Характеристика микобактериальной популяции при саркоидозе

• Автор: Сафонова, Светлана Григорьевна
• Шифр специальности: 03.00.07
• Научная степень: Докторская
• Год защиты: 1999
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 172 с. : ил

СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ

ОСНОВНЫЕ СОКРАЩЕНИЯ. ОБОЗНАЧЕНИЯ

ВВЕДЕНИЕ

ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. Вопросы этиологии и патогенеза саркоидоза .

1.2. Дифференциальная диагностика саркоидоза .

1.3. Некоторые аспекты персистенции микобактерий .

1.4. Методы выявления измененных форм

микобактерий

ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

2.1. Характеристика диагностического материала

2.2. Бактериоскопический и культуральный методы выявления измененных форм микобактерий .
2.3. Биологический метод исследования диагностического материала
2.4. Биологические свойства и идентификация
выделенных микобактериальных штаммов
2.4.1. Получение микобактериальной массы
различных штаммов
2.4.2. Методы определения лекарственной чувствительности микобактерий к
антибактериальным препаратам
2.4.3. Биохимические методы идентификации
выделенных микобактериальных штаммов .
2.4.4. Выявление микобактерий с использованием полимеразноцепной реакции
2.5. Иммунологические методы исследования
2.5.1. Иммуноферментный анализ
2.5.2. Иммуноблоттинг с моноклональными антителами
2.6. Патоморфологические исследования
2.7. Статистическая обработка полученных результатов .
ГЛАВА 3. ВЫЯВЛЕНИЕ ЗЕРНИСТЫХ ФОРМ МИКОБАКТЕРИИ
БАКТЕРИОСКОПИЧЕСКИМ И КУЛЬТУРАЛЬНЫМ МЕТОДАМИ ИЗ ДИАГНОСТИЧЕСКОГО МАТЕРИАЛА БОЛЬНЫХ ОТ САРКОИДОЗОМ
3.1. Характеристика тинкториальных свойств зернистых форм микобактерий выделенных
от больных саркоидозом
3.2. Частота выявления зернистых форм микобактерий, от больных, саркоидозом на жидких питательных
средах
3.3. Частота выявления ЗФМЕ, выделенных от больных саркоидозом на плотных питательных
средах
ГЛАВА 4. БИОЛОГИЧЕСКИЕ СВОЙСТВА, ЗЕРНИСТЫХ ФОРМ МИКОБАКТЕРИИ. МОРФОЛОГИЧЕСКИЕ РЕАКЦИИ У ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНЫХ ЖИВОТНЫХ ПОСЛЕ ВВЕДЕНИЯ РАЗЛИЧНОГО ДИАГНОСТИЧЕСКОГО МАТЕРИАЛА ОТ БОЛЬНЫХ САРК0Д0М
4.1. Морфологические реакции у экспериментальных животных после введения им различного диагнос
тического материала от больных саркоидозом
4.2. Выделение культурревертантов из органов морских свинок, которым инокулирован материал от больных саркоидозом
ГЛАВА 5. ИДЕНТИФИКАЦИЯ ВЫДЕЛЕННЫХ КУЛЬТУР ЗЕРНИСТЫХ ФОРМ МИКОБАКТЕРИИ КУЛЬТУРАЛЬНО МОРФОЛОГИЧЕСКИМИ И БИОХИМИЧЕСКИМИ МЕТОДАМИ
5.1. Изучение морфологических и культуральных свойств зернистых форм микобактерий,
выделенных от больных саркоидозом
5.2. Метод растровой электронной микроскопии
для изучения морфологических свойств культур зернистых форм микобактерий, выделенных от больных саркоидозом
5.3. Изучение биохимических свойств, зернистых форм микобактерий, выделенных
от больных саркоидозом
5.4. Вирулентность культур зернистых форм микобактерий, выделенных от больных
саркоидозом
5.5. Определение лекарственной чувствительности к антибактериальным препаратам зернистых форм микобактерий, выделенных от больных саркоидозом
ГЛАВА 6. ИСПОЛЬЗОВАНИЕ М0ЛЕКУЛЯРН0 ГЕНЕТИЧЕСКИХ И
ИММУНОЛОГИЧЕСКИХ ИССЛЕДОВАНИЙ ДЛЯ ИДЕНТИФИКАЦИИ ЗЕРНИСТЫХ ФОРМ МИКОБАКТЕРИИ, ВЫДЕЛЕННЫХ ОТ БОЛЬНЫХ САРКОИДОЗОМ
6.1. Идентификация культур ЗФ МБ с использованием полимеразной цепной реакции
6.2. Иммунологическое исследование крови экспериментальных животных, после введения ЗФ МБ, методом иммунноферментного анализа
6.3. Иммунологическое исследование культур
ЗФ МБ, выделенных от больных саркоидозом,
методом иммуноблотинга
0БСУ1ДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ .
ВЫВОДЫ
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ


Гипотеза о том, что саркоидоз представляет собой своеобразную реакцию организма на грибковую инфекцию, или воздействие лепрозной, сифилитической инфекции . Этиология и патогенез этих заболеваний хорожо изу
ченн, а клиническая картина существенно отличается от таковой при саркоидозе. Некоторые авторы отстаивают гипотезу о вирусном происхождении саркоидоза ii А. Так v i . Р. vi . На I Международном конгрессе по саркоидозу в Токио в году i . ЭпмтейнБара. Однако этот вирус, по их мнению, не может быть причиной саркоидоза. Более сложным и спорным остается вопрос о роли микобактерий туберкулеза в происхождении саркоидоза. Так, Н. Му1 i К. Р. оценивали саркоидоз как универсальный склерозирующий туберкулез. Рубинжтейн Г. Р. относил саркоидоз к группе хронического гематогенного туберкулеза. А. также полагал, что саркоидоз это своеобразная форма туберкулеза. Основным доводам в пользу туберкулеза являлось сходство гистологического строения гранулемы и туберкулезного бугорка. Одна
ко, в настоящее времяИе выдерживает серьезной критики хорою известно, что при ряде гранулематозных заболеваний можно наблюдать гистологические структуры, мало отличающиеся от продуктивного ту
беркулезного бугорка . Факт обнаружения в ряде случаев микобактерий в очагах поражения при саркоидозе, а также сочетание саркоидоза и туберкулеза у больных, может являться серьезным доводом в пользу туберкулезной этиологии саркоидоза. Согласно данным литературы частота перехода саркоидоза в туберкулез составляет Н. В году . Гипотезу о возможности развития саркоидоза в результате введения в организм вакцины БЦХ с целью профилактики туберкулеза выдвинул , в году. Однако, по его данным только из 2 больных саркоидозом в прожлом были подвергнуты вакцинации. Аналогичные данные были получены и i . Когда из 5 больных саркоидозом лижь были вакцинированы, Иа1жго Н. БЦ1 заболевают реже, чем не вакцинированные. Следует также отметить сравнительно низкую заболеваемость саркоидозом детей, которых в ряде стран вакцинируют как правило, не только при рождении, но и повторно i . Таким образом, можно сказать, что в основном, дискуссия по вопросу этиологии саркоидоза ведется в одном направлении представляет ли саркоидоз своеобразное проявление туберкулезного процесса или это самостоятельное заболевание. Наряду с этим сохраняется гипотеза и о полиэтиологичности саркоидоза, которая рассматривает последний как синдром, возникающий вследствие единовременного воздействия различных агентов при наличии определенной пред
расположенности организма к реакции его мезенхимальной ткани Н. Изучение иммунологических процессов позволило отнести саркоидоз к заболеваниям, связанным с нарумениями клеточного иммунитета, проявляющимися явлениями гиперчувствительности замедленного типа ГЧЗТ Медуницын Н. В., . При этом иммунный ответ начинается с действия антигена одновременно на макрофаги и Тсупрессоры. Макрофаги передают Тхелперам переработанный антиген и интерлейкин1, активизирующий рецепторы Тхелперов для встречи с переработанным антигеном и продукцию нового лимфокинаинтерлейкина2 фактора роста Тлимфоцитов. Кроме того макрофаги также передают антигенную информацию 5лимфоцитам, которые под влиянием интерлейкина2 созревают и начинают пролиферировать с образованием плазматических клеток. Функциональная активность Тхелперов и Блимфоцитов контролируется Тсупрессорами, подавляющими избыточный антителогенез и клеточноопосредованные реакции. В связи с чем, саркоидоз можно охарактеризовать как Тклеточно опосредованный гранулематозный ответ. Изучение клеточноморфологических особенностей этого ответа позволяет, с больной долей вероятности, предполагать присутствие персистирующего микроорганизма . Многочисленные попытки идентифицировать вероятный бактериальный или вирусный агент i3i . Однако, в настоящее время появилось значительное число работ, свидетельствующих о туберкулезной этиологии саркоидоза Хоменко А. Г., Голыжевская В. М., Ельжанская М. П., , Голыжевская В. И. со авт. Г., Голыжевская В. И. со авт. Гедымин Л. В., Хоменко А. Г., , .