Получение и физиолого-биохимическая характеристика суспензионных культур Serratula coronata и Ajuga reptans

• Автор: Филиппова, Валерия Николаевна
• Шифр специальности: 03.00.12
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2002
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 136 с.

СОДЕРЖАНИЕ

Список сокращений

ВВЕДЕНИЕ

Глава 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. Культуры клеток растений как источник БАВ

1.2. Регуляция синтеза вторичных метаболитов в системе i vi

1.2.1. Физиологическая регуляция синтеза вторичных метаболитов

1.2.2. Генетическая и эпигенетическая регуляция синтеза вторичных метаболитов

1.3. Общая характеристика фитоэкдистероидов

1.4. Предполагаемые биологические функции фитоэкдистероидов

1.5. Биосинтез экдистероидов в растениях и в культурах клеток

Глава 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ
2.1. Объекты исследования
2.2. Получение суспензионных культур и
2.3. Оценка жизнеспособности и роста суспензионных культур
2.4. Оценка митотической активности и подсчет числа хромосом
2.5. Анализ экдистероидов методом аналитической ВЭЖХ
2.6. Статистическая обработка материала
Глава 3. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ
3.1. Длительно культивируемые каллусные культуры и
3.1.1. Физиологическая характеристика каллусных культур
3.1.2. Биохимическая характеристика каллусных культур
3.2. Физиологобиохимическая характеристика суспензионных культур и
3.2.1. Цитофизиологичсская характеристика суспензионной культуры
3.2.2. Морфологическая характеристика суспензионной культуры
3.2.3. Оптимизация условий культивирования суспензионной культуры .
3.2.4. Цитогенетическая характеристика суспензионной культуры
3.2.5. Содержание Е в суспензионных культурах
3.2.6. Цитофизиологичсская характеристика суспензионной культуры
3.2.7. Морфологическая характеристика суспензионной культуры
3.2.8. Оптимизация условий культивирования суспензионной культуры
3.2.9. Цитогенетическая характеристика суспензионной культуры
3.2 Содержание Е в суспензионных культурах .
Глава 4. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ ВЫВОДЫ
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ


Впервые получены суспензионные культуры клеток . Публикации По результатам исследований опубликовано б работ Апробация работы. Уфа, , на расширенном семинаре отдела Биологии клетки и биотехнологии Института физиологии растений РАН Москва, . Структура и объем диссертации. Диссертационная работа состоит из введения, обзора литературы, экспериментальной части, результатов исследования и их обсуждения, выводов, списа литературы и приложения. Работа изложена на 8 страницах, иллюстрирована рисунками и 6 таблицами. Список цитируемой литературы включает 6 наименований. Глава 1. Растительный мир является огромным природным производителем разнообразных классов химических соединений и важнейшим источником получения лекарственных препаратов различной направленности действия. В качестве дополнительного к природному источника сырья при получении продуктов вторичного метаболизма, имеющих широкое применение в медицинской, пищевой и парфюмерной промышленности, могут служить культивируемые клетки. Первой культурой ткани лекарственного растения была ткань корончатых галлов барвинка розового Vi , полученная Уайтом в г. Способность к синтезу вторичных соединений, а именно, алкалоидов, была впервые показана на культуре клеток i Теллом и Готре в г. Однако интерес к культуре тканей, как продуценту биологически активных соединений, проявился только в е годы, после того, как было установлено, что имеется определенное количество культур, которые в условиях i vi накапливают продукты вторичного метаболизма. Возможность синтеза вторичных соединений в системе i vi была покачана в культуре ткани , накапливавшей каучук i, , , в культуре ткани красавки , способной к синтезу тропановых алкалоидов , i, , а также в культурах листового и корневого происхождения v и i i синтезировавших, соответственно, гекогенин и диосгенин i, , . В нашей стране первые культуры растительных клеток ряда лекарственных растений, таких как, Рапах i, i i, Vi , v Р.Г. Бутенко Бутенко, и доказана фармакологическая активность клеточной культуры . Слепян, Воллосович, . Многие культуры в процесс длшелыюго роста снижают или совсем геряюг снособнос Поскольку потенциально культивируемые клетки могут синтезировать биологически активные соединения, многие исследователи пытались направить вторичный метаболизм в условиях i vi по этому руслу Носов, . Часто применяемым подходом к повышению продуктивности является подбор физических и химических условий культивирования, а также условий иммобилизации клеток и обработки элиситорами. Использование экспериментального мутагенеза позволило получить довольно продуктивные штаммы, накапливающие в ряде случаев весьма важные продукты, синтезируемые в исходных растениях в незначительных количествах Каранова и др, , , Воллосович и др Бутенко, . Во многих случаях работы, связанные с повышением синтеза вторичных метаболитов в культурах клеток, привели к успеху, однако они выполняются эмпирически и поэтому длительны и трудоемки Кузовкина и др. Запрометов и др, Ржежабек, Горелова а. , , Журавлева и др. Никонорова и др. Субботина и др. Генетическая трансформация и другие генноинженерные манипуляции позволили создать ряд перспективных культур. В частности, бородатые корни, продуктивность которых оказалась достаточно высокой ivv, , , , , Садыкова и др. Кузовкина, , v , . Дальнейшее совершенствование методов получения генетических трансформантов и накопление результатов об особенностях их поведения и биосинтеза целевых продуктов, несомненно, расширят возможности их применения в биотехнологической промышленности. Высокий уровень гетерогенности и изменчивости культивируемых клеток, особенно геномной изменчивости, также может быть основой для получения новых штаммовпродуцентов Кузовкина и др. Кузовкина и др. Вахтин и др.