Морфогенез эмбриоида in vitro и зародыша in vivo у пшеницы

• Автор: Сельдимирова, Оксана Александровна
• Шифр специальности: 03.00.12
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2002
• Место защиты: Уфа
• Количество страниц: 163 с. : ил

СОДЕРЖАНИЕ
Введение
1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ. СХОДСТВО И РАЗЛИЧИЕ МОРФОГЕНЕЗА МИКРОСПОРИДЛЬНОГО ЭМБРИОИДА I VI И ЗИГОТИЧЕСКОГО ЗАРОДЫША I VIV ЗЛАКОВ

1.1. Морфогенез микроспориального эмбриоида злаков i vi

1.1.1. Общая характеристика эмбриоида i vi.

1.1.2. Стресс как фактор индукции микроспориального эмбриоидогенеза i vi

1.1.3. Гормональная регуляция пути микроспориального эмбриоидогенеза i vi злаков.

1.1.4. Цитогистологические особенности микроспориального эм

бриоидогенеза i vi злаков

1.2. Морфогенез зиготического зародыша i viv злаков

1.2.1. Общая характеристика зародыша i viv.

1.2.2. Морфогенез i viv зиготического зародыша злаков
1.3. Сходство и различие эмбриоидогенеза i vi и зиготическогоэмбриогенеза i viv.
2. ОБЪЕКТ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
2.1. Объект исследования.
2.2. Методы исследования.
2.2.1 Метод культуры i vi изолированных пыльников яровой мягкой пшеницы.
2.2.1.1. Фенотипический отбор донорного растения i viv.
2.2.1.2. Предварительная холодовая обработка i i колосьев донорных растений яровой мягкой пшеницы
2.2.1.3. Условия культивирования i vi изолированных пыльников
2.2.1.3.1.1 риготовление питательных сред.
2.2.1.3.2. Стерилизация объектов и инструментов
2.2.1.3.3. Инокуляция пыльников на питательные среды.
2.2.1.3.4. Получение эмбриоидов
2.2.1.3.5. Получение растенийрегенерантов.
2.2.2. Цитологические методы исследования
2.2.2.1. Фиксация и обработка растительного материала для свето вой микроскопии.
2.2.2.2. Фиксация и обработка растительного материала для сканирующей электронной микроскопии.
2.2.2.3. Фиксация и обработка растительного материала для просвечивающей электронной микроскопии.
2.2.3.рижизненное исследование растительного материала.
3. РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ. СХОДСТВО И РАЗЛИЧИЕ МОРФОГЕНЕЗА МИКРОСПОРИАЛЬНОГО ЭМБРИОИДА
I VI И ЗИГОТИЧЕСКОГО ЗАРОДЫША I VIV ШЕНИЦЫ ЛИНИИ ФОТОС
3.1. Морфогенез микроспориального эмбриоида i vi
3.1.1 .Получение микроспориального эмбриоида i vi.
3.1.1.1 .Силыювакуолизированная микроспора инициальная клетка микроспориального эмбриоидогенеза i vi.
3.1.1.1.1. Развитие спорогенных клеток пыльника i viv.
3.1.1.1.2. Силыювакуолизированная микроспора критическая фаза развития спорогенной клетки пыльника i viv.
3.1.1.2. Воздействие i i низкой положительной температурой стрессовый фактор индукции микроспориального эмбриоидогенеза
i vi пшеницы
3.1.1.2.1. Температура воздействия i i, оптимальная для индукции микроспориального эмбриоидогенеза i vi.
3.1.1.2.2. Оптимальная длительность воздействия i i температурой С на изолированные колосья
3.1.1.3. Влияние концентрации 2,4Д на индукцию микроспориального эмбриоидогенеза i vi.
3.1.2. Морфогенез микроспориального эмбриоида i vi.
3.1.3. Прорастание микроспориального эмбриоида i vi.
3.2. Морфогенез зиготического зародыша i viv
3.2.1. Зиготический эмбриогенез i viv.
3.2.2. Прорастание зиготического зародыша i viv.
3.3. Сходство и различие морфогенеза микроспориального эмбриоида i vi и зиготического зародыша i viv.
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
ВЫВОДЫ
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ


Микроспориальный эмбриоидогенез i vi сложный процесс, зависящий от целого комплекса разнообразных факторов, сочетание которых определяет образование как эмбриоидов, так и растенийрегенерантов. Одна из принципиальных проблем индукция этого процесса. В результате многочисленных исследований на примере представителей различных семейств растений выявлено, что именно стрессовое воздействие на пыльники i i, перед их инокуляцией на питательную среду i vi, способствует индукции микроспориального эмбриоидогснеза, иначе говоря, переключению гаметофитной подпрограммы развития микроспор пыльника на спорофитную. В литературе сообщается о различных стрессовых способах индукции эмбриоидогснеза в условиях i i у злаков и представителей других семейств при этом воздействие испытывают либо донорные растения в целом, либо изолированные соцветия, цветки, пыльники или спорогенные клетки тепловой или осмотический шок, предобработка пыльников ультрафиолетовыми лучами, импульсным светом и гелийнеоновым лазером, гаммалучами, гаметоцидами, колхицином, верапамилом и кальмодулином, ионофором А7, фиколлом, гормоном стресса абсцизовой кислотой. Петри или одной пробирке. Показано влияние на индукцию эмбриоидогенеза ряда кондиционирующих факторов, например, экстрактов из пыльников, микроспор или пыльцевых зерен. Обзор этой проблемы приведен в работах . II. Кругловой , Н. Н.Кругловой, Т. Б.Батыгиной 6, Н. Н.Кругловой, В. Ю.Горбуновой . По мнению Т. Б.Батыгиной личное сообщение, вычленение пыльников из цветков донорных растений и инокуляцию их на питательную среду также следует расценивать как стрессовые факторы воздейс твия, а значит, и факторы индукции микроспориального эмбриоидогенеза i vi. Обсуждая проблему реакции растений на воздействие внешних факторов, Н. Ф.Батыгин отмечает, что характер реакции организма на один и тот же фактор будет определяться его генотипической и онтогенетической спецификой. В нашем случае, повидимому, проявляется обратная закономерность одна и та же реакция спорогенных клеток в критической фазе развития индукция микроспориального эмбриоидогенеза i vi проявляется в ответ на воздействие различных внешних стрессовых факторов. Абсолютное большинство исследователей сообщают о предобработке изолированных соцветий донорных растений i i низкой положительной температурой 3. С как одном из принципиально важных методических моментов культивирования изолированных пыльников как злаков, так и представителей других семейств. Более того, низкотемпературная предобработка соцветий составляет важнейшую часть разрабатываемых технологий массового получения растенийрегенерантов злаков андроклинного происхождения Суханов, , , Давоян с соавт. Молканова с соавт. Рахимбаев с соавт. Горбунова, i . Хогылева с соавт. Особенно большое значение придается продолжительности холодового воздействия на изолированные соцветия i i, поскольку превышение некоего времени такого воздействия ведет к появлению альбиносных регенерантов, нежелательных в селекционногенетической практике Горбунова, Круглова, . Као . Горбунова, Голованова, , ii . I, i, I . Галиева, Орлов, . Какие морфологические, физиологобиохимические, структурные или иные изменения связаны с переключением гаметофитной подпрограммы развития микроспоры в условиях i i Какие качественные или количественные показатели могут служить маркерами микроспор, переключивших свое развитие на спорофитный путь В литературе предложены различные ответы на эти вопросы. Проанализируем те из них, которые касаются холодового стрессового воздействия на пыльники. Единое мнение о механизме действия i i низких положительных температур на процесс индукции эмбриоидогенеза в литературе отсутствует. Более того, несмотря на то, что имеется обширнейшая литература по проблеме устойчивости растений к низким температурам на различных уровнях организации организменном, тканевом, клеточном, субклеточном, молекулярном обзор Климов, , в целом природа эффекта, вызванного Холодовым шоком, пока полностью не объяснена. С.В. Климова , недостаточное применение системного подхода с целью выявить универсальные типы и способы адаптации растений к низким температурам на разных уровнях структурной иерархии.