Феногенетический анализ температурочувствительной летальной мутации Welt у Drosophila melanogaster

• Автор: Викулова, Валентина Константиновна
• Шифр специальности: 03.00.15
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 1985
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 192 c. : ил

Третий подход основан на определении в развитии стадии, чувствительной к воздействию фактора, изменяющего экспрессивность и пенетрантность мутантного гена, например, температуры или стадии, чувствительной к воздействию фенокопиругощего агента. I анализ проявления мутантной ткани у соматических мозаиков , . В зависимости от цели и обстоятельств используются разные комбинации этих методов, однако наиболее удобными и распространенными являются первые два. Прежде, чем перейти к разбору подходов, применяемых для определения места и времени действия летальных мутаций у дрозофилы, необходимо остановиться на особенностях развития насекомых с полным превращением, к каковым она относится. У этих насекомых существуют два типа дифференциации, разделенные большим промежутком времени. Первый тип, собственно эмбриональная дифференциация происходит на стадии яйца i, i, . Ядра первых тринадцати делений дробления формируют синцитий. При девятом делении ядра мигрируют в кортекс, а после тринадцатого образуются мембраны клеток, и возникает однослойная клеточная бластодерма. Сразу после бластодермальной стадии происходит гаструляция и сегментация. За сегментацией следует вычленение зачатков имагинальных покровов насекомого имагинальных дисков. В результате эмбриональной дифференциации формируется личинка, способная к активному образу жизни, тогда как зачатки имагинальных органов сохраняют свой эмбриональный характер. В течение
личиночного развития клетки имагинальных дисков пролиферируют, имагинальные диски растут, но не дифференцируются. Клетки собственно личиночных тканей увеличиваются в размере, не вступая в митоз. Их отличительным свойством является политенность хромосом i, v,i, . Во время второго типа дифференциации дифференциации метаморфоза, наступающей после окукливания, имагинальные диски эвагинируют и образуют покровы имаго в их конечном виде. Во время метаморфоза пролиферация клеток имагинальных дисков прекращается i, v, i, . Если мутантный фенотип клона имагинальных клеток или трансплантированного зачатка развивается только в соответствии с их генетической конституцией, независимо от генотипически отличающегося окружения, такой процесс развития считают автономным. Если фенотип формируется не только в соответствии с генетической конституцией клеток клона или зачатка, а зависит и от веществ, вырабатываемых генотипически отличной окружающей тканью, процесс неавтономен , . В г. Штерн установил, что наиболее частой причиной появления небольших пятен мутантной ткани у мух, гетерозиготных по соответствующим мутациям, является митотический кроссинговер , . Штерном было также доказано , , что митотический кроссинговер происходит в клетках, находящихся на стадии четырех хроматид рис. I. При индукции рентгеновским облучением частота митотической рекомбинации резко возрастает Е. М.Хованова, , что дает возможность использовать индуцированный соматический мозаицизм для клонального анализа. Если хромосому, несущую летальную мутацию маркировать видимой мутацией, а оппозитную хромосому другой видимой мутацией, то по уменьшению частоты появления двойных пятен по сравнению с контролем можно сделать заключение об автономности действия летальной мутации. При отсутствии второго маркера автономность проявления летального фактора устанавливается путем сравнения частоты одиночных пятен гомозиготных по летали и маркирующей мутации с частотой пятен, гомозиготных только по маркирующей мутации , . Демерец назвал летальные мутации с клеточноавтономным действием клеточными деталямит. Он отметил, что термин клеточная деталь не означает проявления летального действия в каждой генотипически летальной клетке. Клеточный летальный эффект может быть установлен лишь относительно рассматриваемой области покровов. Как будет видно из нашей работы, небольшие различия в частотах летальных и нелетальных клонов могут быть следствием ТОГО, ЧТО и в ПОЛНОСТЬЮ ГОМОЗИГОТНОЙ особи мутантный ген проявляется лишь в ограниченных участках ткани. Ограниченная область проявления мутантного гена снижает разрешающую способность метода соматического мозаицизма.