Каннабиноидная регуляция в центральной нервной системе виноградной улитки

• Автор: Лемак, Мария Степановна
• Шифр специальности: 03.00.13
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2009
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 111 с. : ил.

Введение.

Глава I. Обзор литературы

1. Эидоканиабиноидная регуляция в ЦНС млекопитающих

1.1 Эидоканнабиноидные рецепторы, структура и распределение в ЦНС.

1.2 Эффекты анандамида, не связанные с СВрецепторами

1.3 Принципы действия эндоканнабиноидной системы в ЦЫС позвоночных животных

2. Эндоканнабиноиды у беспозвоночных

ГЛАВА Н. Методы, использованные в работе

Метод радиол и гандного исследования связывания с полным

насыщением

Иммунохимическое окрашивание ЦНС улитки.

Вестернблот гибридизационный анализ
Электрофизиологические эксперименты.
Глава Ш. Результаты и предварительное обсуждение
Раздел 1. Каннабиноидные рецепторы в центральной нервной системе виноградной улитки
1.1 Определение специфичности и параметров связывания синтетического агониста каннабиноидных рецепторов в ЦНС улитки
1.2 Локализация каннабиноидных рецепторов в центральной нервной системе виноградной улитки
1.3 Проверка специфичности иммуногистохимического
окрашивания с помощью вестернблот анализа.
Раздел 2. Функциональная роль каннабиноидных рецепторов в ЦНС улитки
2.1 Влияние анандамида, синтетического агониста каннабиноидных рецепторов, на эффективность синаптической передачи
2.2 Влияние анандамида на долговременную фасилитацию глутаматергических входов.
2.3 Действие селективного блокатора каннабиноидных рецепторов АМ1 на эффективность синаптической передачи
Раздел 3 Участие эндогенных каннабиноидов в кратковременной пластичности синаптической передачи.
3.1 Вызванное деполяризацией подавление возбуждения
3.2 Синаптически вызванное подавление возбуждения
3.3 Сезонная выраженность синаптически вызванного подавления возбуждения в моносинаптических связях механосенсориых и гигантских плевральных нейронов
3.4 Зависимость выраженности синаптически вызванного подавления возбуждения в моносинаптических связях механосенсориых и гигантских плевральных нейронов от уровня серотонина.
Глава IV. Обсуждение результатов
1. Каннабиноидные рецепторы в центральной нервной системе
виноградном улитки.
2. Каннабнноидная регуляция эффективности синаптической передачи.
2.1 Влияние анандамида
2.2 Влияние антагониста каннабиноидных рецепторов АМ1.
2.3 Роль каннабиноидов в долговременной пластичности связей нейронной сети оборонительного поведения.
2.4 Кратковременная пластичность связей в нейронной сети оборонительного поведения
2.5 Зависимость кратковременной каннабиноидзависимой депрессии синаптической передачи от уровня серотонина
Выводы.
Список литературы


Древность происхождения и распространение среди широкого числа таксонов может свидетельствовать о фундаментальной важности и универсальности данного механизма передачи сигнала в нервной системе. Таким образом, необходимо исследовать составляющие эндоканнабиноидной системы и их структурные и функциональные особенности у различных видов немлекопитающих позвоночных н беспозвоночных животных. Современные генетические исследования показали, что рецепторы, гомологичные каннабиноидным рецепторам СВрецепторам млекопитающих, найдены у всех классов немлекопитающих позвоночных и имеют высокую степень сходства с человеческим СВ 1рецептором i v, . Среди беспозвоночных животных элементы эндоканнабиноидной системы описаны у кишечнополостных, иглокожих, двустворчатых моллюсков, плоских и кольчатых червей, но отсутствуют у насекомых и круглых червей . Несмотря на то, что у беспозвоночных найдены эндоканнабиноидные лиганды, ферменты гидролиза каннабиноидов и, в ряде случаев, СВ 1подобные рецепторы, а также показано влияние экзогенных каннабиноидов на пищевое поведение гидры и оборонительное поведение планарий, очень мало известно о нейрофизиологических механизмах действия каннабиноидной системы у беспозвоночных животных. Одним из ярких примеров подобного использования является анализ нейронной сети, обеспечивающей рефлекс отдергивания жабры у морского моллюска аплизии , . Аналогом отдергивания жабры у аплизии является оборонительная реакция улитки ix втягивание головы и щупалец в раковину в ответ на болевой стимул. Сенситизация этого рефлекса коррелирует с длительной фасилитацией входов от кожного нерва на командные нейроны оборонительного поведения гигантские идентифицированные нейроны париетальных и плевральных ганглиев, спайковые разряды в которых способны вызвать генерализованную оборонительную реакцию улитки Максимова Балабан, v, Захаров, . Кроме того, в оборонительной нервной сети улитки идентифицированы механосенсорные нейроны. Таким образом, улитка ix является очень удобным объектом для исследования роли каннабиноидной системы в регуляции синаптической передачи у беспозвоночных животных. Целью нашей работы являлось подтверждение существования эндогенной каннабиноидной системы в ЦНС брюхоногих моллюсков и сс структурнофункциональное описание. Впервые описано наличие СВ 1подобных рецепторов в нервной системе брюхоногих моллюсков, показано участие эндогенных каннабиноидов в регуляции кратковременной и долговременной пластичности синаптической передачи в нейронной сети оборонительного поведения улитки ix . Показано, что сезонная активность серотонинергической системы является модулирующим фактором при выработке . В центральной нервной системе наземной улитки ix содержатся белки, гомологичные каннабиноидным рецепторам первого типа млекопитающих. Эндоканнабиноиды участвуют в регуляции пластичности связей в нейронной сети оборонительного поведения, снижая эффективность возбуждающей синаптической передачи. Работа каннабиноидной системы подвержена сезонным изменениям и зависит от активности серотонинергической системы. Глава I. Марихуана и другие вещества, получаемые из конопли i iv, в течение тысячелетий использовались человеком в качестве лекарственных и психотропных средств. Психотропные эффекты марихуаны включают в себя эйфорию, повышение аппетита, седацию, изменения восприятия, а также ухудшение памяти и двигательного контроля i, . В году был описан дельта9тетрагидроканнабинол 9, ТГК, наиболее психоактивное производное конопли i , . В последующие годы было синтезировано определенное количество биологически активных аналогов ТГК, которые получили общее наименование каннабиноиды и использовались в лабораторных экспериментах на животных для изучения психотропных эффектов производных конопли , . Важным шагом в изучении каннабиноидной системы явилось открытие у животных рецепторов, связывающих ТГК так называемых каннабиноидных рецепторов1. На сегодняшний день хорошо известны 2 типа каннабиноидных рецепторов каннабиноидньте рецепторы типа 1 СВ 1рецепторы, идентифицированные в г. СВ2рецепторы, идентифицированные в г. При помощи селективных антагонистов и с использованием мышей, нокаутных по генам СВ1 и СВ2рецепторов .