Вирус иммунодефицита крупного рогатого скота: индикация инфекции и распространенность в хозяйствах Российской Федерации

• Автор: Колотвин, Вячеслав Васильевич
• Шифр специальности: 03.00.23, 16.00.03
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2007
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 114 с. : ил.

Содержание

Список сокращений

Введение

Обзор литературы

Краткая историческая справка

Классификационное положение ВБИ

Особенности строения и жизненного цикла ретровируса

Морфология и физикохимические свойства ВБИ

Организация генома и репликация ВБИ

Структурные белки ВБИ

Культивирование ВБИ

Выявление ВБИ полимеразной цепной реакцией Эпизоотология ВБИ
Клинические симптомы и патогенез ВБИ инфекции Пути передачи ВБИ Антигенная активность ВБИ Заключение
Собственные исследования
Материалы и методы
Образцы цельной крови КРС Образцы мышечной ткани КРС Плазмида
Получение первичной культуры клеток БВЬ
Забор цельной крови КРС и выделение ДНК Подбор праймеров к геному провируса ВБИ Постановка ПЦР Регистрация результатов ПЦР Секвеиированис продуктов ЦР
3 Результаты исследований
3.1 Подбор ДНКмишени и конструирование праймеров для
идентификации ДНК ВБИ методом ПЦР
3.2 Сравнительный анализ методов выделения ДНК из
цельной крови КРС
3.3 Оптимизация процесса амплификации
3.4 Получение инфекционного вируса иммунодефицита КРС
3.5 Апробация чувствительности и специфичности
сконструированной тестсистемы ПЦР
3.6 Выявление распространенности ВБИ КРС в стадах
Московского региона
.7 Выявление распространенности ВБИ КРС в стадах
Ставропольского края
3.8 Результаты секвенирования продуктов ПЦР
3.9 Результаты исследования мясного сырья КРС с помощью
праймеров 2
4 Обсуждение результатов исследования
Выводы
Практические предложения
Список литературы


При экспериментальном заражении телят у них появлялись противовирусные антитела и развивалась гиперплазия лимфатических узлов. Вирус бычьего иммунодефицита, встречается во многих странах мира и часто сопутствует другой ретровирусной инфекцией, вызываемой вирусом бычьего лейкоза ВБЛ , , i , i . Эпизоотологическая обстановка по ВБЛинфскции в нашей стране хорошо изучена, разработаны методы диагностики и внедрены эффективные системы противолейкозных мероприятий Гулюкин и др. Бурба, Шишков и др. ВБИ среди крупного рогатого скота на территории Российской Федерации Федоров, Верховский . Целыо наших исследований была разработка диагностической тестсистемы ПЦР и изучение распространения ВБИ в некоторых хозяйствах крупного рогатого скота на территории РФ. ДНК ВБИ. Разработана ПЦРтестсистема для идентификации провирусной ДНК вируса бычьего иммунодефицита в крови крупного рогатого скота. Подобраны видоспецифичные праймеры для идентификации ДНК провируса вируса бычьего иммунодефицита. РВЬ, пригодная для размножения инфекционного ВБИ. Получен инфекционный ВБИ, соответствующий референтному штамму . Проведена оценка чувствительности и специфичности тестсистемы. Проведено исследование крови крупного рогатого скота из нескольких животноводческих хозяйств на содержание провирусной ДНК. Впервые на территории Российской Федерации выявлены животные, инфицированные ВБИ. Проведена сравнительная оценка распространенности вирусов бычьего иммунодефицита и бычьего лейкоза в стадах Московской области и Ставропольского края. Показано, что варианты вируса иммунодефицита, циркулирующего в хозяйствах нашей страны, отличаются от стандартного штамма вируса Я по гену ро1. Проведено исследование партий импортного говяжьего тримминга, полученных из стран Восточной Европы, Евросоюза, Южной Америки и показана возможность выявления ДНКпровируса ВБИ в образцах мяса КРС. Результаты научных исследований были использованы при разработке методических рекомендаций по диагностике инфекции, вызванной ВБИ с помощью полимеразной цепной реакции Утверждены академикомсекретарем отделения ветеринарной медицины РАСХП А. М.Смирновым г. ДНК ВБИ методом полимеразной цепной реакции. По материалам диссертации опубликовано 6 работ. Результаты работы доложены на молодежной международной школеконференции молодых ученых Биотехнология будущего Симпозиума ЕСРоссия Перспективы сотрудничества в области биотехнологии в 7ой Рамочной программе СанктПетербург, на международной юбилейной научнопрактической конференции, посвященной 0летию Курской биофабрики и агробиологической промышленности России Курск, на международной конференции Живые системы и биологическая безопасность населения Москва, г. Результаты работы доложены и обсуждены на заседании секции инфекционной патологии животных отделения ветеринарной медицины РАСХН 1 ноября года. Вирус иммунодефицита крупного рогатого скота вирус бычьего иммунодефицита, ВБИ был первоначально изолирован в США в году Мартином Ван Дер Маатеном и коллегами от молочной коровы с персистирующим лимфоцитозом, прогрессирующей слабостью и истощением V , , , . Этот изолят обозначили как . Выделенный возбудитель индуцировал образование синцития в культуре клеток и структурно был подобен вирусу виснымаеди овец. V , сообщили о результатах экспериментального заражения телят агентом . Отметили два характерных признака, типичных для острых лентивирусных инфекций выраженное влияние на иммунную систему и иерсистенцию вируса. У всех животных регистрировали выраженную лимфопролиферативную реакцию, которая характеризовалась значительным увеличением лимфатических узлов и умеренным лимфоцитозом. У зараженных животных вирус выделялся через 8 2 недель после заражения. После года многократно пассировали и легко адаптировали к росту на клеточной культуре тимуса собаки. Этот изолят многие ученые широко используют в качестве референтного штамма ВБИ.