировать ингибиторные продукты метаболизма, являются источником гемина, жирных кислот, необходимых для роста ряда микроорганизмов и обеспечивают выявление протеолитических и гемолитических свойств микробов. В данных, характеризующих аминокислотный состав крови крупного рогатого скота КРС, можно отметить хорошую сбалансированность белков крови по фенилаланину, треонину, лизину, лейцину, валину, и недостаточную по метионину и изолейцину. Кроме того, кровь является богатым источником микроэлементов, особенно железа 4 и минеральных солей, так же содержит витамины группы В, витамины А, С, Д, Е, К . Разработан метод получения бактериологического пептона с применением цельной крови КРС, и изучена возможность его использования в качестве питательной основы при выращивании микроорганизмов в различных питательных средах .