Клинико-генотипический полиморфизм муковисцидоза среди населения Краснодарского края

• Автор: Рукавичкин, Дмитрий Васильевич
• Шифр специальности: 03.00.15
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2007
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 153 с. : 18 ил.

СОДЕРЖАНИЕ

Список используемых сокращений

Введение характеристика работы

Глава 1. Муковисцидоз общие представления обзор литературы

1.1. Исторические аспекты изучения муковисцидоза

1.2. Современные представления о муковисцидозс

1.3. Клинические варианты муковисцидоза

1.4. Молекулярногенетическая характеристика гена СРТЯ и его продуктов

1.4.1. Структура гена СРТЯ и матричной РК

1.4.2. Структура и функции белкового продукта гена СПЯ

1.4.3. Классификация мутаций гена

1.4.4. Ассоциации полиморфных внутривенных и внегенных
маркеров у больных муковисцидозом
1.5. Распространнность мутантных аллелей гена СГТЯ в
разных популяциях
1.6. Мониторинг и прогнозирование муковисцидоза в современный период
Глава 2. Материалы и методы исследования
2.1. Общая характеристика больных
2.2. Методы исследования
2.2.1. Ретроспективный анализ
2.2.2. Молекулярногенетическая диагностика мутаций в гене Я
2.2.3. Статистическая обработка результатов
Результаты и обсуждение
Глава 3. Характеристика популяции и клинический полиморфизм МВ
3.1. Этнодемографическая характеристика краснодарской популяции
3.2. Клинические формы МВ
Глава 4. Генотипический полиморфизм МВ
4.1. Спектр мутаций гена СЯТЯ у больных МВ в Краснодарском крае
4.2. Анализ аллелей внутригенных и внегенных маркеров в выборках
мутантных и нормальных хромосом
4.2.1. Распределение частот аллелей и генотипов внутригенных маркеров 1УаСАТТ, М0У, ТШ, ТЦВ гена СРТЯ в выборках мутантных и нормальных хромосом
4.2.2. Распределение частот аллелей и генотипов внегенных маркеров ХУ.2С, КМ. ,., МеШ в выборках мутантных и нормальных хромосом
Глава 5. Клиникогснотипический анализ МВ в краснодарской
популяции
5.1. Клиникогенотипическис ассоциации
5.2. Ассоциации генотипов с уровнем хлоридов в поте больных
5.3 Этнотерриториальное распределение больных МВ в
краснодарской популяции с мутациями в гене СРТЯ
5.4 Оценка частоты МВ
Заключение
Выводы
Литература


i ii i . В.i . В дальнейшем было установлено, что синтезируется гранулоцитами не только у больных , но и у больных хронической миелоидиой лейкемией. После картирования гена на хромосоме 1, нуклеотидный анализ его кДНК и последовательности аминокислот в синтезируемом белке, была подтверждена тождественность лейкоцитарному протеину. Таким образом, идентифицирован был не сам ген МБ, а ген другого белка, функция которого изменялась вторично уже вследствие самого первичного биохимического дефекта. В х годах проведены исследования по изучению протсазной активности сыворотки крови больных выявление сериновой протеазы, анализ е структурных особенностей и изучение белков, связывающихся с ней. Полученные результаты были противоречивы, а предлагаемые для диагностики методы не были надежно воспроизводимы. Так, потерпела неудачу попытка рассматривать , как одну из форм болезней накопления, т. .i . Выявленные различия в содержании термолабильных лизосомных гидролаз в нормальных и МВклетках не нашли теоретического и практического применения. у плода, что позволило применить данный тест в пренатальной диагностике . . . . лежит нарушение транспорта ионов С1 через апикальные мембраны эпителиальных клеток. Это нашло подтверждение в экспериментах на культивируемых эпителиальных клетках потовых желез и бронхов, а также при изучении изолированных клеточных мембран эпителиальных клеток. Методом регистрации разницы потенциалов была установлена плохая проницаемость мембран эпителиальных клеток для ионов С1 . Впервые апробированный на клетках изолированной потовой железы i vi метод в дальнейшем был модифицирован, и в настоящее время с успехом применяется в клинике для определения назальных потенциалов, что позволяет достаточно точно проводить дифференциальную диагностику . Таким образом, при помощи перечисленных методов удалось доказать, что первичный дефект при лежит в самой апикальной мембране эпителиальных клеток. В норме хлорные каналы эпителиальных клеток открываются при их фосфорилировании цАМФзависимой протеинкиназой и действии АТФ, тогда как при эта функция оказывается полностью или частично утраченной. Картирование гена Сложности картирования гена заключались в отсутствии биологических моделей, на которых возможно было бы провести картирование гена. В конце х г. с нарушениями мембранного транспорта, а также аутосомнорецсссивный тип наследования данного заболевания . .x, . В году были опубликованы работы, в которых доказывалось, что ген локализован на 7 хромосоме . .ii а. . . .i . на средней трети длинного плеча хромосомы 7. Только благодаря совместным усилиям двух групп учных из Канады . i и . i, и США . i, удалось идентифицировать ген . Генетические исследования указывали на то, что потенциальный сегмент гена имеет правильную локализацию, но после интенсивных исследований, не удалось обнаружить продуктов экспрессии этого генного сегмента. Существенный вклад в решение этой проблемы внесла группа . i, которая создала библиотеку молекул ДНК, скопированных с матричных РНК, присутствующих в клетках потовых желез, где предполагалась экспрессия гена . Каждая копия ДНК соответствовала активному гену, и оказалось, что лишь одна из них содержала в себе участок, соответствующий тому, который нашли i и i с коллегами . . . .. i . . . В дальнейшем было показано, что обнаруженные последовательности принадлежат 5концу гена , что дало возможность сконструировать зонд, необходимый для того, чтобы проклонировать весь ген. Работы по поиску гена были завершены в году. К этому времени была выделена, проклонирована и просеквснирована кодирующая область гена и определен первичный молекулярногенетический дефект, который детерминирует развитие . . . .. i . . . .. , . V..