Особенности кортикостероидной функции надпочечников у мышей с мутацией Agouti Yellow

• Автор: Шевченко, Антонина Юрьевна
• Шифр специальности: 03.00.13
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2008
• Место защиты: Новосибирск
• Количество страниц: 114 с. : ил.

СОДЕРЖАНИЕ

СПИСОК ИСПОЛЬЗУЕМЫХ СОКРАЩЕНИЙ

ВВЕДЕНИЕ

Глава 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. Меланокортиновая система

1.1.1. Меланокортиновые рецепторы

1.1.2. Меланокортиновые пептиды

1.1.3. Белки семейства Агути

1.1.4. и 3

1.2. Кортикостероидная функция надпочечника

1.2.1. Краткая характеристика гипоталамогипофизарнонадпочечниковой системы

1.2.2. Раннее постнатальное становление кортикостероидной функции надпочечника
1.2.3. Основные этапы биосинтеза кортикостерона
1.2.4. Основные этапы метаболизма кортикостерона
1.3. Регуляция кортикостероидной функции надпочечника
1.3.1. Эндокринная регуляция кортикостероидной функции надпочечника
1.3.2. Паракринная регуляция кортикостероидной функции надпочечника
1.3.3. Аутокриннаяпаракринная регуляция кортикостероидной функции надпочечника белками семейства Агути
1.4. Краткая характеристика мышей, несущих мутацию i Глава 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
2.1. Экспериментальные животные
2.2. Серии экспериментов
2.3. Экспериментальные воздействия
2.3.1. Рестрикционный стресс
2.3.2. Взятие крови
2.4. Оценка кортикостероидной функции надпочечников в условиях i vi
2.4.1. Приготовление суспензии изолированных клеток надпочечников
2.4.2. Инкубация изолированных клеток надпочечников
2.4.3. Приготовление проб для определения внутриклеточного уровня цАМФ
2.5. Биохимические методы
2.5.1. Определение уровня цАМФ в клетках надпочечников
2.5.2. Определение концентрации кортикостерона в плазме крови и инкубатах клеток надпочечников
2.5.3. Определение концентрации лептина в плазме крови
2.6. Статистическая обработка результатов Глава 3. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
3.1. Влияние мутации i на вес тела мышей в онтогенезе
3.2. Влияние мутации i на постнатальное становление кортикостероидной функции надпочечников мышей
3.2.1. Влияние мутации i на уровень кортикостерона в крови в состоянии покоя
3.2.2. Влияние мутации i на продукцию кортикостерона клетками надпочечников
3.3. Влияние мутации i на уровень кортикостерона в крови в покое и при стрессе у 3 и недельных мышей
3.4. Влияние мутации i на активность ферментов стероидогенеза в клетках надпочечников 3 и недельных мышей
3.4.1. Влияние мутации i на уровень цАМФ в клетках надпочечников 3и недельных мышей при стимуляции АКТГ и форсколином
3.4.1.1. Уровень цАМФ в клетках надпочечников 3и недельных желтых и черных мышей при стимуляции экзогенным АКТГ
3.4.1.2. Уровень цАМФ в клетках надпочечников 3 и недельных желтых и черных мышей при стимуляции форсколином
3.4.2. Влияние мутации i на продукцию кортико
стерона клетками надпочечников 3и недельных мышей при стимуляции экзогенным цАМФ
3.4.3. Влияние мутации i на продукцию кортикостерона клетками надпочечников 3и недельных мышей при стимуляции прогестероном
3.5. Влияние развития ожирения, вызванного мутацией i , на кортикостероидную функцию надпочечников у недельных мышей
3.5.1. Уровень кортикостерона в крови в покое и при стрессе
у недельных черных, желтых ожиревших и желтых неожиревших мышей
3.5.2. Продукция кортикостерона клетками надпочечников недельных черных, желтых ожиревших и желтых неожиревших мышей при стимуляции АКТГ i vi
Глава 4. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ
ВЫВОДЫ
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ


Известно, что лептин, инсулин и жирные кислоты принимают участие в регуляции уровня кортикостерона в крови i . Нарушение проведения сигнала от этих метаболических факторов может вызывать изменение активности ГГНС. Действительно, многие виды ожирения, как генетически детерминированные, так и вызванные диетой, сопряжены с гиперкортицизмом i . Возможно, повышенный стрессорный уровень кортикостерона в крови у взрослых мышей с мутацией Ау обусловлен развитием у них ожирения. ГГНС v . У мышей, несущих доминантную мутацию Ау, Агути белок экспрессируется во всех тканях уже на ранних стадиях эмбрионального развития . Это также может являться причиной повышенного стрессорного уровня кортикостерона в крови у взрослых мышей с мутацией Ау . Каркаева и др. В раннем постнатальном онтогенезе можно выделить два важных для становления кортикостероидной функции надпочечников периода период низкой активности, приходящийся на первые две недели жизни, и следующий за ним период повышенной активности системы, приходящийся на третью неделю жизни i . V, i . Показано, что стресс и различные экспериментальные воздействия в первый месяц жизни приводят к значительным изменениям активности ГГНС взрослых животных Маслова и др. Маслова, Науменко, . В настоящее время не известно оказывает ли мутация Ау влияние на активность кортикостероидной функции надпочечников в раннем постнатальном онтогенезе. Таким образом, изменение стероидогенеза у взрослых мышей с мутацией Ау может быть обусловлено влиянием Агути белка как непосредственно на активность ферментов стероидогенеза, так и опосредовано, через развитие у них ожирения или за счет нарушения постнатального становления кортикостероидной функции надпочечников. Исследовать у мышей влияние мутации i на возрастные изменения уровня кортикостерона в крови в состоянии покоя и возрастные изменения продукции кортикостерона клетками надпочечников при стимуляции АКТГ в условиях i vi. Исследовать у мышей в период повышенной активности системы третья неделя жизни и во взрослом состоянии влияние мутации i на кортикостероидную функцию надпочечников при стрессорной активации в условиях i viv и при цАМФ и субстратзависимой стимуляции в условиях i vi. У взрослых мышей с мутацией i сопоставить активность кортикостероидной функции надпочечников в условиях i viv и i vi со степенью развития у них ожирения. Научная новизна исследования. Впервые показано, что у взрослых мышей, независимо от степени развития ожирения, мутация Ау повышает стрессреактивность гипоталамогипофизарнонадпочечниковой системы за счет усиления кортикостероидного ответа надпочечников на АКТГ, что в свою очередь не связано с повышенной активностью мембранного фермента аденилатциклазы, а обусловлено активацией последующих этапов стероидогенеза. У мышей в норме в раннем постнатальном становлении ГГНС наряду со стрессгипореспонсивным периодом можно выделить стрессгиперреспонсивный период, приходящийся на третью неделю жизни. Этот период характеризуется высоким базальным и стрессорным уровнем кортикостерона в крови, а так же повышенной стрессреактивностью не только по сравнению со стрессгипореспонсивным периодом, но и по сравнению со взрослыми животными, о чем свидетельствуют результаты работы. Впервые установлено, что одной из причин усиленного ответа 3недельных мышей на стресс является повышенная у них относительно взрослых животных чувствительность клеток надпочечников к АКТГ и активность ферментов стероидогенеза. Впервые показано, что у мышей с мутацией Ау изменена активность гипоталамогипофизарнонадпочечниковой системы во время стрессгиперреспонсивного периода. Это позволяет предположить, что действие мутации Ау на ранних этапах развития приводит к нарушению становления кортикостероидной функции надпочечников, что может являться одной из причин повышенного стероидогенного ответа на АКТГ у взрослых мышей, несущих эту мутацию. Теоретическая значимость работы. Работа направлена на развитие современных представлений о механизмах действия Агутиподобного белка и его физиологической роли в паракриннойаутокринной регуляции кортикостероидной функции надпочечников.