Генерация супероксид-иона и активность пероксидазы при модификации проводимости плазмалеммы корневых клеток пшеницы

• Автор: Часов, Андрей Васильевич
• Шифр специальности: 03.00.12
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2002
• Место защиты: Казань
• Количество страниц: 133 с. : ил

ОГЛАВЛЕНИЕ
ОГЛАВЛЕНИЕ.

ИСПОЛЬЗОВА1II1ЫЕ СОКРА1ЕНИЯ

ВВЕДЕНИЕ

Глава 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. Кислород двуликий Янус

1.2. Свободные радикалы. АФК и их образование

1.3. Токсическое действие АФК. Окислительное повреждение макромолекул

1.3.1. Перекисное окисление липидов.

1.3.2. Окислительное повреждение нуклеиновых кислот.

1.3.3. Окислительное повреждение белков.

1.4.стоксическая роль АФК.
1.5. Ферментативное образование супероксидиона в растительной клетке.
1.5.1 Окислительновосстановительная система шшмалеммы
1.5.2. О двойственной роли пероксидазы
1.6. Антиоксиданты и защита клеток от АФК.
1.6.1. Аскорбат и аскорбатоксидаза
1.7. Салициловая кислота и свободнорадикальные процессы.
Глава 2. ОБЪЕКТЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
2.1. Объекты исследования.
2.1.1. Отсеченные корни проростков пшеницы
2.1.2. Экстраклеточный раствор
2.2. Методы исследования.
2.2.1. Определение генерации супероксидиона.
2.2.2. Определение активности иероксидазы
2.2.3. Определение активности аекорбатоксидазы.
2.2.4. Определение роста корней
Глава 3. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ.
3.1. Псроксидаза генератор супероксидиона.
3.2. Влияние салииилата. ди. трикарбоповых кислот на генерацию супероксидиона
3.3. Активирование экстраклеточной иероксидазы при действии детергентов и
трипсина.
3.4. Изменение активности экстраклеточной иероксидазы при действии металлов.
Эффект Са2ьXI
3.5. Влияние аскорбиновой кислоты па генерацию суисрокеидиона.
3.6. Регуляторная роль аекорбатоксидазы
ЗАКЛЮЧЕНИЕ.
ВЫВОДЫ.
ЛИТЕРАТУРА


Выявление особенностей генерации О и экстраклеточной пероксидазной активности в корневых клетках пшеницы при модификации проводимости плазмалеммы. Показать участие растворимой формы пероксидазы клеточной поверхности в генерации О Г и возможные пути активирования этого фермента. Изучить влияние салицилата и ряда ли, трикарбоновых кислот на образование в экстраклеточном рае воре и акт ивность пероксидазы. Выявить влияние предобработки отсеченных корней пшеницы ионами металлов на активность экстраклеточиой пероксидазы. Изучить действие экзогенной аскорбиновой кислоты на генерацию н рост корней проростков пшеницы. Определить активность аскорбатоксидазы в гомогенате корней пшеницы и экстраклеточном растворе. Исследовать чувствительность образования к ингибитору аскорбатоксидазы диэтилдитиокарбамату нат рия ДДК. Научная новизна работы. В процессе инкубации корней происходи Впервые обнаружено, что генерация в экстраклеточном растворе ГЖР чувствительна к ионам марганца и перекиси водорода кофактору и субстрату пероксидазы соответственно. Впервые показано, что экеграклеточная активность пероксидазы стимулируется п зш салициловой и янтарной кислотами, детергентами, трипсином, ионами металлов, подавляется МАПН и не чувствительна к салициловой и янтарной кислотам п Иго. Выявлено, что экзогенная аскорбиновая кислота полностью подавляет генерацию Ь в ЭКР. Показано значительное подавление образования корневыми клетками пшеницы при совместном действии ингибитора аскорбатоксидазы и аскорбата. Обнаружено, что экзогенная аскорбиновая кислота замедляет и к 6 суткам полностью останавливает рост корней проростков пшеницы. Практическая ценность работы. Полученные результаты могут служить теоретической и методологической основой для исследования функциональной значимости ЛФК в формировании адаптации и ее срыва при неблагоприятных воздействиях. В работе намечены дальнейшие пути решения задач по выявлению механизмов регуляции систем, как генерирующих, так и участвующих в детоксикации АФК. Апробация работы. Материалы диссертации были доложены на 5 Международной конференции x i i ii i марта Гамбург. Германия, на Всероссийской конференции молодых ученых Молодые ученые агропромышленному комплексу марта Казань. Горизонты физикохимической биологии мая 2 июня Пушино, на Международной конференции Митохондрии, клетки и активные формы кислорода 69 июня Пущино. Путинской конференции молодых ученых Биология наука XXI века апреля Пущино, на Международном симпозиуме ii Москва. Международной конференции Актуальные вопросы экологической физиологии растений в XXI веке 16 октября Сыктывкар. Молодые ученые ВолюУральского региона па рубеже веков октября Уфа. КИББ КНЦ РАН , гг. Путинской школеконференции молодых ученых Биология наука XXI века мая Пушимо. Глава I. Кислород играет ключевую роль в энергетике большинства живых существ. Он служит окислителем питательных веществ при дыхании животных, растений, грибов и бактерий Скулачсв, . Энергия, получаемая в процессе дыхания, запасается, в основном, в форме аденозинтрифосфорной кислоты АТФ, которая, в свою очередь, тратит энергию на все нужды клетки Скулачев, . Полевой. Владимиров. Очевидно преимущество кислородного аэробного типа энергетики перед анаэробным. Количество энергии, выделяющейся при окислении какоголибо питательною вещества кислородом, в несколько раз превышаем энергию, выделяющуюся при его окислении, например, иировиноградной кислотой, используемой качестве окислителя при таком распространенном типе брожения, как гликолиз Скулачсв. Роль клеточного дыхания не исчерпывается его способностью образовывал АТФ. Метаболические процессы, жизненно необходимые для клетки, также протекают с поглощением кислорода. При этом их итогом оказывается образование тех или иных полезных соединений. Одним из примеров такою рода может быть синтез стероидных гормонов в коре надпочечника.