Исследование факторов, определяющих длительную потенциацию N-метил-D-аспартат зависимого компонента возбуждающего постсинаптического потенциала в CA1 области гиппокампа крыс

• Автор: Баязитов, Ильдар Талгатович
• Шифр специальности: 03.00.13
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2001
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 110 с. : ил.

Содержание

Список сокращений

ВВЕДЕНИЕ.

1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

2. МЕТОДИКА.

2.1. Приготовление срезов.

2.2. Экспериментальная установка

2.3. Раствор для перфузии.

2.4. Эксперименты с регистрацией фокальных потенциалов

2.5. Эксперименты по потенциации моно и гетеросинаптического входов

2.6. Измерение величин АМПАВПСП и НМДАВПСП.

2.7. Эксперименты с регистрацией внутриклеточных ответов
3. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ
3.1. Метода измерения НМДА компонента вызванных ответов.
3.1.1. Влияние прямого быстрого торможения на измерение НМДА компонента ВПСП.
3.1.2. Измерение величин АМПА и НМДА компонентов путем аппроксимации вызванных ответов суммой базовых компонентов
3.2. Влияние ТПСПа на развитие потенциации НМДА компонента в двухкомпонентном внеклеточном ВПСП в СА1 области срезов гиппокампа крыс.
3.2.1. Поведение НМДАВПСП при вызове ДП АМПАВПСП в условиях интактиого торможения.
3.2.2. Изучение поведения НМДАВПСП црИ вызове ДП АМПАВПСП в условиях блокады быстрого торможения
3.3. Зависимость ДП НМДА компонента ВПСП от силы афферентной тетанизации.
3.4. Сравнение изменений АМПА и НМДА компонентов минимальных ответов во время длительной потенциации в СА1 области гиппокампальных срезов крыс
4. ОБСУЖДЕНИЕ.
ЛИТЕРАТУРА


. Действительно, соотношение количества рецепторов разного типа в разных синапсах варьирует, также как и величина ДП, что может привести к различиям в потенциации АМПА и НМДА компонент суммарных ответов даже при равной потенциации обоих компонентов в отдельных синапсах Клещевников . Болес гого, применявшиеся методы не позволяли достаточно точно измерять отдельные компоненты. В ряде работ регистрировались минимальные I1, вызываемые активацией ограниченного количества пресинаптических волокон . I . i . i , однако имелись другие недостатки. В частности, использовалась высокая частота тестирования, например, 11,6 Гц I . i . ii . . ii . В этих работах . I . i . ДП, вызываемая афферентной тетанизацией, а потенциация, вызывавшаяся сочетанием низкочастотной афферентной активации с искусственной постсинаптической деполяризацией. Болес того, потенциация наблюдалась в течение короткого времени до 5 мин, реже до мин после ее вызова. Измерение АМПА и НМДА компонентов производилось не параллельно, а при разных уровнях мембранного потенциала, что могло существенно влиять на полученные результаты. Таким образом, в настоящее время в литературе нет однозначных результатов, объясняющих поведение НМДА компонента ВПСП вопервых, при вызове ДП вовторых при заболеваниях, связанных с перевозбуждением НМДА рецепторов. Актуальность изучения поведения НМДА компонента ВПСП в процессе поддержания ДП определили постановку следующих цели и задач. ВИСИ в области СЛ1 гиппокампа. Сравнить характеристики ДП НМДА и АМПА компонентов в минимальных генерируемых активацией отдельных синапсов ВГ1СТ. Величина потенциации НМДА компонента фокальных ответов и неминимальных ВПСП в области СА1 гиппокампа определяется потенциацией синапсов локальных возбуждающих путей. На уровне отдельных синапсов величина ДП АМПА и НМДА компонентов различается лишь в начальный период после тетанизации до мин и не различается в более поздние периоды. Разработан способ одновременного измерения величин НМДА и АМПА компонентов ВИСИ в составе двухкомпонентных гиппокампальных ответов. Показано, что для адекватного измерения НМДА компонента ВПСП в условиях частичного подавления АМПА рецепторов требуется полное выключение быстрого торможения селективными антагонистами ГАМКа рецепторов. Показано, что относительная величина потенциации АМПА и ИМДА компонентов вызванных гиппокампальных ответов в СА1 области определяется силой афферентных стимулов во время тстанизации использование низкой силы стмуляции во время тстанизации приводит к преимущественной погенциации АМПА компонента, тогда как при высокой силе стимуляции во время тстанизации благоприятствуют погенциации НМДА компонента ВПСП. Впервые изучено изменение АМПА и НМДА ответов на уровне ограниченного количества синапсов при вызове минимальных ответов клеток СА1 области гиппокампа. Показано, что в случае колокализации АМПА и НМДА рецепторов, выражающейся в значительной корреляции между амплитудами АМПА и НМДА компонентов в ответах на одиночные стимулы, величина ДП этих компонентов не различается. Однако, на ранней фазе развития ДП до мин величина роста АМПА компонента превосходит увеличение НМДА компонента. Для объяснения результатов экспериментов предложена гипотеза, согласно которой величина ДП НМДА компонента ВПСП в области СА1 гиппокампа определяется в основном иотенциацией синапсов локальных возбуждающих путей, содержащих значительное количество НМДА рецепторов, тогда как потеициация АМПА компонента зависит в основном от потенциации синапсов колатеральнокомиссурального входа. На уровне одного синапса степень ДП АМПА и НМДА компонентов ВПСП различается в течение первых мин после тстанизации и не различается в более поздние периоды. Результаты данной работы разрешили одно из существовавших в литературе противоречий, касающихся способности НМДА компонента ВПСП к пластическим изменениям.