Экзополисахариды молочнокислых бактерий и их функциональная значимость в организме животных

• Автор: Полукаров, Евгений Викторович
• Шифр специальности: 03.00.07
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2009
• Место защиты: Саратов
• Количество страниц: 106 с. : ил.

Содержание

Список условных сокращений

Введение

1. Обзор литературы.

1.1. Полисахариды микробного происхождения и перспективы их применения

1.2. Классификация и структурная организация экзополисахаридов бактерий.

1.3. Факторы, влияющие на продукцию экзополисахаридов молочнокислых бактерий.

1.4. Роль экзополисахаридов, продуцируемых молочнокислыми бактериями в организме животных.

2. Собственные исследования.

2.1. Объект и методы исследований

2.1.1. Объект исследований.

2.1.2. Среды, используемые для культивирования бактерий
2.2. Методы исследований.
2.2.1. Выделение и очистка экзополисахаридов лактобацилл.
2.2.2. Определение молекулярных масс экзополисахаридов лактобацилл
2.2.3. Определение вязкости растворов экзополисахаридов лактобацилл
2.2.4. Определение белка.
2.2.5. Определение общего количества углеводов.
2.2.6. Определение химической природы экзополисахаридов лактобацилл методом ионообменной хроматографии.
2.2.7. Определение моносахаридного состава экзополисахаридов лактобацилл.
2.2.8. Моделирование инфекционного процесса у мышей
2.2.9. Определение цитокинов.
2.2 Статистическая обработка результатов.
2.3. Результаты исследований и их обсуждение.
2.3.1. Подбор питательных сред и условий культивирования i ii . i, . ii , . ii . ii В
2.3.2. Выделение и очистка экзополисахаридов . ii . i, . ii и . ii . ii .
2.3.3. Определение основных физикохимических свойств лаксара
2.3.3.1. Определение молекулярных масс лаксаранов
2.3.3.2. Определение химической природы лаксаранов.
2.3.3.3. Определение моносахаридного состава лаксаранов
2.3.3.4. Определение вязкости лаксаранов.
2.3.4. Исследование влияния лаксаранов на синтез цитокинов при моделировании инфекционного процесса.
2.3.4.1. Исследование влияние лаксаранов на продукцию цитокинов в сыворотке крови нотифицированных животных
2.3.4.2. Исследование влияния лаксаранов на продукцию цитокинов в сыворотке крови мышей при моделировании стафилококковой инфекции.
Заключение.
Выводы.
Список использованных литературных источников
Введение
Актуальность


Для формирования представления о влиянии ЭПС молочнокислых бактерий на физиологические реакции в организме животных, необходимо накопление данных о химической структуре, физических и биологических свойствах ЭПС разных видов и штаммов. В связи с этим исследования, посвященные изучению функций экзополисахаридов молочнокислых бактерий рода i различных штаммов, являются актуальными и могут иметь значительный научный интерес и прикладное значение. Цель работы состояла в выделении ЭГ1С i ii . . ii В и . В, изучении их основных физикохимических свойств и влиянии их на содержание цитокинов в организме животных в норме и при стафилококковой инфекции. Подобрать оптимальные условия культивирования . . ii В и . состав питательной среды, температура, , время культивирования для обеспечения максимального продуцирования ими экзополисахаридов в лабораторных условиях. Выделить и очистить экзополисахариды . . ii В и . из культуральной жидкости. Определить молекулярную массу, химическую природу, углеводный состав и вязкость растворов полученных экзополисахаридов . . ii В и . В. Изучить влияние i viv экзополисахаридов . . ii В и . на содержание цитокинов в сыворотке крови экспериментальных животных. Оценить цитокиновый статус организма экспериментальных животных при моделировании стафилококковой инфекции на фоне действия ЭПС . . ii В и . . Впервые выделены ЭПС . . ii В и . В и определены их молекулярные массы, химическая природа, моносахаридный состав и вязкость. Показано, что . . ii В и . В максимально продуцирует экзополисахариды на среде . с соавт. С, 5,5 па ч культивирования. Обнаружено, что введение ЭПС . . ii В и . В в организм лабораторных мышей оказывает неоднозначное влияние на содержание цитокинов ИЛ1а интерлейкин1а, ФНОа фактор нейкроза опухолиа, ИФу иитерферону, ИЛ4 интерлейкин4 в сыворотке крови. Показана возможность коррекции цитокинового статуса организма лабораторных мышей путем введения им ЭПС . . ii В3 6 и . В при стафилококковой инфекции. Способность экзополисахаридов . . ii В и . В регулировать содержание некоторых провоспалительных и регуляторных цитокинов в организме животных открывает перспективы использования их в качестве профилактических иммуномодулирующих препаратов и для коррекции цитокинового статуса при некоторых инфекционных заболеваниях. По материалам диссертационной работы опубликованы Методические рекомендации по выделению и очистке экзополисахаридов бактериального происхождения в соавторстве с Г. Е. Рысмухамбетовой, Е. Н. Бухаровой, Д. А. Жемеричкиным, Л. Учебнометодической комиссией и одобренные Ученым советом факультета ветеринарной медицины и биотехнологии Саратовского государственного аграрного университета им. Н.И. Вавилова протокол от июня г. Результаты диссертационной работы используются в учебном процессе при чтении лекций по микробиологии, биотехнологии, проведении лабораторнопрактических занятий и написании дипломных работ в Саратовском государственном аграрном университете им. Н.И. Вавилова. Выделенные из культуральной жидкости ЭПС Ь. Ьгиески Бэр. Ьиапст, Ь. ЬгиескИ В и Ь. Ьгиески БиЬБр. Ьгиескп В представлены одной нейтральной фракцией с молекулярными массами 0 кДа, 0 кДа, кДа соответственно и характеризуются сходным моносахаридным составом, однако обладают разной относительной вязкостью. Оптимальными условиями культивирования для наибольшей продукции экзополисахаридов для Ь. ЬгиескИ ББр. Ьиапсш, к. Ьгиески В и Ь. ЫЪгиескп БиЬБр. ЬгиескИ В являются С, 5,5, время культивирования ч на модифицированной питательной среде Ае1шап с соавт. ЭПС Ь. ЬгиескИ ББр. Ьиапст, Ь. Зе1ЬгиескИ В и ЬгиескИ БиЬБр. Ъгиескп В оказывают влияние на цитокиновый статус организма экспериментальных животных в норме и при стафилококковой инфекции. Работа выполнена на кафедре микробиологии вирусологии и иммунологии ФГОУ ВПО Саратовский государственный аграрный университет им. Н.И. Вавилова.