Исследование метафазных хромосом на начальных стадиях дробления зародышей мышей

• Автор: Сорокин, Александр Викторович
• Шифр специальности: 03.00.11
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 1984
• Место защиты: Ленинград
• Количество страниц: 151 c. : ил

ОГЛАВЛЕНИЕ
ВВЕДЕНИЕ .

ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

Глава I. ХРОМОСОМЫ В НАЧАЛЬНОМ ЭМБРИОГЕНЕЗЕ ЖИВОТНЫХ. . .

Некоторые морфологические особенности становления генетического аппарата у рада видов животных. .

Хромосомы млекопитающих на ранних стадиях эмбриогенеза.

Глава 2. ФУНКЦИОНИРОВАНИЕ ЯДЕРНОГО АППАРАТА

В НАЧАЛЬНОМ ЭМБРИОГЕНЕЗЕ МЛЕКОПИТАЮЩИХ

Глава 3. ВИЗУАЛИЗАЦИЯ ГЕНЕТИЧЕСКОЙ АКТИВНОСТИ

УЧАСТКОВ ГЕНОМА НА ПРЕПАРАТАХ i i

Глава 4. МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ . . .

Материал исследования
Методы приготовления и окраски препаратов .
РЕЗУЛЬТАТЫ .
Глава 5. ИЗУЧЕНИЕ МОРФОЛОГИИ И ЦИТОХИМИИ ХРОМОСОМ
В НАЧАЛЬНОМ ЭМБРИОГЕНЕЗЕ МЫШЕЙ.
Формирование метафазы первого деления дробления . .
Изучение хромосом первого деления дробления с использованием метода дифференциальной окраски. .
Изучение хромосом второго деления дробления
Сопоставление длин хромосом первого и второго
делений дробления .
Влияние БУдРА и Хехста 8 при культивировании
зигот i vi на хромосомы
Стр.
Окрашивание хромосом первого деления дробления различными флуорохромами.
Глава 6. ЯДРЫШКООБРАЗУЩИЕ РАЙОНЫ ХРОМОСОМ В
НАЧАЛЬНОМ ЭМБРИОГЕНЕЗЕ МЫШЕЙ .
Выявление ядрышкообразущих районов метафазных хромосом у эмбрионов с нормальным кариотипом. .
Определение времени начала экспрессии ЯОР
отцовского и материнского происхождения .
Окрашивание серебром интерфазных ядер эмбрионов
Попытка выявления активных кластеров генов рРНК
при помощи реакции никтрансляции i i
Глава 7. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ
ВЫВОДЫ
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ


У различных организмов этот цроцесс образования ядра, содержащего наследственный материал обоих родителей кариогамия, происходит поразному. Кариогамия может быть классифицирована на два основных типа аегаэвшоуаиауавЫла, . При кариогамии первого типа сперматозоид проникает в яйцеклетку, уже полностью завершившую мейоз, затем происходит слияние мужского и женского цронуклеусов. Пронуклеусы сливаются и образуют единое ядро до первого митоза, и такой тип кариогамии, поэтому, можно назвать цредмитотическим СегаввшоуаГТауазМпа, . При кариогамии второго типа сперматозоид проникает в яйцеклетку, которая еще не завершила мейоз. При этом, пронуклеусы не сливаются и два гаплоидных набора хромосом лежат раздельно вплоть до метафазы первого деления дробления. В начале метафазы первого деления дробления они лежат рядом, но не перемешиваясь в общем веретене деления. Так, например, кариогамия первого типа имеет место у морского ежа и многих растений, в то время как кариогамия второго типа характерна для аскариды и млекопитающих ivvi, I0. Существуют также некоторые промежуточные формы кариогамии между этими двумя основными. Иная, детально разработанная классификация представлена в другой работе , , . Однако, несмотря на то, что существуют подробные морфологические описания и даже классификация способов кариогамии, суть изменений хроматина и процессов, приводящих к возникновению транскрипционно активных интерфазных ядер эмбрионов остается непонятной. Неясно, как образуют единое целое и располагаются в интерфазном ядре части хроматина отцовского и материнского происхождения. Трудность решения этого воцроса прежде всего обусловлена тем, что сведений об организации хромосом в обычных интерфазных ядрах очень мало или они неоднозначны Ченцов Ю. С., Поляков В. Ю., . Тем не менее, является общепринятым, что хромосомы сохраняют свою структурную и генетическую индивидуальность в течение всего жизненного цикла Ченцов Ю. С., Поляков В. Ю., . Кроме того,был выдвинут ряд гипотез об упорядоченном расположении хромосом В интерфазном ядре i, , V, , Свидченко А. И., iiii, , Мосолов . ., vivi, , . i. Тесно связано с этими гипотезами предположение о возникновении упорядоченной структуры ядра в ходе кариогамии цронуклеусов зиготы , , . Вполне возможно, что отдельные детали в теоретических построениях авторов могут быть неверными, но следует признать, что упорядоченность расположения хромосом в интерфазном ядре, если она существует, должна возникать в начальном эмбриогенезе, вероятнее всего,как завершение процесса кариогамии. Отметим, что как это следует из немногочисленных экспериментальных данных, гаплоидные наборы родительских хромосом, уже находясь в одном ядре, могут в эмбриогенезе некоторое время располагаться обособленно. Это выражается в обособленном расположении в прометафазных ядрах и в начале метафазы хромосом двух гаплоидных наборов, происходящих от разных родителей. Кроме того, эти гаплоидные наборы на стадии метафазы имеют различную степень спирализации и отличаются интенсивностью окрашивания. Данное явление гетероцикличности гаплоидных наборов хромосом характерно для генетического аппарата в раннем эмбриогенезе животных ПрокофьеваБельговская . ., . Так, гетероцикличность хромосом, происходящих от различных родителей, была обнаружена в ходе первых нескольких делений дробления у циклопов, аскарид и рыб ПрокофьеваБельговская . ., , . Это явление было также найдено и у млекопитающих, но только в 1ом делении дробления , а, 6. В работах на мышах было показано, что у млекопитающих менее спирализованными всегда являются хромосомы, внесенные сперматозоидом , в. Предполагается, что у других животных хромосомы отцовского,происхождения, наоборот, являются более спирализованными. Так, у рыб после оплодотворения икры облученной спермой наблюдали повреждения в более спирализованннх хромосомах ПрокофьеваБельговская . ., .