Роль энтеротоксина бактерий рода Citrobacter в исходе взаимодействия патоген - хозяин

• Автор: Туйгунов, Марсель Маратович
• Шифр специальности: 03.00.07
• Научная степень: Докторская
• Год защиты: 2003
• Место защиты: Челябинск
• Количество страниц: 239 с.

ОГЛАВЛЕНИЕ
1. ВВЕДЕНИЕ

2. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

2.1. Роль бактерий рода i в инфекционной патологии человека

2.2. Основные факторы патогенности бактерий рода i

2.3. Антигенпрезентующая функция иммунекомпетентных клеток в системе взаимодействия патогенхозяин
2.4. Взаимоотношения в системе патогенхозяин и особенности иммунологического ответа, связываемого с бактериями рода i
2.5. Цитокиновая и эйкозаноидная регуляция иммунного ответа макроорганизма в системе взаимоотношения патогенхозяин

2.6. Апоптоз в системе реагирования патогенхозяин

3. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

3.1. Микробиологические методы исследований

3.2. Молекулярногенетические методы исследований
3.3. Иммунологические методы исследований
3.4. Патоморфоло ические методы исследований
3.5. Статистическая обрабока результатов СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ
4. Фенотипическая характеристика биологических свойств бактерий рода i
4.1. Морфологическая и культуральная характеристика бактерий рода i
4.2. Биохимический и серологический пейзаж i .
4.3. Питательные потребности клинических штаммов i . ауксо и проготрофность
4.4 Адгезивные свойства бактерий рода i
4.5. Факторы i коррелирующие с патогенностью
бактерий
4.6. Персистирующие свойства бактерий рода i
4.7. Тестирование токсигенности и вирулентности бактерий рода
i на биологических моделях
5. Генотипическая характеристика биологических свойств бактерий рола i
5.1. типированле клинических штаммов i
5.2. Плазмидный профиль клинических штаммов i .
5.3. Острова патогенности бактерий рода i.
детерминированные генами Е i
6. Взаимоотношения в системе патогенхозяин
6.1. Патоморфологическая характеристика стенок тонкого
кишечника кролика, зараженных патогенными штаммами i
6.2. Влияние термолабильного энтеротоксина бактерий рода
i на фагоцитарную активность перитонеальных макрофагов
6.3. Влияние термолабильного энтеротоксина С ii на
антигенпрезентующую и атигенпроцессинговую функцию перитонеальных макрофагов
6.4. Исследование в шяния юрмолабильного энтеротоксина
i на 1клеточное звено иммунитета в реакции бласттрансформации шмфоцитов
6.5. Действие термолабильного энтеротоксина i . на
Вклеточное звено иммунитета организма хозяина
6.6. Влияние термолабилыюго энтеротоксина i . на
лизосомальную активность макрофагов перитонеального экссудата
6.7. Влияние термолабильного энгеротоксина С ii на
внутриклеточный кислородэависимый метаболизм перитонеальных макрофагов мышей
6.8. Цитокиновая регуляция межклеточных коопераций в
иммунной адаптации организма хозяина к действию термолабильного энтеротоксина .ii
6.9. Изучение влияния термолабильного энтеротоксина i
. на феномен апоптоза в системе взаимодействия патогенхозяин
6 Получение и характеристика антитоксической сыворотки к
термолабильному энтеротоксину i
7. ЗАКЛЮЧЕНИЕ
8. ВЫВОДЫ
9. СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ
ПРИЛОЖЕНИЯ
СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ
кластер дифференцировки.
цитотоксические лимфоциты.
эпидермальный ростковый фактор.
нейтрофил активирующий белок эпителиальных клеток. гранулоцит макрофагальный колониестимулирующий фактор. I 1 межклеточная адгезивная молекула 1.
I интерферон.
I интерферон гамма.
I иммуноглобулин.
I интерлейкины.
1ра антиген плазмиды инвазии.
липополисахарид.
МСР моноцит хемоаттрактановый протеин.
МР вое пап и тельный белок макрофаг.
ivi, x регулятор нормальной активации, экспрессии и секреции Т клеток. трансформирующий ростовой фактор бета.
фактор некроза опухолей альфа.
V1 адгезивная молекула сосудов 1.
V v i очень поздний антиген.
ГМФШ гексозомонофосфатный шунт.
МФС мононуклеарнофагоци гарная система.
РБТЛ реакция бласггрансформации лимфоцитов.
УПЭусловнола огенные энтеробактерии.
ВВЕДЕНИЕ
Актуальность


Многие бактериальные экзоферменты и экзотоксины гиалуронидазы, коллагеназы и фосфолипазы способны повреждать экстрацеллюлярные структуры или плазматическую мембрану эукариотических клеток с помощью ферментативного гидролиза или в результате формирования пор. Эти повреждения могут вызвать не только прямой лизис клеток, но также способствовать распространению бактерий в макроорганизме. К представителям этой группы токсинов относятся атоксин ii i, стрептокиназа 0, 0, 0. Наиболее изученными в этом отношении у i . Порообразующие токсины и ферменты в соответствии со своим названием формируют трансмембранные поры и нарушают селективный вход и выход ионов через плазматическую мембрану. Эта группа токсинов включает Xтоксины т xi фамотрицательных УПЭ цитолизины, гемолизины, лейкотоксины. В научной литературе встречаются лишь единичные сообщения о продукции гемолизинов i . Мембранный белок у С iv с молекулярной массой , выделенный при менингиох, обладает гемолитической активностью 7, которая, по ряду данных авторов, является этиологическим маркером бактерий, обусловливающих менингиты, который связан с этими биоварами i . По данным других авторов, агемолизин представляет собой белок определенной молекулярной массы , . Отмечено, что при образовании пор под действием гемолизина запускаются вторичные процессы, которые обусловливают развитие патологических последствий. Эти процессы включают активацию эндонуклеаз, увеличение экзоцитоза тромбоцитов, высвобождение цитокинов и медиаторов воспаления, а также выделение эйкозаноидов 4. Синтез и экспрессия гемолизина сопряжена с наличием с детерминант как плазмидной, так и хромосомной локализации. Известно, что детерминанта состоит из 4 цистронов , Ва, , , которые тесно взаимосвязаны между собой и отвечают за определенные механизмы экспрессии, синтеза и секреции гемолизина. Методом молекулярного зондирования у С iv некоторые исследователи обнаружили аналогичные участки и детерминант с . Р vi и М ii 2, 0 не были обнаружены, что может указывать на неоднородность генов, кодирующих синтез гемолизинов, либо иную природу гемолитической активности изученных культур. Данные литературы о гемолитической активности бактерий рода i продолжают оставаться немногочисленными и противоречивыми. Вместе с тем выявлено, что их гемолизины вызывают деструктивные изменения монослоя культуры клеток , включают механизмы апоптоза в макрофагах и культурах клеток 4 6, развитие геморрагической пневмонии у мышей , оказывают цитотоксическое действие на эукариотические клетки . Бактериальные токсины, объединенные во вторую группу, поражают клеткимишени в результате подавления синтеза белков. Субстратами для этих токсинов являются фактор элонгации биосинтеза и рибосомальная РНК. Так, дифтерийный токсин и экзотоксин . АДФрибозилирование фактора элонгации , нарушают синтез белка 7, 3. РНК, нарушая ее взаимодействие с факторами элонгации 4, 4, 1, 9, 5, 6. Подавление белкового синтеза данной группой токсинов приводит в конечном итоге к гибели клеткимишени. Е i отличаются только одной аминокислотой. Различные модификации x2 обнаружены у штаммов i Хотя x2 рассматривается в качестве прототипа этой группы, были найдены различные модификации, отличающиеся по антигенным свойствам, степени сродства к рецепторам и способности активироваться под действием интестинальной слизи. Некоторые из перечисленных свойств обусловлены различиями в одномдвух нуклеотидах кодирующих генов. По поводу выработки шигаподобного токсина, бактериями рода i, в литературе встречаются лишь единичные сообщения 3, 5, 3,0. С и, и инактивацию цитопатического действия на клетки линии Уего антитоксической сывороткой, показали на близкородственное происхождение шигатоксина i с x2 Е i. А нековалентно связана с субъединицей В, непосредственно взаимодействующей с мишенью. Уже хорошо изучена кристаллическая структура пентамера В в x 1токсине 2 и холотоксина в xтоксине 3. Подобная АВструктура токсина характерна для термолабильного токсина i 6, холерного токсина и токсина коклюша 7.