Мембранная и растворимая формы дисахаридаз тонкой кишки в онтогенезе крыс : (Соотношение, свойства и гормональная регуляция)

• Автор: Гордова, Людмила Анатольевна
• Шифр специальности: 03.00.13, 03.00.04
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2000
• Место защиты: Санкт-Петербург
• Количество страниц: 128 с.

ОГЛАВЛЕНИЕ. 2

ВВЕДЕНИЕ. 4

ГЛАВА 1. Обзор литературы

1.1. Характеристика основных типов пищеварения.

1.2. Дисахаридазы тонкой кишки млекопитающих.

1.2.1. Дисахаридазы тонкой кишки крысят.

1.2.2. Распределение дисахаридазных активностей вдоль тонкой

кишки млекопитающих

1.3. Факторы, регулирующие развитие ферментных систем

1.3.1. Пищевые факторы

1.3.2. Цитокинетические изменения.

1.3.3. Гормональные факторы.
1.4. Влияние гормонов на активность дисахаридаз гонкой кишки.
1.4.1. Влияние глюкокоргикоидов на активность дисахаридаз тонкой
кишки.
1.4.2. Влияние тироксина на активность дисахаридаз тонкой кишки
1.4.3. Совместное действие глюкокоргикоидов и тироксина на
активность дисахаридаз тонкой кишки
1.5. Мембранная и растворимая формы дисахаридаз тонкой кишки.
ГЛАВА 2. Методы исследования.
2.1. Экспериментальные животные.и.
2.2. Введение гормонов.
2.3. Получение гомогенатов слизистой оболочки тонкой кишки крыс
2.4. Получение мембранной и цитозольной фракций слизистой оболочки тонкой кишки крыс методом выделения везикул мембран щеточной
каймы энтероцитов
2.5. Определение активности ферментов тонкой кишки крыс
2.5.1. Определение активности сахаразы
2.5.2. Определение активности мальтазы и лактазы
2.5.3.0пределение активности лактазы в присутствии трибутирина
2.6. Определение содержания белка
2.7. Определение кинетических характеристик мальтазы.
2.8. Обработка результатов экспериментов.
2.9. Степень очистки ферментных препаратов.
ГЛАВА 3. Результаты собственных исследований.
3.1. Активность дисахаридаз тонкой кишки интактных крысят
, , дневного возраста и взрослых крыс
3.1.1. Активность дисахаридаз в гомогенатах слизистой оболочки
тощей и подвздошной кишки крыс.
3.1.2. Активност ь дисахаридаз в мембранной и цитозольной цитозольной фракциях слизистой оболочки тощей и
подвздошной кишки у крыс разного возраста
3.1.3. Заключение.
3.2. Активность дисахаридаз в тощей и подвздошной кишке
дневных крысят после введения гормонов.
3.2.1. Активность дисахаридаз в гомогенатах слизистой оболочки тощей и подвздошной кишки дневных крысят после
введения дексаметазона иили тироксина.
3.2.2. Активность дисахаридаз в мембранной и цитозольной фракциях тощей и подвздошной кишки дневных крысят
после введения дексаметазона иили тироксина .
3.2.3. Заключение.
3.3. Исследование кинетических и регуляторных свойств кишечных
дисахаридаз.
3.3.1. Кинетические характеристики мембранной и растворимой форм мадьтазы тощей и подвздошпой кишки крысят
, , днсвного возраста и взрослых крыс.
3.3.2. Кинетические характеристики мембранной и растворимой форм мальтазы тощей и подвздошной кишки крысят после введения
им дексаметазона иили тироксина.
3.3.3. Влияние трибутирина на активность мембранной и растворимой
форм лактазы.
3.3.4. Заключение.
ОБЩЕЕ ЗАКЛЮЧЕНИЕ.
ВЫВОДЫ.
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ


Установлено, что введение 78 дневным крысятам дексаметазона иили тироксина изменяет соотношение активности мембранной и растворимой форм сахаразы и мальтазы в сторону увеличения доли активности мембранной формы и снижения доли активности растворимой формы, особенно, в подвздошной кишке. Соотношение двух форм ферментов при этом соответствует их распределению в энтероцитах, характерному для взрослых животных. Впервые обнаружено, что тироксин вызывает значительное увеличение активности мембранной формы лактазы в тощей и в подвздошной кишке. Впервые обнаружены различия в кинетических характеристиках Кт и Ушах растворимой и мембранной форм мальтазы. Количественное изменение этих параметров в ответ на гормональные воздействия соответствует их изменениям при взрослении. НАУЧНОПРАКТИЧЕСКОЕ ЗНАЧЕНИЕ. Одновременное использование комплексного подхода возрастная динамика и гормональные воздействия при изучении активности мембранной и растворимой форм дисахаридаз и их свойств в раннем онтогенезе и у взрослых животных, а также соотношения этих форм может иметь важное значение в развитии фундаментальных представлений об ассимиляции пищи, особенно в раннем постнатальном онтогенезе. Наши данные впервые позволят приблизиться к пониманию возможной пугритивной роли растворимой формы дисахаридаз при созревании тонкой кишки, а также проанализировать их адаптивные возможности. Работа также имеет важное значение для анализа молекулярных механизмов формирования спектра кишечных ферментов. Полученные данные могут быть полезными при разработке рационального детского питания в период раннего онтогенеза. АПРОБАЦИЯ РАБОТЫ. Материалы диссертации были доложены на 3й Российской гастроэнтерологической неделе Москва, , 4й Республиканской научнопрактической конференции Современные тенденции развития гастроэнтерологии Ижевск, , Всероссийской научной конференции с международным участием, посвященной 0летию со дня рождения И. П. Павлова Научноисследовательский институт экспериментальной медицины РАМН, СанктПетербург, , Международной конференции Механизмы функционирования висцеральных систем, посвященной 0летию И. П. Павлова Институт физиологии им. И.П. Павлова РАН, СанктПетербург, сентябрь г. ОБЪМ И СТРУКТУРА ДИССЕРТАЦИИ. Диссертация состоит из введения, 3х глав, общего заключения, выводов и списка литературы. Текст диссертации изложен на 7 страницах машинописи и включает таблиц, рисунков. Библиографический указатель содержит 9 источников, в том числе отечественных и 4 зарубежных. ГЛАВА 1. Пищеварение это совокупность процессов, обеспечивающих ферментативное, преимущественно гидролитическое, расщепление полимерных веществ на части, способные резорбироваться в кишечнике Уголев, . Открытие А. М. Уголевым в конце х годов пристеночного, или мембранного, пищеварения существенным образом изменило представление о механизме гидролиза пищи у высших позвоночных животных. Уголев, , , . Полостное пищеварение, особенно развитое у высокоорганизованных животных, обеспечивается ферментами, выделяющимися из клеток пищеварительных желез и действующими за их пределами в полости кишечника Павлов, Уголев, , v, , I, i, , ,, и др. В результате полостного пищеварения осуществляются преимущественно начальные стадии гидролиза биополимеров. При внутриклеточном пищеварении осуществляется гидролиз внутриклеточными ферментами цитозоля или лизосом нерасщепленных или частично расщепленных субстратов, проникающих внутрь клетки Уголев, , , , , Уголев и др. v . , и др. Мембранное пищеварение пространственно занимает промежуточное положение между внеклеточным и внутриклеточным. Структурной основой мембранного пищеварения служит щеточная кайма энтероцитов, представляющая собой множество цитоплазматических выростов апикальной мембраны, называемых микроворсинками Уголев, , , Комиссарчик, Уголев, v, Уголев и др. Лисочкин, Хмельницкий, Елецкий, Цибулевский, vi, Кушак, , i, и др.