Синтез и накопление стевиол-гликозидов в растениях и культурах клеток стевии : Stevia rebaudiana Bertoni

• Автор: Суханова, Марина Александровна
• Шифр специальности: 03.00.12
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2002
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 113 с. : ил

содержание стевиолгликозидов

и других веществ вторичного метаболизма

1.2.2. Свойства стевиолгликозидов и других вторичных метаболитов стевии

1.2.3. Биосинтез стевиолгликозидов

1.2.4. Накопление стевиолгликозидов

в различных органах растения стевии.

1.3. Культуры клеток стевии и синтез клетками i vi стевиолгликозидов

1.4. Характеристика ультраструктуры тсрпсноидсодержащих

клеток растений

Глава 2. Материалы и методы.

2.1. Характеристика используемых в работе линий стевии.

2.2 Условия выращивания растений в теплице.
2.3. Получение и культивирование растений в культуре i vi
2.4. Получение и культивирование каллусных
культур клеток стевии
2.5. Определение плоидности растения . i.
2.6. Исследование структуры тканей и клеток
интактных растений . i
2.7. Определение содержания стевиолгликозидов
в культуре клеток и растениях vi i i.
2.7.1. Экстракция и очистка образцов
2.7.2. Анализ стевиолгликозидов методом ТСХденситометрии.
2.7.3. Анализ СГ методом высокоэффективной жидкостной хроматографии ВЭЖХ
Глава 3 Состав и содержание стевиолгликозидов в растениях vi i i viv и i vi
3.1. Определение плоидности используемых в работе
линий vi i.
3.2. Качественный и количественный состав
стевиол гликозидов в разных линиях vi i i
3.3 Накопление стевиолгликозидов в различных органах растения
3.4. Качественный и количественный состав
стевиолгликозидов в листьях различных линий стевии.
3.4.1. Состав стевиолгликозидов в растениях
при разных условиях выращивания
3.4.2. Зависимость качественного и количественного состава стевиол гликозидов от плоидности
и происхождения линий стевии.
3.4.3. Зависимость качественного и количественного состава стевиол гликозидов в зависимости
от возраста листа.
3.5. Изменения состава стевиолгликозидов
в процессе онтогенеза стевии.
Глава 4. Получение каллусных культур стевии и их
морфофизиологическая и биосинтетическая характеристика
4.1 Получение различных линий каллусных культур стевии и их
предварительная оценка
4.2. Физиологические и цитоморфологические
характеристики каллусных культур стевии
4.2.1 Ростовые характеристики культур клеток в цикле
культивирования.
4.2.2 Цитоморфологическая характеристика каллусных
культур в процессе периодического культивирования.
4.2.3. Биосинтетическая характеристика каллусных культур.
Глава 5. Изучение структу ры и ультраструктуры клеток листа стевии различных линий i viv и i vi
5.1. Исследование поверхности листьев стевии с использованием сканирующей микроскопии
5.2. Структура и ультраструктура клеток листа стевии i viv
5.2.1 .Особенности строения листьев верхнего яруса.
5.2.2.0собеиности строения листьев нижнего яруса.
5.2.3 Особенности структурной организации листовой пластинки пробирочного растения стевии i vi.
5.3. Сопоставление структуры и ультраструктуры клеток
листовой пластинки растения стевии i viv и i vi.
5.4. Особенности ультраструктуры клеток каллусных линий при культивировании на свету и в темноте.
Обсуждение
Список цитируемой литературы


Стоит отметить, что до сих пор электронномикроскопического изучения ультраструктуры листьев и культур клеток стевии не проводили. Таким образом, целью настоящей работы явилось изучение закономерностей синтеза и накопления, тетрациклических дитерпеновых гликозидов в интактных растениях и культурах клеток vi i i при разных режимах культивирования. Изучение синтеза и накопления дитерпеновых гликозидов в разных линиях генотипах растений vi геЬаисапа. Исследование распределения сгевиолгликозидов по ярусам листьев, органам и в онтогенезе интактных растений. Получение культуры клеток Бека геЬаисапа из разных линий интактных растений и изучение их ростовых и биосинтетических характеристик в разных условиях. Изучение ультраструктуры листьев интактных и пробирочных растений, а также каллусных культур клеток Беа геЬаисапа. Глава X. Систематика, морфология, распространение. Стевия vi i i . i, отряду колокольчиковых. Стевия растениеэндемик и в диком виде встречается лишь на северовостоке Парагвая. Ее листья сладкие на вкус и издавна используются местным населением как подсластитель в напитках и лекарствах. Впервые это растение было описано в году парагвайским ученым Моисеем Бертопи. Химик Ребауди был первым, кто изучил ее химические свойства. Стевия представляет собой многолетний кустарник, высотой около 1 метра, с тонкими, опушенными стеблями, довольно сильно ветвящимися в верхней части. Листья парно расположенные, обратноланцстовидные, длина мм, ширина мм. Соцветие стевии корзинка, состоящее из 25 цветков 23 мм в диаметре. Цветок обоеполый, с двойным околоцветником. Чашечка редуцирована до перистых волосков, венчик трубчатый, состоящий из пяти белых сросшихся лепестков. Андроцей состоит из пяти свободных неслипшихся тычинок, гинецей как правило из двух сросшихся плодолистиков. Вахрушева, . Стевия является представителем тропического климата, для ее выращивания необходимы высокие показатели влажности и температуры воздуха. Холодные и сухие регионы не подходят. Стевия короткодневное растение с критической длиной дня для цветения между и ч Vi , i, . Размножение и культивирование растений стевии. Наиболее простым и широко распространенным методом размножения стсвии является зеленое черенкование. В последнее время все более широкое применение в растениеводстве и селекционногенетических исследованиях находят методы размножения i vi Ильенко, . Ферейра и Хандро описали метод микроклонального размножения растений стевии посредством культивирования молодых листьев из интактного растения i, , . К началу х годов на Украине была разработана технология возделывания стевии в открытом фунте. Эта технология включала в себя выращивание рассады зеленое черенкование и рассада из материала, полученного i vi, отработанную схему посадки растений, использование оптимизированного набора удобрений для высокой продуктивности стевии, а также систему мер по защите растений от болезней и вредителей. Также были разработаны основы селекции стевии и технологии переработки урожая листьев Чудновский, Шишко, Антонов, Ксснз и др. Анишин, Зубенко и др. Ильенко, . С начала х годов в Беларуси начаты работы по изучению отдельных аспектов размножения и выращивания стевии Василькевич и др. В частности, был усовершенствован метод микроразмножения. Он заключался в следующем микрочеренки стевии высаживали на агаризованную питательную среду с половинным составом основных компонентов, содержащую витамины тиамин и пиридоксин, мезоинозит и сахарозу. Затем выросшие черенки доращивали на среде такого же состава, где вместо агара использовали перлит в микротеплице. После периода адаптации рассаду стсвии высаживали на постоянное место. В конце вегетационного периода растения достигали высоты 1 метра, а выход сухого листа составил 0 г с одного растения. При таком выращивании стевии содержание стевиозида в сухих листьях составляло 56 Василькевич и др.