Пептиды эпифиза в формировании ответа Пейеровых бляшек крыс на антиген

• Автор: Зимина, Ольга Александровна
• Шифр специальности: 03.00.13
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2003
• Место защиты: Санкт-Петербург
• Количество страниц: 149 с.

ОГЛАВЛЕНИЕ Список использованных сокращений ВВЕДЕНИЕ

ГЛАВА 1. Общие методические приемы, использованные в работе

1.1 Методика исследования влияния пептидов эпифиза на формирование гуморального иммунного ответа Пейеровых бляшек на орально предъявляемый антиген
1.2 Методика оценки гуморального ответа Пейеровых бляшек крыс и их чувствительности к адренергическим воздействиям
1.3 Методика исследования влияния эпифизарных пептидов на выделение иммуноглобулинов из Пейеровых бляшек, не подвергавшихся и подвергавшихся воздействию адреноблокаторов
1.4 Методика исследования влияния различных концентраций Эпифизана и Эпиталона на освобождение иммуноглобулинов Пейеровыми бляшками неиммунизированных и орально иммунизированных крыс
1.5 Методика исследования ориентировочноисследовательского поведения крыс в тесте открытое Оле
1.6 Методика определения цитокинпродуцирующей активности лейкоцитов с помощью реакции торможения миграции лимфоцитов РТМЛ
1.7 Методика биохимического определения содержания иплмуноглобулинов в инкубационных средах
1.8 Методика радиоиммунологического определения содержания кортикостерона в плазме крови

1.9 Статистическая обработка результатов.

ГЛАВА 2. Влияние оральной иммунизации овальбумином на формирование иммунного ответа Пейеровыми бляшками
2.1 Основные сведения о структурнофункциональной организации Пейеровых бляшек
2.2 Особенности методики исследования
2.3 Результаты исследования и их обсуждение
ГЛАВА 3. Влияние внутрибрюшинных инъекций эпифизарных пептидов в ходе оральной иммунизации овальбумином на антителообразование в Пейеровых бляшках
3.1 Краткая литературная справка об участии гормонов гипоталамогипофизарной системы и эпифиза в регуляции иммунного ответа организма
3.2 Особенности методики исследования
3.3 Результаты исследования и их обсуждение
ГЛАВА 4. Фармакологический анализ роли адренергических влияний в эффектах эпифизарных пептидов при формировании иммунного ответа в Пейеровых бляшках ,
4.1 Основные сведения об участии автономной нервной системы в иннервации Пейеровых бляшек
4.2 Особенности методики исследования
4.3 Результаты исследования и их обсуждение
ГЛАВА 5. Изменение функционального состояния ЦНС крыс при внутрибрюшинном введении пептидов эпифиза в ходе оральной иммунизации овапьбумином
5.1 Литературные сведения о взаимодействии ЦНС и иммунной системы
5.2 Особенности методики исследования
5.3 Результаты исследования и их обсуждение
ГЛАВА 6. Изменение концентрации кортикостерона з крови крыс при внутрибрюшинном введении пептидов эпифиза в ходе оральной иммунизации овальбумином
6.1 Краткие сведения литературы об участим гормонов перифе
V рических эндокринных желез в регуляции иммунного ответа
организма
6.2 Особенности методики исследования
6.3 Результаты исследования и их обсуждение
ГЛАВА 7. Изучение возможности прямого и опосредованного через а и р адренорецепторы влияния эпифизарных пептидов на секреторную активность изолированных Пейеровых бляшек интактных и орально иммунизированных крыс в условиях i vi
7.1 Литературная справка о роли эндокринных клеток слизистой оболочки тонкой кишки в формировании иммунного ответа
7.2 Особенности методики исследования
7.3 Результаты исследования и их обсуждение
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
Список литературы Благодарности
СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ
иммуноглобулин
i i i секреторный иммуноглобулин АКТГ адренокортикотропный гормон ВЛ Влимфоцит
ВИП вазоактивный интестинальный пептид
ИЛ интерлейкин
ИФН интерферон
КонА конканавапин А
МСГ меланоцит стимулирующий гормон
НА норадреналин
ПЭ пептиды эпифиза
СТГ соматотропный гормон
Тз трийодтиронин
Т4 тироксин
ТТГ тиреотропный гормон
ТФР трансформирующий фактор роста
ФГА фитогемагглютинин
ФНО фактор некроза опухоли
ЦНС центральная нервная система
ЭПП эпифизарный пептидный препарат эпифизан
ВВЕДЕНИЕ


В регуляции иммунных реакций в Пейеровых бляшках тонкой кишки важную роль играют не только освобождающиеся из нервных окончаний медиаторы, но и гормоны, продуцируемые в том числе эндокринными клетками желудочнокишечного тракта. В энтерохромаффинных клетках пищеварительной системы секретируются серотонин и мелатонин, являющиеся гормонами эпифиза. По мнению некоторых исследователей кишка важный источник мелатонина в организме i, i, . Выдвигалось предположение, что синтезирующие мелатонин клетки пищеварительного тракта также способны выделять регулирующие его секрецию пептиды, аналогичные обнаруженным пептидам эпифиза i, . Не исключено, что эти пептиды подобно мелатонину могут вовлекаться в регуляцию местного иммунного ответа в кишке. Для эпифизарных пептидов показаны сходные, а в некоторых случаях и превосходящие мелатонин эффекты. Пептидные препараты эпифиза повышают функциональную активность тимуса, нормализуют ряд нарушений углеводножирового обмена, обладают антиокислительными свойствами Кузник и др. Однако их физиологическая роль в организме в том числе влияние на иммунную систему и взаимоотношения с индоламинами требуют дальнейшего изучения. Изучение механизмов вовлечения гормонов эпифиза пептидной природы в регуляцию иммунных реакций организма, до сих пор остающихся малоисследованными, имеют бесспорную теоретическую ценность для фундаментальной физиологии. В плане разработки предположения о вовлечении пептидов эпифиза в нейроэндокринноиммунные взаимодействия в Пейеровых бляшках тонкой кишки крыс при формировании местного иммунного ответа, несомненный интерес представляет изучение особенностей ответа антителообразующих клеток Пейеровых бляшек орально иммунизированных животных на пептиды эпифиза в условиях i viv и i vi, роли в этих взаимодействиях адренергических влияний, а также системных реакций иммунной системы организма на развитие местного иммунного ответа и введение эпифизарных пептидов. Результаты этих экспериментов имеют огромное теоретическое значение для дальнейшего развития представлений о нейроиммунных взаимодействиях в лимфоидных образованиях тонкой кишки. С учетом изложенного целью данной работы явилось исследование влияния эпифизарных пептидов на формирование иммунного ответа в Пейеровых бляшках при оральной иммунизации крыс овальбумином. Изучение дозозависимости эффектов эпифизарных пептидов на антителопродуцирующую активность Пейеровых бляшек неиммунизированных и орально иммунизированных крыс. ГЛАВА 1. Общие методические приемы, использованные в работе. Исследование проведено на белых крысахсамках линии Вистар массой г, содержавшихся в стандартных условиях вивария при естественном освещении и свободном доступе к воде и пище. Использовали гранулированный корм, выпускаемый для крыс виварием Института физиологии им. И.П. Павлова РАН. Поилки заполняли обычной водопроводной водой. В качестве подстилки использовали древесные опилки. Крысы содержались в стандартных клетках кювета с решетчатой сеткой, не более 5 животных на клетку. Температура в помещении поддерживалась в диапазоне от до С. Методика исследования влияния пептидов эпифиза на формирование гуморального иммунного ответа Пейеровых бляшек на орально предъявляемый антиген. Одна группа крыс п5 была подвергнута оральной иммунизации в течение трех недель в питьевую воду животным добавлялся овальбумин из расчета мгмл, затем в течение 7 дней они получали чистую питьевую воду. Контролем служили 5 интактных неиммунизированных животных контроль1. Вторая группа животных п также была подвергнута оральной иммунизации по указанной схеме. При этом одной половине животных второй группы в течение первых пяти дней иммунизации ежедневно в утренние часы внутрибрюшинно инъецировали эпифизарный пептидный препарат Эпифизан в дозе 5 мг на 0 г массы тела в объеме 0,1 мл растворитель физиологический раствор, а другой половине физиологический раствор в эквивалентном объеме контроль2. Препарат Эпифизан, представляющий собой комплекс пептидов с молекулярной массой кДа, был получен из эпифизов крупного рогатого скота методом кислотной экстракции с последующей очисткой, разработанным в НИИ физиологии им. Ухтомского СПбГУ Коваленко, Попов, .