Структура хромосомной патологии среди пациентов с мужским бесплодием и патозооспермией

• Автор: Савельева, Анна Петровна
• Шифр специальности: 03.00.15, 03.00.25
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2002
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 167 с.

ВВЕДЕНИЕ.

ГЛАВА I. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

1.1. Дифференцировка и детерминация

пола у человека.

1.1.1. Уровни детерминации пола у человека

1.1.2. Формирование органов мужской

репродуктивной системы.

1.2. Сперматогенез. Особенности процесса у человека.

1.2.1. Генетический контроль сперматогенеза.

1.2.2. Современные подходы к анализу

сперматогенеза при мужском бесплодии.

1.3. Аномалии хромосом фактор нарушения
репродуктивной функции мужчин.
1.3.1. Хромосомные аномалии, установленные при
анализе соматических клеток
1.3.1.1. Структурные аномалии хромосом.
1.3.1.2. Числовые аномалии хромосом
анеуплоидия хромосом
1.3.1.3. Наследственные синдромы, вызванные анеуплоидией половых хромосом
1.3.1.4. Механизмы, лежащие в основе возникновения
числовых аномалий хромосом
1.3.2. Аномалии хромосом, выявленные в
половых клетках
ГЛАВА И. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ
ИССЛЕДОВАНИЯ
II. 1. Объект исследования
.2. Цитогенетический метод
И.2.1. Культивирование лимфоцитов
периферической крови и приготовление
препаратов метафазных хромосом
И.2.2. окрашивание хромосом.
II.2.3. Принцип анализа хромосомных препаратов
И.З. Анализ половых клеток
П.3.1. Спермиологический анализ.
.3.2. Гистологический анализ препаратов биоптата
яичка пациентов с бесплодием
.3.3. Метод получения тотальных препаратов ядер половых клеток из эякулята.
И.З.4. Количественный кариологический анализ состава незрелых половых клеток из эякулята по стадиям их развития
II.4. Молекулярноцитогенетический метод
II.4.1. Флюоресцентная гибридизация i i I на препаратах половых клеток эякулята с использованием проб, меченных
различными флюорофорами.
ГЛАВА 1. РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ
ИССЛЕДОВАНИЙ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ
III. 1. Формирование потока и групп пациентов мужского
пола по основному клиническому диагнозу и результатам спермиологического анализа.
1.2. Цитогенетический анализ лимфоцитов
и количественный анализ состава
незрелых половых клеток эякулята.
Ш.2.1. Контрольная группа фертильные доноры эякулята лица с кариотипом ,ХУ и нормозооспермией
Ш.2.2. Группа пациентов с диагнозом нормозооспермия по результатам спермиологического анализа и бесплодием.
Ш.2.3. Группа пациентов с диагнозом азооспермия
по результатам спермиологического анализа.
Ш.2.4. Группа пациентов с диагнозом олигозооспермия
по результатам спермиологического анализа.
Ш.2.5. Группа пациентов с диагнозом астенозооспермия
по результатам спермиологического анализа.
Ш.2.6. Группа пациентов с диагнозом тератозооспермия
по результатам спермиологического анализа.
Ш.З. Сравнительный анализ данных гистологического исследования биоптатов яичка и результатов количественного кариологического анализа состава незрелых половых клеток эякулята ККА НПК пациентов с нарушением сперматогенеза.
Ш.4. Анализ частоты нерасхождения хромосом 1,
X и У с помощью П8Нанализа в
половых клетках эякулята
Ш.4.1. Группа пациентов мужского пола с
нормальным кариотипом ,ХУ
Ш.4.2. Группа пациентов с синдромом Клайнфельтера.
ГЛАВА IV. ЗАКЛЮЧЕНИЕ
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ
Список сокращений
нарушение репродуктивной функции
ПК половые клетки
НПК незрелые половые клетки
ККА НПК количественный кариологический анализ состава
незрелых половых клеток
ХА хромосомные аномалии
МВПР множественные врожденные пороки развития
СА спонтанный аборт
ЭКО экстракорпоральное оплодотворение
II внутрицитоплазматическая инъекция сперматозоида
i i ii
I i i iii флюоресцентная
гибридизация на препарате
Введение


Одним из эффективных подходов в терапии бесплодия являются методы репродуктивной медицины ЭКО экстракорпоральное оплодотворение, ИКСИ интрацитоплазматическая инъекция сперматозоида в яйцеклетку. В связи с их широким применением в том числе в терапии бесплодия неясного генеза и при синдроме Клайнфельтера возникла необходимость мониторинга структуры хромосомной патологии и тестирования гамет пациентов, включенных в программы репродуктивных технологий, с целью проведения соответствующего медикогенетического консультирования. Хромосомные аномалии половых клеток, в отличие от хромосомопатий соматических клеток, влекут за собой изменения в ряду поколений, поэтому более значимы с точки зрения сохранности вида. Такая ситуация указывает на необходимость расширения современных представлений о генетической регуляции репродукции и, в частности, сперматогенеза и разработки новых подходов в профилактике, а также усовершенствования методов и схем комплексной лабораторной диагностики нарушения репродуктивной функции. II делениях мейоза мужчин с кариотипом ,X и нормозооспермией и с синдромом Клайнфельтсра кариотип ,XX. ГЛАВА I. Схема I Формирование пола у человека Г. Васильченко, Курило, . При совпадении всех уровней дифференцировки пола развивается индивидуум с соответствующими половыми и генеративными потенциями, половым самосознанием, психосексуальной ориентацией и полоролсвым поведением. Развитие гонад предствляет собой уникальное эмбриологическое явление Все прочие зачатки органов в ходе норматьного развития дифференцируются в орган лишь одного типа. Зачаток гонады в норме обладает способностью развиваться в двух направлениях в результате дифференцировки он может превратиться либо в яичко, либо в яичник. У человека гонады дифференцированы по полу уже у 6недельного эмбриона, т. Курило, , . Прежде чем этот выбор будет сделан, гонада млекопитающих и человека некоторое время находится в индифферентном состоянии, когда у нее не выражены морфологические признаки ни женской, ни мужской гонады. У человека зачаток гонады формируется из промежуточной мезодермы на четвертой неделе внутриутробного развития и сохраняет половую индифферентность до шестой недели. В течение этой индифферентной стадии эпителий полового валика пролиферирует в лежащую над ним рыхлую соединительную мезенхимную ткань. Эти эпителиальные слои формируют первичные половые тяжи, которые будут окружать первичные половые клетки, мигрирующие в гонады на седьмой неделе после оплодотворения. И в XX, и в Xгонадах половые тяжи остаются связанными с поверхностным эпителием Райцина, . Рассмотрим формирование органов мужской репродуктивной системы. Первичные половые тяжи продолжают пролиферировать в течене восьмой недели, глубоко внедряясь в соединительную ткань. Эти тяжи сливаются, образуя сеть внутренних медуллярных половых тяжей, а на дистальном конце формируется более тонкая сеть яичка. Со временем половые тяжи утрачивают связь с поверхностным эпителием и отделяются от него толстым внеклеточным матриксом белочной оболочкой i i. Таким образом, половые клетки оказываются в тяжах внутри яичка. В период внутриутробного развития и в детстве эти тяжи остаются плотными. Однако, во время полового созревания в них появляется полость, и они преобразуются в семенные канальцы, а первичные половые клетки приступают к сперматогенезу. Сперматозоиды транспортируются через сеть яичка в семявыносящие канальцы, которые, являясь остатками мезонефрической почки, связывают яички с вольфовым каналом. Последний служит собирающим каналом мезонефроса. Вольфов канал дифференцируется в v проток, через который сперма проходит в уретру и выводится наружу. Тем временем в процессе развития интерстициальные мезенхимные клетки дифференцируются в клетки Лейдига, продуцирующие тестостерон. Клетки половых тяжей дают начало клеткам Сертоли, сскретирующим антимюллеров фактор. Дифференцировка наружных мужских половых органов происходит на 8й неделях и завершается к 5му месяцу внутриучробного развития. Половой член формируется из полового бугорка половые валики срастаются и формируют кожную часть мошонки.