Синтез тритерпеновых гликозидов в суспензионной культуре клеток Panax japonicus var.repens при разных условиях выращивания

• Автор: Демидова, Елена Викторовна
• Шифр специальности: 03.00.12
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2007
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 136 с. : ил.

1.1. Систематика, распространение и история изучения .

видов женьшеня.

1.2. Химический состав физиологически активных .

соединений женьшеня и их фармакологическое действие.

1.2.1. Тритерпеновыс гликозиды растений рода .

1.2.2. Тритсрпеновые гликозиды x i .

1.2.3. Другие биологически активные соединения .

женьшеня.

1.2.4. Физиологическая активность биологически .

активных соединений женьшеня

1.2.5. Физиологическая активность биологически .

активных соединений .i
1.2.6. Методы анализа тритерпеновых гликозидов .
женьшеня
1.3. Женьшень i vi
1.3.1. Культура клеток и тканей растений рода
1.3.2. Получение культур клеток и тканей
женьшеня
1.3.3. Другие способы культивирования женьшеня .
i vi
1.3.4. Физиологическая характеристика культур
клеток женьшеня
1.3.5. Оптимизация питательных сред
1.3.6. Использование элиситоров в культуре
клеток и тканей женьшеня
1.3.7. Глубинное выращивание суспензионных .
культур клеток рода Рапах
1.3.8. Режимы выращивания суспензионных
культур клеток рода Рапах
Глава 2. Материалы и методы исследования
2.1 Объект исследования
2.2 Анализ роста культуры клеток
2.3 Методы определения производных параметров роста .
2.4 Химический анализ содержание гинзенозидов в
биомассе культуры клеток женьшеня
Результаты и обсуждение
Глава 3. Влияние начальной плотности на ростовые и
биосинтетические характеристики суспензионной культуры клеток . i vv.
3.1 Ростовые характеристики суспензионной культуры
клеток . i v. при выращивании с разной начальной плотностью.
3.2. Накопление тритерпеновых гликозидов в клетках .
женьшеня ползучего i vi, выращиваемых при разной начальной плотности суспензии
Глава 4. Влияние углеводного состава среды на ростовые и .
биосинтетические характеристики суспензионной культуры клеток . i vx.
4.1. Ростовые характеристики суспензионной культуры
клеток Рi v. при выращивании на средах с разным содержанием сахарозы
4.2 Накопление тритерпенових гликозидов в
суспензионной культуре клеток .i при выращивании в средах с разным содержанием
сахарозы.
Глава 5. Изучение влияния метилжасмоната на ростовые и .
биосинтетические характеристики суспензионной
культуры клеток Р. i v. при выращивании клеток в колбах на качалке.
5.1. Ростовые характеристики суспензионной культуры .
.i v. при добавлении разных доз метилжасмоната.
5.2 Накопление тритерпеновых гликозидов в
суспензионной культуре клеток Рi v.
в колбах на качалке при внесении разных доз метилжасмоната
Глава 6. Исследование влияния фитогормонов на ростовые и
биосинтетические характеристики суспензионной культуры Р i v. .
6.1. Ростовые характеристики суспензионной культуры
Рi v. при выращивании на средах с
разным содержанием ауксинов в колбах на качалке.
6.2. Накопление тритерпеновых гликозидов в
суспензионной культуре клеток Рi v.
на средах с разным содержанием ауксинов при выращивании в колбах на качалке.
6.3. Ростовые характеристики культуры клеток
.i v. при выращивании на средах с
разным содержанием ауксинов в биореакторе.
6.4. Накопление тритсрненовых гликозидов при
выращивании культуры клеток .i v.
на средах с различным содержанием ауксинов в биорсакторе.
6.5. Ростовые характеристики суспензионной культуры .
клеток .i v. на средах с разным содержанием ауксинов в режиме полупротока.
6.6. Накопление тритерпеновых гликозидов в
суспензионной культуре .i v. при выращивании на средах с разным содержанием
ауксинов в режиме полупротока.
Глава 7. Выращивание суспензионной культуры клеток
.i . в режиме проточного культивирования хемостата
7.1. Ростовые характеристики суспензионной культуры .
клеток .i v. при выращивании в
режиме протока хемостата.
7.2. Накопление тритерпеновых гликозидов в
суспензионной культуре клеток .i v.
при выращивании в режиме протока хемостата
Заключение
Выводы
Список литературы


Изучить качественный и количественный состав тритерпеновых гликозидов в суспензионной культуре клеток Рапах i v . Изучить влияние различных режимов культивирования периодический, полупроточный и проточный на ростовые и биосинтетические показатели культуры. Научная новизна. Изучено влияние различных факторов культивирования начальная плотность культуры, состав и количество в среде фитогормонов, сахарозы, метилжасмоната на рост культуры и накопление в клетках гинзенозидов. Впервые осуществлено полупроточное и проточное выращивание культуры клеток x i v. Практическое значение работы. В результате проведенных исследований полученные данные о возможности выращивания данного штамма в биорсакторах, объем которых может быть в дальнейшем доведен до полупромышленных и промышленных величин. Изучена возможность выращивания культуры в режимах, отличных от периодического полупроточном и проточном. Предложены пути повышения биосинтеза тритерпеновых гликозидов в биомассе с помощью v изменений фитогормоналыюго состава питательных сред и добавления элиситора метилжасмоната. Результаты анализа содержания тритерпеновых гликозидов при разных способах выращивания культуры. Работа выполнена в Отделе биологии клетки и биотехнологии Института физиологии растений РАН в лаборатории физиологии культивируемых клеток. ГЛАВА 1. Систематика, распространение и история изучения видов женьшеня. Женьшень является реликтовым растением семейства , произраставшим на земле ещ в третичный период. Лекарственные свойства женьшеня известны, по крайней мере, лет. Первые упоминания о нем встречаются в древнейших сочинениях о лекарственных растениях ШеньНунь и ШеньЛунбэнцао, Российский, . Многочисленные рекомендации по лечению женьшенем различных заболеваний и способов приготовления лекарств на его основе имеется в сборнике Илинь, составленном в Китае Ши БаоЮнем во г. Более подробное описание женьшеня было сделано значительно позже Ли ШиЧженем, знаменитым составителем сводной китайской фармакопеи БэньЦаоганьму. Этот колоссальный для своего времени труд в томах содержал описание лекарственных средств с приведением 6 лекарственных прописей. Женьшеню в этом труде отведено большое и почетное место. Первый источник, познакомивший с женьшенем европейцев, сообщение Семедо Альваро остался по большому счету незамеченным. Несколько более известным женьшень стал после доклада, прочитанного во французской академии наук Борделеном в г. Первое европейское сочинение Описание Датданского район Манголии женьшеня, посвященная мистическому растению, была опубликована в журнале Лондонского королевского общества миссионером Жарту. Постепенно в Европе стало накапливаться все больше данных о лечебном свойстве женьшеня, и в г. Вандермонде, посвященная в основном этому вопросу. В г. Карл Линней впервые дал систематическое описание рода и назвал его x . В этом названии от греческих слов рап исцелять и лекарство отражено представление о всеисцеляющих свойствах женьшеня. После работ Линнея, по крайней мере, еще лет шли споры вокруг систематики рода, пока в г. К.А. Мейер, изучив морфологические особенности различных видов Рапах, не предложил классификацию рода женьшень, принятую большинством исследователей до настоящего времени. Он описал пять видов женьшеня и присвоил истинному женьшеню название Рапах i С. По современной классификации род женьшень занимает следующее положение , i, i, i, i, i, x. Род x представлен двумя североамериканскими видами . Традиционным считается выделение здесь 3х видов . С.А. Меу Северный Китай, Корея, Приморский край России, . Гималаи, Южный Китай и Непал и . С.А. Меу Япония Грушвицкий, . Однако многие авторы выделяют ряд других видов женьшеня, например известен вид . Югозападный Китай, часть Вьетнама, . Известны также другие подвиды этого вида например, . Нага или его варианты . Северного Вьетнама . На v. Все растения рода Рапах многолетние, травянистые размножение в основном семенами и крайне редко вегетативное, а ареал их произрастания ограничен, например, для женьшеня настоящего с. III.