Субмикроскопическая организация гемолитических стрептококков и их Л-форм

• Автор: Чурилова, Надежда Станиславовна
• Шифр специальности: 03.00.07
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 1985
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 203 c. : ил

ОГЛАВЛЕНИЕ
ВВЕДЕНИЕ.

ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

Глава . Ультраструктура стрептококков

Глава П. Биологические особенности, морфология и ультра

структура Лформ стрептококка

Глава Ш. Взаимодействие Лформ стрептококка с фагоцитирующими клетками

СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ

Глава I. Материалы и методы.

1. Штаммы микроорганизмов и условия их культивирования

2. Метод выявления полисахаридов с рутениевым красным по Лафту

3. Метод выявления дегидрогеназ
4. Метод выявления АТФазы .
5. Иммунохимические методы изучения локализации антител
6. Методы приготовления электронномикроскопических препаратов и условия микроскопирования .
7. Метод криофрактографии.
8. Методы изучения взаимодействия Лформ с макрофагами .
9. Обнаружение антигена Лформ методом иммунофлуоресценции в световом микроскопе .
. Синхронизация культур методом температурного
. Условные обозначения
Глава П. Ультраструктура р гемолитического стрептококка
группы А, его Лформ и ревертанта
. Ультраструктура стрептококка
Стр.
2. Ультраструктура Лформ стрептококка группы А
3. Ультраструктура ревертанта
Глава Ш. Ультраструктура ь гемолитического стрептококка
группы В и его Лформ.
1. Ультраструктура стрептококка.
2. Ультраструктура Лформ стрептококка группы В
Глава У. Локализация антигенов у стрептококков, Лформ
и ревертанта.
Глава У. Взаимодействие Лформ ь гемолитического стрептококка групп А и В с макрофагами .
1. Электронномикроскопическое изучение взаимодействия Лформ 3 гемолитического стрептококка групп А и В с макрофагами в опытах
i vi .
2. Электронномикроскопическое изучение взаимодействия Лформ гемолитического стрептококка групп А и В с макрофагами в опытах
i viv
3. Изучение взаимодействия Лформ гемолитического стрептококка групп А и В с макрофагами методом непрямой иммунофлуоресценции
РИФ в опытах i vi и i viv
ОБСУВДЕНИЕ.
ВЫВОДИ.
ЛИТЕРАТУРА


Концентрация ЯаС1 для солезависимых Лформ, к которым относятся и Лформы стрептококка, колеблется от 0, до 1,1 М ИаС1 или других солей, которые могут быть использованы вместо него КС1,СаСС . Те же авторы указывают, что необходимые для существования Лформ осмотические условия может создавать и 0,0, М сахароза, добавление которой существенно снижает потребность Лформ в солях. Для выращивания Лформ используют чаще всего полужидкий агар 0,30,7 агаровый гель, приготовленный на триптическом переваре сердечной мышцы крупного рогатого скота с добавлением сыворотки млекопитающих и солевых стабилизаторов. Агаровый гель замещает отсутствующую у Лформ ригидную клеточную стенку и служит механической защитой для хрупких клеток Лформ . В , , , 3. Колонии типа А характерны для стабильных Лформ, они мелкие 0 мкм в диаметре, нежные, белсые, с перламутровым оттенком. При длительном выращивании этих колоний появляется незначительная пигментация. Колонии типа А лучше растут в аэробных условиях, независимо от присутствия пенициллина. Они могут расти и на жидкой питательной среде. Реверсия колоний этого типа отмечается очень редко . Колонии типа В с нежным кружевным краем и врастающим в среду центром. Их диаметр 0,52,0 мм. Эти колонии хорошо видны невооруженным глазом. При длительном хранении они приобретают желтокоричневую пигментацию за счет накопления флавина. На среде без пенициллина они быстро реверсируют в бактериальные формы. Ферментативные свойства Iформ стрептококка, хотя и изучены недостаточно, тем не менее, установлено, что они значительно изменяются по сравнению с исходной бактериальной клеткой , 7, 1. Так, известно, что Лформы стрептококка группы А, как и бактериальные формы, осуществляют молочнокислое сбраживание глюкозы, глюкозамина, ацетилглюкозамина. Гексозы сбраживаются с более высокой скоростью, чем пентозы и фосфорилированные гексозы 1. В отличие от бактериальной культуры, Лформы стрептококка потребляют ацетат. Они более активны в отношении галактозы, рамнозы, рибозы, глюкозо6фосфата и диоксиацетата, чем глюкозы, глюкозамина, ацетилглюкозамина, маннозы и фруктозы . При этом следует иметь в виду, что это изменение ферментативной активности может быть связано с воздействием высоких концентраций 6, 7. Кроме дегидрогеназ, у Лформ гемолитического стрептококка группы А показано наличие АТФазы, щелочной и кислой фосфатазы 2. Содержание щелочной фосфатазы у Лформ ниже, чем у бактериальной формы. Кислая фосфатаза бактерий и Лформ стрептококка имеет разный оптимум 6. кислой фосфатазы изменяется. Потеря клеточной стенки, до некоторой степени, обуславливает и различия в химическом составе клетки Лформ и исходных бактериальных штаммов. Сравнительное изучение химического состава Лформ гемолитического стрептококка группы А, протопластов стрептококка группы А, а также исходного стрептококка и ревертантов, показали, что в процессе Лтрансформации происходит изменение химического состава клетки, который не полностью восстанавливается при реверсии 7, 7, 0, 6, 9. Так, у Лформ не были обнаружены такие компоненты группового Сполисахарида, как ДАП, глутаминовая и мурамовая кислоты, глюкозамин и рамноза. Однако способность продуцировать Мбелок у них сохранилась 8. Вместе с тем, еще в процессе Лтрансформации происходит накопление предшественников в синтезе материала клеточной стенки. Мембраны Лформ стрептококка различных групп также различаются по составу белков. Имеются сведения об изменении нуклеотидного состава Ь гемолитического стрептококка группы А в процессе Лтрансформации 7. ДНК стрептококка и его Лформ двухспиральная, АТтипа, содержит одинаковое количество аденина и тимина, РНК ГЦтипа. Содержание ДНК у Лформ на единицу массы остается постоянным, независимо от фазы роста культуры. Содержание РНК изменяется, и в период логарифмической фазы роста культуры е содержание снижается в два раза. Относительно скорости синтеза нуклеиновых кислот у Лформ, по отношению к исходному стрептококку, существуют разноречивые мнения. .. , М. . , .