Пептидергические нейроны супрахиазматического ядра: иннервация и регуляция дифференцировки

• Автор: Мирочник, Виктория Валерьевна
• Шифр специальности: 03.00.13
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2003
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 112 с. : ил

СОДЕРЖАНИЕ
ВВЕДЕНИЕ

ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. Морфологическая организация супрахиазматического ядра у

взрослых млекопитающих.

1.1.1. Локализация и размеры.

1.1.2. Клеточный состав.

1.1.3. Химический состав нейронов.

1.1.4. Половые особенности в организации супрахиазматического ядра

1.2. Нервные связи супрахиазматического ядра

1.2.1. Эфферентные связи.

1.2.1.1. Внутриядерные связи
1.2.1.2. Внутригипоталамические связи.
1.2.1.3. Экстрагиноталамические связи.
1.2.2. Афферентные связи
1.2.2.1. Ретиногипоталамический тракт
1.2.2.2. Геникулогипоталамический тракт.
1.2.2.3. Серотонинергический тракт
1.2.2.4. Иннервация ТГиммунореактивньти волокнами.
1.3. ВИП и ВПсинтезирующие нейроны пейсмекеры циркадной системы супрахиазматического ядра
1.3.1. ВИПсинтезирующие нейроны.
1.3.1.1. Циркадные ритмы синтеза мРИК ВИП.
1.3.1.2. Циркадные ритмы синтеза ВИП
1.3.2. ВПсингезирующие нейроны.
1.3.2.1. Циркадные ритмы синтеза мРНК ВП.
1.3.2.2. Циркадные ритмы синтеза ВП
1.4. Онтогенез супрахиазматического ядра.
1.4.1. Нейроногенез
1.4.2. Дифференцировка специфических нейронов
1.4.2.1. ТГсинтезирующие нейроны
1.4.2.2. ВИПсинтезирующие нейроны.
1.4.2.3. ВПсинтезирующие нейроны
1.4.3. Афферентные нервные связи
1.4.3.1. Ретиногипоталамический тракт
1.4.3.2. Геникулогипоталамический тракт
1.4.3.3. Иннервация ТГиммунореактивными волокнами.
1.4.3.4. Сеютонинергический тракт. Роль серотонина в эмбриогенезе.
ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ.
2.1. Показатели дифференцировки и методы их определения.
2.2. Животные.
2.3. Фармакологическая модель иммитации дефицита серотонина в мозге животных
2.4. Иммуноцитохимическос исследование
2.4.1. Взятие материала, фиксация, приготовление срезов.
2.4.2. Иммуноцитохимия.
2.5. Гибридизация i i.
2.5.1. Взятие материала, приготовление срезов.
2.5.2. Гибридизация i i.
2.5.2.1. Мечение олигонукпеотидных зондов.
2.6. Количественный и иолуколичествепный анализ изображений.
2.6.1. Иммуноцитохшическое исследование.
2.6.2. Гибридизация i i
2.7. Статистическая обработка результатов.
ГЛАВА 3. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ.
3.1. Гибридизация i i мРНК ВП и ВИП
3.2. Иммуноцитохимия.
3.2.1. I7, ВИПиммунореактивные нейроны
3.2.2. Серотониниммунореактивные волокна
3.2.3. ТГиммунореактивные нейроны.
3.2.3.1. Второй день постнатстьного онтогенеза.
3.2.3.2. Десятый день постнатстьного онтогенеза
3.2.3.3. Взрослые крысы
ГЛАВА 4. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ
4.1. Ауторсгуляпия серотонином развития серотонинергической системы
4.2. Влияние серотонина на дифференцировку ВП и ВИПсинтезирующих нейронов СХЯ
4.3. Влияние стресса на отсутствие циркадных ритмов в содержании мРНК ВП
и ВИП вСХЯ.
4.4. Исследование источника транзиторной иннервации СХЯ ТГиммунореактив
ными волокнами в ностнатальном онтогенезе
ВЫВОДЫ.
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ


СХЯ эмбрионов крыс, впервые выявляемом на й эмбриональный день Э и не зависящим от влияния СХЯ матери , , . Подтверждают это и опыты но перекрестной трансплантации СХЯ на хомячках, являющихся гомозиготными и гетерозиготными мутантами в автосомном локусс , . Эти животные характеризуются укорочением периода циркадного ритма локомоторной активности с до часов у гетерозиготных и до часов у гомозиготных. При этом у животных, у которых нарушение ритма вызывалось разрушением СХЯ, в случае приживления СХЯтрансплантата, циркадные ритмы восстанавливались в зависимости от генотипа донорского СХЯ , . Решающую роль в функционировании СХЯ как пейсмекера циркадных ритмов играет функционирование нейронов, генерирующих эти ритмы и синтезирующих вазопрсссин ВП и вазоактивный интестинальный пептид ВИП i . . В свою очередь, эти нейроны иннервированы нервными волокнами, поступающими в СХЯ в составе трех трактов ретиногипоталамического РГТ, геникулогипоталамического ГГТ, а также серотонинергического из ядер шва среднего мозга. Эти афферентные входы модулируют активность нейроновпсйсмекеров, в результате чего изменяется уровень синтеза мРНК нейропептидов и самих пептидов, а также скорость их выделения. Нейроны СХЯ образуются в течение нескольких дней эмбриогенеза, у крыс с ЭН с максимумом на Э , , . Вскоре после образования нейронов, в конце внутриутробного развития, начинают проявляться их фенотипические особенности экспрессии специфических синтезов. Впервые у крыс мРНК ВИП в СХЯ выявляется на Э v . . РНК ВП на Э , , . Первые ВИПиммунореактивные нейроны обнаруживаются на Э , или Э , , в то время как ВПиммунореактивные на 2й постнатальный день М2 Vi . , . РНК ВИГ1 появляются в раннем постнатальном периоде на П45 I, , . В пренатальном онтогенезе формируется афферентная иннервация СХЯ нервными волокнами всех трактов I, I и серотонинергического, характерных для взрослых животных. Гак, серотонинергические волокона прорастают в СХЯ, начиная с Э v . v, , РГТ с П1 и I с П4 , , . Следует отметить, что в эмбриогенезе серотонин, вероятно, поступает в СХЯ не только по нервным волокнам, но и диффундирует из общей системы циркуляции ii . . v . В пренатальном периоде, в отсутствии установившейся афферентной иннервации, серотонин проявляет свое воздействие как гуморальный диффузный фактор по отношению к нейронаммишеням. Так, серотонин ингибирует пролиферацию клетокпредшествснников популяций нейронов, которые в дальнейшем синаптически иннервируются серотонинергическими волокнами , , , , . Кроме того, обнаружено ингибиторное влияние серотонина на экспрессию мРНК ВИП в СХЯ также исключительно в пренатальном периоде v . Однако до сих пор остается не выясненным, является ли действие серотонина на дифференцирующиеся нейроны морфогенетическим имиринтинговым, прО Наряду с афферентными входами о СХЯ, существующими у взрослых животных, у молодых животных обнаружена мощная транзиторная иннервация СХЯ тирозингидроксилазнымн ТГволокнамн, происхождение, природа и функциональное значение которых остается не ясными . Целью настоящего исследования было изучение долгосрочного морфогенетического влияния серотонина на дифференцировку ВП и ВИПсодержащих иеГфоновмишеней СХЯ крыс. Кроме того, предстояло идентифицировать источник транзиторной иннервации СХЯ крыс ТГсодержащими волокнами в раннем постнатальном онтогенезе. Провести количественный иммуноцитохимический анализ распределения ТГиммунореактивных нейронов у крыс в постнатальном периоде в отделах мозга, являющихся кандидатами на участие в этой иннервации. В данной работе впервые использована фармакологическая модель дефицита серотонина, позволяющая оценить морфогенетическое необратимое воздействие серотонина на дифференцировку ВП и ВИПсодержащих нейронов СХЯ в онтогенезе.