Половые особенности митохондриального метаболизма в условиях покоя и острого стресса

• Автор: Леонтьев, Данила Сергеевич
• Шифр специальности: 03.00.13
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2005
• Место защиты: Саратов
• Количество страниц: 129 с. : ил.

СОДЕРЖАНИЕ

Список сокращений

Введение

Глава I Обзор литературы

1.1 Особенности адаптационной реакции у самок и самцов

1.2 Роль митохондрий в поддержании активной работы и обеспечении стрессрезистентности организма

1.2.1 Строение и функции митохондрий

1.2.2 Проявление стресса на уровне митохондрий

Глава II Материалы и методы исследований

2.1 Объекты исследований

2.2 Методы исследований

2.2.1 Получение митохондриального препарата
2.2.2 Методика выделения митохондрий
2.2.3 Измерение поглощения кислорода митохондриями печени
2.2.4 Определение параметров дыхания митохондрий
2.2.5 Измерение активности митохондриальной АТФазы
2.2.6 Определение активности сукцинатдегидрогеназы
2.2.7 Определение активности цитратсинтазы
Глава III Результаты исследований
3.1 Влияние введения адреналина и серотонина на митохондриальное окисление сукцината и акетоглутарата
3.2 Влияние ЭГТА в среде выделения на выявление эффекта адреналина
ф 3.3 Особенности фосфорилирующего дыхания митохондрий самок и
самцов в условиях покоя и острого стресса
3.4 Особенности разобщенного дыхания митохондрий самок и
самцов в условиях покоя и острого стресса
3.4.1 Параметры дыхания митохондрий самок и самцов при разобщенном окислении сукцината в условиях покоя и острого стресса
3.4.2 Параметры дыхания митохондрий самок и самцов при разобщенном окислении акетоглутарата в условиях покоя и острого стресса
3.5 Активность сукцинатдегидрогеназы и цитратсинтазы у самок и самцов в условиях покоя и острого стресса
3.6 Активность митохондриальной АТФазы у самок и самцов в условиях покоя и острого стресса
3.7 Влияние кастрации самок и самцов на основные показатели митохондриального дыхания в условиях покоя и острого стресса
3.7.1 Особенности фосфорилирующсго дыхания митохондрий кастрированных самок и самцов в условиях покоя и острого стресса
3.7.2 Особенности разобщенного дыхания митохондрий кастрированных самок и самцов в условиях покоя и острого стресса
Глава IV Обсуждение результатов исследования Выводы
Список литературы


Исследовать половые особенности фосфорилирующего и разобщенного дыхания митохондрий в условиях покоя и острого стресса. Изучить половые особенности в активности сукцинатдегидрогеназы, цитратсинтазы и АТФазы митохондрий в условиях покоя и острого стресса. Выявить влияние кастрации на особенности фосфорилирующего и разобщенного дыхания митохондрий самок и самцов в условиях покоя и острого стресса. Нами был модифицирован метод получения митохондриального препарата, что позволило впервые применить для представленных исследований гомогенаты тканей без использования ЭГТА в качестве хелатора. Получены оригинальные данные о стимулирующем влиянии адреналина и подавляющем действии серотонина на окисление сукцината. Впервые проведен комплексный анализ особенностей митохондриального метаболизма в условиях покоя и острого стресса с учетом полового фактора. Обнаружено, что митохондрии самцов обладают исходно более высоким сопряжением и отзываются на стресс усилением окисления сукцината, в то время как митохондрии самок, находясь в более активном состоянии в покое, не проявляют выраженной реакции на острый стресс. Новыми являются данные о влиянии кастрации на половые особенности фосфорилирующего и разобщенного дыхания митохондрий в условиях покоя и острого стресса. Выявлено, что уровень половых гормонов влияет на сопряженность митохондрий, но различия по параметрам фосфорилирующего дыхания, повидимому, определяются другими факторами. Проведена модификация метода получения митохондриального препарата и показана целесообразность исключения ЭГТЛ из среды выделения с целью наилучшего сохранения физиологического состояния исследуемых митохондрий. Полученные результаты расширяют представления о механизмах реализации стресса на субклеточном уровне. НАДзависимых субстратов не увеличивается или даже снижается. Предотвращение гиперактивации митохондриального аппарата при длительном стрессе может обеспечивается торможением Сукцинатдегидрогеназы серотонином гормоном стресслимитирук1 ней системы. Обнаруженные нами половые особенности метаболизма митохондрий и их стрессреактивности позволяют включить данный фактор в комплекс причин, определяющих различную продолжительность жизни мужских и женских особей. Действие адреналина и серотонина проявляется соответственно в усилении и ингибировании окисления сукцината, что может являться отражением работы стрессреализующей и стресслимитируюшей систем на уровне митохондрий. Митохондрии самцов, обладая исходно более высоким сопряжением и низким дыханием, отзываются на стресс усилением окисления сукцината, в то время как митохондрии самок, находясь в более активном состоянии в покое, не проявляют выраженной реакции на острый стресс. Половые различия в параметрах разобщенного дыхания митохондрии определены наличием андрогенов в организме самцов. Половые гормоны не играют принципиальной роли в обеспечении половых различий по параметрам фосфорилирующего дыхания митохондрий в покое и в условиях стресса. Всероссийской научной конференции с международным участием, посвящнной 0летию со дня рождения И. П. Павлова СанктПетербург, , Российской конференции Нейроэндокринология СанктПетербург, , 5 i i i i ii, , , Восьмой международной конференции Математика, компьютер, образование Пушино, января4 февраля года, Всероссийской конференции Митохондрии в патологии Пушино, мая года, XI европейском конгрессе по гипертензии ь i i Италия, Милан, г, Научнопрактической конференции с международным участием Современные достижения фундаментальных наук в решении актуальных проблем медицины Астрахань, 6 мая года. Структура и объем диссертации Диссертация изложена на 9 страницах машинописного текста и состоит из введения, обзора литературы, материалов и методов исследования, изложения и обсуждения результатов собственных исследований, выводов и списка литературы, включающего отечественных и иностранных источника. Работа иллюстрирована рисунками и таблицами.