Полимерные дисперсные системы медико-биологического назначения

• Автор: Станишевский, Ярослав Михайлович
• Шифр специальности: 03.00.23, 02.00.06
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2001
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 150 с. : ил

СОДЕРЖАНИЕ
ВВЕДЕНИЕ

ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. Полимерные микросфсры биомедицинского назначения

1.1.1. Получение полимерных микросфер методом гетерофазной полимеризации

1.2. Иммобилизация биолигандов на поверхности полимерных микросфер

1.2.1. Иммобилизация биолигандов на поверхности полимерных микросфер

путем физической адсорбции.

1.2.2. Ковалентная иммобилизация биолиганлов на поверхность полимерных носителей.

1.3. Применение полимерных микросфср в биоанализс

1.3.1. Полуколкчествеиные методы тесты, проводимые при участии частиц полимерных суспензий.
1.3.2. Комплексные методы анализа биоспецифических взаимодействий, при
участии полимерных мнкросфер.
1.3.3. Полимерные суспензии для проведения реакции фагоцитоза. ГЛАВА
ОБЪЕКТЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
2.1. Исходные вещества.
2.2. Методы исследования.
2,2.1 Получение полимерных суспензий в реакторе
2.2.2. Дисперсионная полимеризация.
2.2.3. Очистка полимерных суспензий
2.2.4. Определение содержания полимера в суспензии сухой остаток.
2.3 Определение размера частиц методом фотон корреляционной спектроскопии
2.4. Определение 4 потенциала из данных по электрофорезу частиц, методом фотон корреляционной спектроскопии
2 5 Иммобилизация биолигандов на поверхности полимерных микросфер.
2.5.1. Адсорбция белков на поверхность полимерных мнкросфер.
2.5.2. Ковалентное связывание биолигандов с функциональными группами полимерных микросфер
2.6 Реакция латексной агглютинации РЛА.
2.7. Выбор сенсибилизирующей дозы
2.8. Оценка фагоцитарной активности полинуклеаров.
ГЛАВА 3.
РЕЗУЛЬТАТЫ И ИХ ОБСУЖДЕНИЯ.
3.1.Синтез полимерных суспензий для создания тестсистем
биомедицинского назначения
3.2.Создание тестсистем на фибронектии 5Б
3.3 Влияние способа иммобилизации биолиганда
на устойчивость частиц суспензии.
3.4 Получение антительных диагностических тестсистем
заданной специфичности.
3.5. Полимерные микросферы для изучения клеточных рецегпоров.
3.6. Заключение.
3.7. Выводы.
ЛИТЕРАТУРА


Необходимыми условиями проведения дисперсионной полимеризации в органической среде является присутствие растворителя, растворяющего мономер, но осаждающего образующийся полимер, а также стсрического полимерного стабилизатора, обеспечивающего стабилизацию образующихся полимерных частиц. Этим методом синтезированы микросферы с диаметрами в интервале 1Змкм. ЮОмкмольг полимера 5. Метод затравочной полимеризации удобен тем, что позволяет регулировать как размер частиц полимерных суспензий, так и природу функциональных групп на их поверхности 2,4,6,64. Основной задачей при затравочной полимеризации мономеров являегся поддержание постоянного числа набухших мономером частиц, и проведения в них полимеризации до полкой конверсии мономера Частицы конечной полимерной суспензии характеризуются гетерогенной морфологией, то есть внугриглобулярной композиционной неоднородностью, и имеют структуру типа ядрооболочка например, полистирольнос ядро, окруженное полиакриловой оболочкой, или наоборот. Другим способом получения частиц с узким РЧР является гстсрофазная осадительная полимеризация различных мономеров. Ее обычно проводят в средах, в которых образующийся при синтезе полимер нерастворим. Недостатком этого способа синтеза является плохая воспроизводимость результатов и невысокая устойчивость в буферных растворах 1. Методом осадительной полимеризации получают полимерные суспензии с альдегидными группами на поверхности частиц. Описаны два способа получения полиакролеиновых микросфср с узким РЧР анионная осадительная полимеризация в иголочных условиях 6 и радикальная эмульсионная полимеризация с использованием
уизлучеиия либо инициирующей окислигельновостановкгельной системы 7. Этими способами были получены полиакролеиновые микросферы с диаметрами 0, 0,2мкм и коэффициентом вариации менее методом анионной полимеризации и 0,0, до 5,0мкм методом радикальной полимеризации. О плохой воспроизводимости процессов осадительной полимеризации акролеина сообщается в работах 8,4. Отмечается, что в частицах полиакролеиновых суспензий всегда содержится некоторое количество олигомерного продукта, наличие которою обусловлено особенностями механизма осадительной полимеризации Вследствие этого, с течением времени такие олигомерные молекулы могут диффундировать из объема частиц на их поверхность, что приводит к заметному ухудшению свойств микросфер в процессе хранения. Для устранения указанных недостатков были предложены ряд методов, позволяющих заметно повысить химическую стабильность полиакролеиновых микросфер, снизить физическую адсорбцию белковых молекул на их поверхности и повысить выход целевого продукта 80, 36. Существующие в настоящее время методы синтеза функциональных суспензий с аминогруппами на поверхности частиц сводятся либо к сложным многостадийным реакциям полимераналогичных превращений , либо к полимеризации или сополимеризацни дорогостоящих функциональных мономеров например, аминостирола 9 В этом отношении перспективным является использование методов модификации полимерных суспензий соединениями, содержащими реакционноспособные амикогрупы, и прежде всего аминокислотами 0,1. Основные типы полимерных суспеюий, частицы которых используются в качестве носителей биолнгандов в иммунохимическнх реакциях сведены в табл. Тип полимерной суспензии. Диаметр частиц мкм. Тип связывания лиганда с полимерными микрсюферами. Полистрол, идя суспензия 0. СЫеНП 2. ОЛИСТИрОЛМСГ. ХфИ ЛОВИ суспензия 0. Ковалентная иммобилизация . АФ З. АМГФ и ТБГ. Дя диагностики ревматоидных заболеваний. Для определения альфофстопротсина АФП в сыворотке крови больных первичным раком печени. Для выявления фаетора. Для определения альфамк кролюбулн на фертильности АМГФ и трофобластическо о рглобулина ТБГ в сыиорогтее крови. Полистирольная СуСПСНЗНЯ с эпоксидными группами т поверхности полимерных чикросфср. Ковалентная иммобилизация лрот ШЮСГЗффмЛЮК ХОВ Ы. Х антител Для выявления . Полистирольныс суспензии с эпоксидными и альдегидными группами ни поверхности частиц, 13 Ковалентная иммобилизация 1. МВ дифтерийный аиаюхеин Тестсистемы иа Иереи н кз Бруцеллез.