Функциональные реакции нейтрофилов и макрофагов на растительные полисахариды

• Автор: Попов, Сергей Владимирович
• Шифр специальности: 03.00.13
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 1999
• Место защиты: Сыктывкар
• Количество страниц: 108 с. : ил.

Содержание
Введение

Глава I Обзор литературы

1. Фагоцитарные реакции нейтрофилов и макрофагов

2. Способность фагоцитов распознавать полисахариды и

гликоконъюгаты.

3. Регуляция функциональной активности лейкоцитов

полисахаридами растений

Строение растительных полисахаридов.

Стимуляция фагоцитоза полисахаридами грибов и

водорослей
Взаимодействие лейкоцитов с гликанами и гликуроногликанами высших растений
Глава II Материалы и методы исследования
1. Растворы и реактивы.
2. Характеристика полисахаридных препаратов.
3. Получение суспензии нейтрофилов и макрофагов
4. Оценка адгезивных свойств фагоцитов.
5. Определение фагоцитарного показателя
6. Регистрация кислородного взрыва.
7. Измерение активности лизосомальных ферментов
8. Подсчет лейкоцитарного числа.
9. Статистическая обработка результатов
Глава III Результаты исследования
1. Функциональная активность фагоцитов при действии
растительных полисахаридов.
Адгезия нейтрофилов и макрофагов на пластик
Поглощение частиц латекса
Секреторная дегрануляция.
2. Влияние адгезии на активацию нейтрофилов и макрофагов
полисахаридами растении.
Реактивность макрофагов, адгезированных с помощью рецептора комплемента или рецептора мусорщика .
3. Секреция лизосомапьных ферментов и образование кислородных радикалов фагоцитами в бескальциевом и гиперкальциевом растворе
4. Влияние оубаина на миелопероксидазную активность макрофагов
5. Количество фагоцитов в крови и смыве из брюшной полости мышей после внутрибрюшинного введения полисахаридов. .
Глава IV Обсуждение результатов
1. Характеристика реакции нейтрофилов и макрофагов на полисахариды растений.
2. Зависимость функционального ответа клеток от адгезии
3. Возможные механизмы стимуляции фагоцитов растительными полисахаридами
4. Реакция лейкоцитов на введение полисахаридов i viv
Выводы.
Список литературы


Выяснение связи между структурой и физиологической активностью полисахаридов важно для понимания принципов регуляции фагоцитоза, и приобретает особое значение в связи с необходимостью создания и мму н окорри г и руклцих с ред ств. Цель настоящего исследования заключалась в определении способности нейтрофилов крови и тканевых макрофагов млекопитающих отвечать фагоцитарными реакциями на действие гликанов и гликуроногликанов растений. АТФзы в стимуляции макрофагов растительными полисахаридами. Научная новизна. Р1сеа v. Выявлены следующие отличия реакции фагоцитов на растительные полисахариды в сравнении с ответом на действие других биогликанов образование цитотоксичных продуктов фагоцитами в ответ на действие полисахаридов растений может происходить без изменения адгезивной способности клеток адгезированные и неадгезированные нейтрофилы крови отвечают респираторным взрывом на действие растительных полисахаридов в равной степени секреция лизосомальных ферментов, вызванная биогликанами растений, направлена из клетки, а не в фагосому. Обнаружено, что взаимодействие макрофагов с гликуроногликанами требует присутствия внеклеточного кальция. Выявлено участие мембранного ЫаК насоса в стимуляции макрофагов полисахаридами растений. Мышиные макрофаги, адгезированные с помощью рецепторамусорщика БЛ, впервые использованы в качестве тестмишени для действия растительных полисахаридов. Научнопракгическая значимость. Секреция лизосомальных ферментов и кислородный взрыв, вызываемый растительными полисахаридами в нейтрофилах и макрофагах, подтверждают предположение о том, что фаг оциты млекопитающих распознают полисахариды высших растений как чужеродный материал и стремятся его уничтожить. Отсутствие реакции фагоцитов на некоторые из изученных биогликанов вибурнан УОЗ, силенан БУ2 и пицеан РОЗ свидетельствует в пользу постулированного ранее положения о существовании у полисахаридной молекулы структурных особенностей, ответственных за инициацию фагоцитарного процесса. Продемонстрирована возможность избирательно регулировать отдельные клеточные реакции нейтрофилов и макрофагов млекопитающих полисахаридами высших растений, что может быть использовано при создании иммуномодуляторов направленного действия. В результате проведенного экспериментального исследования расширено представление о связи между структурой и физиологической активностью растительных полисахаридов. Предложено возможное объяснение механизма действия нейтральных полисахаридов на фагоциты неспецифическое связывание с мембраной. Способность полисахаридов калины избирательно стимулировать макрофаги, адгезированные с помощью рецептора 3 или , позволяет рекомендовать вибурнаны для дальнейшего изучения в качестве иммуномодуляторов, регулирующих функции отдельных субпопуляций макрофагов. Фагоцитарная активность нейтрофилов крови и тканевых макрофагов млекопитающих увеличивается в ответ на действие полисахаридов ряски малой i, смолевки обыкновенной i vi, калины обыкновенной Vi и ели сибирской i v. Секреция лизосомапьных ферментов и генерация кислородных радикалов фагоцитами, вызванная лемнанами, силенанами, вибурнанами и пицеанами, не сопровождается изменением адгезивной способности клеток. Взаимохюйствие перитонеальных макрофагов с растительными полисахаридами модулируется адгезией клеток. Рецептор комплемента 3, рецептормусорщик , а также кальцийзависимые лектины не опосредуют стимуляцию макрофагов нейтральными арабиногалактанами и галактоманнанами растений. Апробация работы. Результаты исследований были доложены и обсуждены на XIII Коми республиканской молодежной научной конференции г. Сыктывкар, Международном Симпозиуме по гликобиологии г. Брауншвайг, Германия, XIX Международном симпозиуме по углеводам г. Сан Диего, II1, XIV Менделеевском съезде по общей и прикладной химии г. Москва, IV Международной летней школе по иммунологии г. Пущино, III Всероссийском совещании Лесохимия и органический синтез г. Сыктывкар, . Публикации. По теме диссертации опубликовано пять печатных работ.