Связь между состоянием мембранного аппарата спермиев и их физиологическими показателями после замораживания

• Автор: Катков, Игорь Иванович
• Шифр специальности: 03.00.13
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 1985
• Место защиты: Харьков
• Количество страниц: 236 c. : ил

СОДЕРЖАНИЕ
ВВЕДЕНИЕ

ЛИТЕРАТУРНЫЙ ОБЗОР

I. Криогенные изменения в спершях. Мембранный аппарат как основной объект криоповреждений.
2. Механические свойства мембран и методы их изучения. Электромеханическая прочность как ванный патофизиологический параметр .

3. Липиды сперш функции, состав, изменение

при замораживании.

Резюме. Цели и задачи исследований.

СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ И ОБОЗНАЧЕНИЙ.

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ

РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ
I. Выяснение механизмов электрического пробоя мембран модельные опыты на зритрощтах
П. Электромеханическая прочность мембранного аппарата спермиев и физиологическое состояние клеток после замораживания
I. Электрический пробой мембран спермиев.
Специфика сперш как объекта исследований
2. Электромеханическая прочность мембран
спермиев и криорезистентность клеток
Ш. Липидный состав мембран спершев и криорезистентность клеток
У.Состояние мембранного аппарата после обработки клеток желтком.К механизму защитного действия липоидных соединений
I. Электромеханическая прочность клеточных
мембран при обработке липоидами
2.Липидный состав мембран спермиев после инкубации
с желтком .
У. Широкий производственный опыт по прогнозированию
криорезистентности клеток. Ш
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
ВЫВОДЫ .
ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ
ПРИЛОЖЕНИЯ .
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ


Значительное количество работ посвящено исследованию формы эритроцитов при воздействии различных факторов 4,6. Предприняты попытки гидродинамическими методами в потоке жидкости оценить прочность мембран. Клетки пропускают через микроскопическое отверстие К. НоЬпик 4 4. МоЬьнКал , . Е.Кг1а У I АМокстКм , . В работе д. Кг Сил. А У Иму Н12 уменьшается с ростом температуры и при С ЬЦ2 0, что связывается с температурными перестройками мембран. Можно мерять изгибную жесткость путем деформирования фиксированных клеток тонкой металлической пластинкой М АПоЬлпКл еАа И.Ивенс, Р. Скейлак, . Существенными недостаткам данной группы методов являются большая трудоемкость и непригодность для клеток, обладающих жестким цитоскелетом например, спермин млекопитающих . Широко распространннным методом оценки состояния мембран является осмотическая резистентность клеток в гипо реже в гипер тонических растворах непроникающих веществ. Осмотическая резистентность клеток меняется с возрастом М. ВеЬгщМа. .. , , при различных патологиях V. Покапал еЯа. Этот параметр сильно зависит от температуры В. , , наличия ионов Са2 ,3 Н . В.в. Аое , . Большое значение имеет липидный состав мембраны, в особенности содержание в них холестерина. Полагают, что разрыв мембран в первую очередь происходит в зоне контакта липидов с белками, там где отсутствует холестерин 3. , . Повышение содержания холестерина уменьшает осмотическую хрупкость эритроцитов Я. . i . С.П. Шашкевич с соавт. Вместе с тем,гипотонический гемолиз происходит в несколько стадий, соотношение времен которых сильно зависит от многих факторов. Все это затрудняет интерпретацию данных, полученных при определении осмотической резистентности клеток д. Определенную информацию о механических свойствах мембран можно получить, используя показатель резистентности клеток к действию ультразвуковых УЗ колебаний В. И.Вишневский,. Однако интерпретация данных затруднена вследствие побочных биохимических изменении в клетках И. Е.Эльпинер, , связанных с образованием свободных радикалов вследствие кавитационных процессов и т. А.И. Журавлев, . Интересным и перспективным методом исследований механических свойств мембран является воздействие на клетки высоких гидростатических давлений. В работах группы Циммерманна показано, что при давлении порядка атм в эритроцитах формируются сквозные поры А. Решила е а. Ъммеггиая i а. Недостатками метода являются невозможность получения резкого возрастания давления, сложность аппаратуры и большая затрата времени десятки минут на каждую пробу . В доступной литературе имеются работы по изучению механической прочности клеточных стенок водорослей, растений, бактерий . i м i тесни . В.Л. Что касается спермиев, то исследование механической прочности мембран косвенно связаны с изучением осмотических реакций спермиев на действие глицерина и других компонентов разбавителей В. К.Милованов, . Ъгеш , . , Н. В.А. Морозов, , Е. М.Платов, I0, А. Д.Бугров, , . Присутствие желтка в среде существенно повышает устойчивость мембран эритроцитов и спермиев к ультразвуку, перепаду гидростатического и осмотического давления Ф. И.Осташко, А. В.Марющенко, . Повышение механической прочности мембран является одним из проявлений эффекта фортификации Ф. И.Остатке , . Дня изучения механики плоских бислойных мембран БЛМ применяются электрострикционные методы, основанные на сжатии мембран во внешнем переменном электрическом поле В. Г.Ивков, Г. Н.Берестовский, В. С.Руднев с соавт. Однако при интерпретации данных следует учитывать возможность артефактов, связанных с наличием линз растворителя в мембранах, краевых эффектов мениска в зоне контакта мембран со стенками отверстия и т. Это приводит к значительным расхождениям несколько порядков в оценке вязкоупругих параметров мембран 6, Н. i, , , i , . .. Л 9 . Детальные исследования механических свойств БЛМ проведены В.