Гистофизиологическое исследование влияния витамина Е и циклоферона на апоптоз клеток гипоталамо-адренокортикальной оси стрессированных мышей в онтогенезе

• Автор: Азизова, Юлия Владимировна
• Шифр специальности: 03.00.13
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2006
• Место защиты: Волгоград
• Количество страниц: 114 с. : 26 ил.

1.1 .Основные концепции старения.

1.1.1.Иммунологическая теория.

1.1.2.Молекулярногенетические гипотезы

1.1.2.1 .Теория ошибок.

1.1.2.2.Адаптационнорегуляторная теория.

1.1.2.3. Теория соматических мутаций.

1.1.2.4.Предел Хейфлика, теломергл и теломераза

1.1.3.Роль апоптоза в возрастных изменениях

1.1.4.Свободнорадикальная теория старения

1.1.4.1 .Система антиоксидантной защиты

1.1.5.Элевационная теория старения.

1.2. Гипоталамус центральное регуляторное звено старения.
1.2.1 .Морфофункциональная характеристика гипоталамуса СОЯ, ПВЯ.
1.2.3.Морфофункциональные изменения гипоталамуса и
свободнорадикальных процессов, и иммунной системы при действии стресса
1.3.Современные представления об апоптозе, его основных факторах и механизмах развития апоптоза.
1.3.1.Основные участники апоптоза семейство Вс Вс, Мс, Вах.
1.3.2. Участие витамина Е в регуляции апоптоза.
1.4. Циклоферон как индуктор интерферона альфа. Основные механизмы
его действия иммунокорригирующее, противотивовирусное.
1.4.1. Роль интсрферонаальфа и циклоферона в регуляции апоптоза
ГЛАВА II. Материал и методы исследований
2.1. Характеристика экспериментального материала
2.2. Определение уровня свободнорадикального окисления липидов в плазме крови.
2.3. Иммуногистохимическая ИГХ реакция с антителами к Вс в НСК гипоталамуса, коры надпочечников
2.4. Определение интенсивности флюоресценции Вс Мс , и Вах ИР
материала НСЦ гипоталамуса
2.5. Определение количества апоптозных клеток НСЦ гипоталамуса, пучковой зоны коры надпочечников.
2.6. Определение морфо.метрических показателей функционального состояния клеток пучковой зоны коры надпочечников.
ГЛАВА III.Результаты исследований.
3.1. Изменение массы тела и относительной массы надпочечников у молодых и старых мышей
3.2. Изменение концентрации МДА в плазме крови при иммобилизационным стрессе.
3.3. Морфометрическис показатели ядер клеток пучковой зоны коры надпочечников в условиях иммобилизационного стресса и введения альфа токоферола и циклоферона
3.4. Изменение оптической плотности Вс иммунореактивного ИР вещества клеток СОЯ и ПВЯ гипоталамуса
3.5. Изменение оптической плотности Вс ИР вещества клеток пучковой зоны коры надпочечников.
3.6. Изменение уровня апоптоза клеток СОЯ и ПВЯ гипоталамуса
3.7. Изменение уровня апонтоза клеток пучковой зоны коры надпочечников.
3.8. Изменение интенсивности флюоресценции Мс ИР вещества СОЯ
3.9. Изменение интенсивности флюоресценции Вах ИР вещества в СОЯ
ГЛАВА 1У.Обсуждение результатов исследований
ВЫВОДЫ.
ЛИТЕРАТУРА


Обнаружено, что а токоферол оказывает возрастзависимое ингибирующее действие на апоптоз нейросекреторных клеток старых животных, и на фоне воздействия стресса, изменяя при этом экспрессию белков семейства Вс. Впервые выявлено протекторное действие циклоферона на апоптоз нейросекреторных клеток и экспрессию белковмаркеров апоптоза семейства Вс у молодых и старых животных, и на фоне стресса у старых животных. Уровень апоптоза нейросекреторных клеток гипоталамо адренокортикалыюй оси с возрастом увеличивается. При этом в ИСК гипоталамуса прослеживается корреляция между уровнем апоптоза и белковмаркеров апоптоза Вс, МсЫ, Вах у молодых и старых животных. При стрессе, воздействии а токоферола, циклоферона и в сочетании со стрессогенным фактором корреляция между уровнем апоптоза и уровнем оптической плотности Вс иммунорсактивного вещества не выявлена, но прослеживается отчетливая корреляция между уровнем апоптоза и другими представителями семейства белков Вс Мс, Вах у мышей разного возраста. Циклофсрон оказывает антиапоптозное действие на нейросекреторные клетки гипоталамуса и пучковую зону коры надпочечников на разных этапах онтогенеза. Стресс проявляет аитиапоптозный эффект только на позднем этапе онтогенеза. Научнопрактическая значимость. Результатом исследования определяет возможность разработки некоторых новых подходов к решению актуальных проблем геронтологии, в частности, возможность предупреждать индукцию апоптоза при интенсификации свободнорадикальных процессов. ГЛАВА I Обзор литературы. Основные концепции старения. Проблемам старения посвящены многочисленные работы, определившие появление ряда теорий старения Метальников С. И., Суриков М. П., Дильман В. М., , но ни одна из них пока не в состояние раскрыть механизм этого значимого этапа онтогенеза. Рассмотрим некоторые из них. Привлекает внимание теория старения Берпета М. Т звена, которые, в свою очередь, во многом определяется функциональным состоянием тимуса, представленного в качестве генетически запрограммированных биологических часов. Отмечено, что с возрастом соотношение различных субпопуляций не изменяется, хотя выявлены функциональные нарушения Т лимфоцитов . Дальнейшие исследования, показали, что нейроэндокринно иммунные взаимодействия, осуществляются через пшоталамогипофизарную систему , i Е. М. . По мнению В. Н. Анисимова Анисимов В. Н. и др. Возрастные изменения иммунной системы, могут быть связаны с увеличением уровня апоптоза макрофагов, спленоцитов и тимоцитов. В настоящее время известно, что элиминация тимоцитов с возрастом, происходит путем апоптоза i . Это связано с повышением экспрессии проапоптозного фактора Вах в лимфоцитах и увеличения соотношения проапоптозного фактора Вах к антиапоптозпому x . Но, несмотря на многочисленные исследования, стало очевидным, что происходящее с возрастом истощение иммунных процессов, недостаточно, чтобы объяснить все проявления старения i . V, . Молскулярио генетические гипотезы. Наибольшее внимание привлекают молекулярногенетические гипотезы, объясняющие процесс старения первичными изменениями генетического аппарата клетки. Большую их часть можно подразделить на два основных варианта. В первом случае, возрастные изменения генетического аппарата клеток рассматриваются как наследственно запрограммированные i . Фролькис В. В., , во втором как случайные , iiv V . Таким образом, старение может являться либо запрограммированным закономерным процессом, логическим следствием роста и созревания, либо результатом накопления случайных ошибок в системе хранения и передачи генетической информации. Теория ошибок. I. Е. Оргель в году , предложил гипотезу о катастрофе ошибок. Она основывается на предположении, что основной причиной старения является накопление с возрастом генетических повреждений в результате мутаций, которые могут быть как случайными спонтанными, так и вызванными различными повреждающими факторами ионизирующая радиация, стрессы, ультрафиолетовые лучи, вирусы, накопление в организме побочных продуктов химических реакций и другие.