Совершенствование метода серологической идентификации холерных вибрионов не О1/не О139 серогрупп

• Автор: Авдеева, Елена Петровна
• Шифр специальности: 03.00.07
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2006
• Место защиты: Саратов
• Количество страниц: 150 с. : 9 ил.

СОДЕРЖАНИЕ

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ, ИСПОЛЬЗУЕМЫХ В РАБОТЕ

ВВЕДЕНИЕ.

ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

ГЛАВА 1. ХАРАКТЕРИСТИКА ХОЛЕРНЫХ ВИБРИОНОВ РАЗЛИЧНЫХ СЕРОГРУПП

1.1. Таксономия, биологические свойства холерных

вибрионов..

1.2. Антигенные свойства и разработка метода

серологической идентификации холерных вибрионов.

1.3. Распространение холерных вибрионов не , роль в

патологии человека

СОБСТВЕННЫЕ МАТЕРИАЛЫ.
ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ.
2.1. Использованные в работе штаммы
2.2. Сыворотки.
2.3. Фаги
2.4. Методы
2.4.1. Микробиологические
2.4.2. Серологические.
2.4.2.1 Реакция агглютинации.
2.4.2.2 Реакция преципитации.
2.4.3. Молекулярногенетические
2.4.3.1. Молекулярное зондирование.
2.4.3.2. Полимеразная цепная реакция.
2.4.4.0ценка токсигснности холерных вибрионов не
2.4.4.1. На модели кроликовсосунков.
2.4.4.2. На модели культуры клеток.
ГЛАВА 3. ХАРАКТЕРИСТИКА ШТАММОВ,
ИСПОЛЬЗОВАННЫХ ДЛЯ ПОЛУЧЕНИЯ МОНОСПЕЦИФИЧЕСКИХ ДИАГНОСТИЧЕСКИХ СЫВОРОТОК ПРОТИВ ХОЛЕРНЫХ ВИБРИОНОВ НЕ НЕ СЕРОГРУПП.
3.1. Микробиологические свойства
3.2. Оценка патогенных свойств производственных штаммов.
ГЛАВА 4. ПОЛУЧЕНИЕ ДИАГНОСТИЧЕСКИХ
МОНОСПЕЦИФИЧЕСКИХ КРОЛИЧЬИХ СУХИХ СЫВОРОТОК ПРОТИВ ХОЛЕРНЫХ ВИБРИОНОВ ТИ СЕРОГРУПП ДЛЯ СЛАЙДАГГЛЮТИНАЦИИ
4.1. Получение и оценка серологической активности и
специфичности иммунных кроличьих сывороток против холерных вибрионов ти серогрупп.
4.2. Получение диагностических моноспецифических
холерных сывороток ти серогрупп.
4.2.1. Приготовление бактериальной массы микробов
адсорбентов.
4.2.2. Адсорбция сывороток от гетерогенных антител
4.2.3. Лиофилизация иммунных сывороток. ЮЗ
ГЛАВА 5. СЕРОГИПИРОВАНИЕ ШТАММОВ ХОЛЕРНЫХ
ВИБРИОНОВ НЕ ИЕ , РАЗЛИЧНЫХ ПО ПРОИСХОЖДЕНИЮ, СРОКАМ ВЫДЕЛЕНИЯ И
ТОКСИГЕННОСТИ
ГЛАВА 6. ХАРАКТЕРИСТИКА ШТАММА П
VII 2, ПРЕДЛАГАЕМОГО В КАЧЕСТВЕ ТИПОВОГО ПРЕДСТАВИТЕЛЯ
НОВОЙ СЕРОГРУППЫ.
ЗАКЛЮЧЕНИЕ.
СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАННЫХ ИСТОЧНИКОВ


В число ти производственных штаммов включены типовые представители 1 32 45 73 серогрупп. Среди типовых штаммов определены токсигенные, относящиеся к 7 и 2 серогруппам. Установлены антигенные особенности вибрионов типовых штаммов, позволившие предложить двухэтапную адсорбцию иммунных сывороток от перекрестно реагирующих антител, что упростило технологию получения диагностических препаратов и повысило их специфичность. Предложенный режим лиофилизации моноспецифических сывороток обеспечивает стабильность препаратов при хранении без снижения их серологической активности. Впервые получен набор диагностических моноспецифических сывороток сухих, предназначегпгых для серологической идентификации холерных вибрионов не не серогрупп в слайдагглютинации в отличие от предлагаемой ранее для этих целей объемной агглютинации. Показано, что, с одной стороны, токсигенные штаммы встречаются среди холерных вибрионов, принадлежащих к разным серогруппам, с другой стороны, среди вибрионов одной серогруппы обнаружены как токсигенные, так и атоксигенные представители. Среди метилируемых холерных вибрионов не не выявлен токсигенный штамм с оригинальной антигенной структурой, депонированный в ГКПБ М в качесгве представителя новой серогруппы под КМ 8. Определена встречаемость холерных вибрионов новой серогруппы среди штаммов, выделенных на территории Астрахани. Научнопрактическая значимость работы. Инструкции одобрены Ученым советом Ростовского НИПЧИ протокол от 7 г. Полученный набор моноспецифических сывороток рекомендован проблемной комиссией Холера и патогенные для человека вибрионы в июне г. Холера институт с целью серологической идентификации холерных вибрионов не не серо1руип, выделенных от больных диарейными заболеваниями штаммов, а также выявления культур с оригинальной антигенной структурой для расширения коллекции типовых штаммов и повышения эффективности метода серотипирования. Упрощение техники серотипирования и расширение коллекции типовых культур способствует внедрению его в практику здравоохранения с целью совершенствования эниданализа и эпиднадзора за диарейными, а также системными заболеваниями, вызываемыми холерными вибрионами не не . Материалы по характеристике холерных вибрионов не О Пне серогрупп включены в Методические указания Лабораторная диагностика заболеваний, вызываемых парагемолитическими и другими патогенными для человека вибрионами, утвержденные главным государственным врачом РФ Г. Г. Онищенко 2 ноября г. Данные по характеристике типовых штаммов холерных вибрионов не не серогрупп использованы при составлении Каталога коллекции патогенных вибрионов г. Изменение схемы иммунизации и двухэтапная адсорбция иммунных типовых сывороток от перекрестно реагирующих антител существенно упрощает технологический процесс получения моноспецифических диагностических препаратов. Лиофшшзация моноспецифических сывороток в диагностическом титре для слайдагглютинации облегчает процесс серотипирования и обеспечивает стабильность препаратов при хранении без снижения их серологической активности. Использование сывороток к расширенному набору типовых штаммов от до 3 значительно увеличивает возможности серотипирования холерных вибрионов не не с выявлением среди них вибрионов ранее не известных серогрупп, доминирующих в этиологии ОКИ. При проведении мониторинга циркулирующих в различных регионах энтеропатогенных холерных вибрионов не О Уне необходимо характеризовать выделенные культуры по серологической принадлежности в сочетании с определением факторов патогенности токсигенности, в первую очередь на территориях 1И типа по эпидемическим проявлениям холеры. Апробация работы. Результаты исследования были доложены на научных конференциях молодых ученых РостовскогонаДону научноисследовательского противочумного института в , , гг. Ученым советом Ростовского НИПЧИ и утвержден директором института протокол 7. Исследования выполнены в рамках плановой научной темы Совершенствование метода серологической идентификации холерных вибрионов не О Уне серогрупп гос.