Использование полиморфизма глиадина при формировании рационально организованной коллекции Triticum spelta L.

• Автор: Романова, Юлия Андреевна
• Шифр специальности: 03.00.12, 03.00.32
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2002
• Место защиты: Санкт-Петербург
• Количество страниц: 153 с. : ил

СОДЕРЖАНИЕ
ВВЕДЕНИЕ

ГЛАВА 1. ЛИТЕРАТУРНЫЙ ОБЗОР

1.1. Использование молекулярных маркеров в изучении генетических ресурсов растений

1.2. Запасные белки как маркеры

1.3. Биохимическая характеристика глиаднна

1.4. Генетический контроль глиадина

1.5. Общие сведения о ii .

1.6. Заключение

ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

2.1. Объект исследования

2.2. Электрофорез глиадина в вертикальных пластинах ПААГ
2.2.1. Выделение глиадина
2.2.2. Описание электрофореза
2.3. Составление белковых формул
2.4. Математическая обработка результатов электрофоретического анализа глиадина
ГЛАВА 3. ГЕНЕТИЧЕСКОЕ РАЗНООБРАЗИЕ ОБРАЗЦОВ КОЛЛЕКЦИИ ВИДА II . ПО СПЕКТРАМ ГЛИАДИНА 3
3.1 .Особенности суммарного электрофоретического спектра глиадина пшеницы спельта
3.2.0бщая характеристика спектров глиадинов образцов спельты
различного географического происхождения
3.2.2. Сравнительный анализ образцоворигиналов и образцов первой репродукции с образцами репродукции года по спектрам глиадина
3.3. Сравнение глиадиновых биотипов образцов коллекции спельты репродукции г.
3.4. Заключение
ГЛАВА 4. КЛАССИФИКАЦИЯ ОБРАЗЦОВ КОЛЛЕКЦИИ СПЕЛЬТЫ НА СРАВНЕНИЯ ЭЛЕКТРОФОРЕТИЧЕСКИХ СПЕКТРОВ ГЛИАДИНА С ИСПОЛЬЗОВАНИЕМ
МЕТОДОВ МНОГОМЕР1ЮЙ СТАТИСТИКИ
4.1. Сравнение спектров образцоворигиналов или образцов первой репродукции между собой
4.2. Сравнение спектров образцов репродукции г.
4.2.1. Результаты группировки глиадиновых биотипов с учетом наличия отсутствия компонентов
4.2.2. Результаты группировки глиадиновых биотипов с учетом наличия отсутствия компонентов и разнообразия их интенсивности
4.4. Заключение
ГЛАВА 5. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ
ВЫВОДЫ
ЛИТЕРАТУРА


Отдельные электрофоретические компоненты могут быть маркерами хромосом и других генетических систем клетки. Как писал Конарев , электрофорез белков в полиакриламидном геле далее Г1ЛЛГ, прим. Электрофоретические компоненты белка идентифицируют по их положению в спектре и обозначают величиной коэффициента подвижности или порядковым номером. Иногда их выражают величинами относительной молекулярной массы, которую определяют по электрофоретической шкале белков эталонов. Электрофоретический анализ дает возможность выявить малейшие различия в первичной структуре полипептида замена аминокислот, а также вторичные модификации белка амидированис, фосфорилирование, ацетилнрование, если они влияют на заряд и общую конфигурацию молекулы. Разрешающая способность электрофореза в ПААГ возрастает при сочетании его с другими методами, особенно с делением белка изоэлектрофокусированием. Также перспективен двумерный элекгрофорез. Его выполняют на гелевых пластинах в двух взаимно перпендикулярных направлениях при разном значении . Все вышесказанное обусловливает то, что электрофорез является перспективным методом научных исследований. Закономерно, что метод разделения спирторастворимых запасных белков эндосперма в кислом ПААГ . , , Vv . Ii i ii в г. Запасные белки семян пшеницы представлены в основном глиадинами и глютенинами, локализованными в эндосперме Конарев, . Их доля в пшеничном зерне превышает . Они получили название клейковинных белков, т. Пшеница обладает этим уникальным свойством белкового комплекса в отличие от других культур. Клейковина является ведущим фактором, определяющим технологические и пищевые и вкусовые достоинства пшеничного хлеба , Кретович и Вакар, , . Глнадин был разделен на компоненты . i . . . алюминийлактатный буфер 3. Спектр был разделен на группы компонентов в порядке убывания их подвижности при электрофорезе. Эти группы были условно названы i . . а, 0, у и оглиадины. Позднее крахмальный гель был заменен на полиакриламидный ПААГ Конарев и др. Гавршпок и др. После открытия факта стабильности компонентного состава белков независимо от изменчивости условии внешней среды , , . , , возникла идея о применимости глиадинов в селекционной работе с культурными и дикорастущими растениями. Коиарев, Созинов и лр. Следует отметить, что попытку выявить специфические различия между спсльтой и мягкой пшеницей по электрофоретическим спектрам глиадина предприняли . Для этого ими была разработана специальная номенклатура компонентов. В целом, однако, найти такие различия на исследованных ими сортах не удалось. Глиадин составляет почти половину всех белков эндосперма. Глиадин относится к группе т. I . . Горячий спирт является лучшим растворителем, чем холодный. Также глиадин растворим в органических кислотах, в деионизированной воде, в 26 М мочевине. Однако устойчивые растворы он дает только в низких концентрациях повышение концентрации его как в спиртовом, так и в уксуснокислом растворе ведет к агрегации молекул и образованию геля. Кроме того, глиадин. С он пракгически целиком переходит в гель, имеющий фибриллярную структуру Коиарев, . Глиадин характеризуется очень высоким содержанием глутамина и пролина отсюда и название спирторастворимых белков ироламины, что вместе с наличием в его составе большого числа гидрофобных групп за счет остатков лейцина, изолейцнна, валнна, фенилаланина и других аминокислот и обусловливает его растворимость в спирте. Глутамин является одним из непременных элементов во многих метаболических процессах, где осуществляется биосинтез аминокислот , Крстович, , . Пролнн также выполняет аналогичную роль i, . Наиболее богаты глутамином и пролином соглиадины i, . Глиадины отличаются низким содержанием лизина, что определяет их низкую пищевую и кормовую ценность. Мало содержат они и другие основные аминокислоты Рядчиков, .