Роль системной регуляции экспрессии генов патогенности в вирулентности Listeria Monocytogenes

• Автор: Ермолаева, Светлана Александровна
• Шифр специальности: 03.00.07, 03.00.15
• Научная степень: Докторская
• Год защиты: 2004
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 192 с. : ил.

1.1. Современные представления о механизме вирулентности ii

1.1.1. Эпидемиология . .

1.1.2. Таксономия и экология листсрий.

1.1.3. Взаимодействие . с макроорганизмом

1.1.4. Роль бактериальных факторов патогенности во взаимодействии .

с клетками млекопитающих

1.1.6. Регуляция экспрессии факторов патогенности.

1.2. Аутокринные механизмы регуляции экспрессии генов у патогенных бактерий

Глава 2. Материалы н методы

2.1. Бактериальные штаммы и условия культивирования.

2.2. Конструирование плазмид

2.4. Методы работы с нуклеиновыми кислотами.
2.5. Методы анализа экспрессии белков.
2.6. Методы анализа компонентов культуральной жидкости
2.7. Методы, использованные для определения вирулентности на биологических моделях
Глава 3. Результаты исследований
3.1. Координация экспрессии факторов патогенности на уровне регуляции транскрипции
3.1.1. Влияние условий культивирования на уровень продукции факторов патогенности .
3.1.2. В присутствии адсорбентов происходит увеличение уровня транскрипции генов регулона
3.1.3. Структурнофункциональные характеристики центрального регулятора генов патогенности . .
3.1.4. В присутствии адсорбентов происходит переключение активности центрального регулятора генов патогенности .
3.2. Вклад аугокрннных механизмов в регуляцию экспрессии факторов патогенности факультативных внутриклеточных паразитов на модели . .
3.2.1. . продуцирует ауторепрессорную субстанцию, накопление которой приводит к репрессии регулона
3.2.2. . обладает по крайней мере тремя генетическими системами типа i.
. Роль отрицательной регуляции экспрессии генов факторов патогенности в вирулентности . .
3.4. Разработка новых подходов к идентификации и дифференциации . , основанных на изучении регуляторных элементов,
контролирующих экспрессию факторов патогенности
3.4.1. Разработка метода идентификации . , основанного на индукции лецитиназной активности в присутствии активированного угля.
3.4.2. Типирование ii на основе полиморфизма генов факторов патогенности.
Глава 4. Обсуждение
Выводы. в
Список литературы


Ь Сосиски хот
6
Сливочное
Крупнейшая по настоящее время вспышка листериоза была выявлена в ЛосАнжелесе, Калифорния, США в январеавгусте г. Всего зарегистрировано 2 случая листериоза, из них со смертельным исходом мертворождение новорожденные, взрослые люди. В среднем летальность при заболевании листериозом достигает . В г. Филадельфии, США . Всего заболело человек, большинство из которых составляли взрослые люди с ослабленной иммунной системой в результате сопутствующих заболеваний или пожилого возраста средний возраст лет. При этой вспышке не удалось выявить общего источника возбудителя. Хотя большая часть выделенных от больных штаммов принадлежала к серотипу 4В , были выделены также штаммы серотипов В, А и ЗВ. В последние годы регламентация и введение правил контроля листерий в продуктах питания в большинстве Европейских стран и США позволило избежать столь крупных эпидемий листериоза как в ЛосАнжелесе в г. Швейцарии в г. Большинство крупных эпидемических вспышек листериоза с высоким процентом летальных исходов обусловлены потреблением пищевых продуктов, прежде всего сыра, других молочных продуктов и салатов, в меньшей степени мясных, куриных и рыбных изделий Костенко и др. Карликанова и др. Значение пищевого пути передачи листериоза хорошо иллюстрируют данные Центров по контролю и профилактике заболеваний , США, показавшие, что всех продуктов, хранящихся в домашних холодильниках, контаминированы листериями. У больных листериозом в холодильнике был найден по меньшей мере один продукт, контамированный листериями. В случаев выделенные штаммы . Наконец, более спорадических случаев листериоза в США были связаны с хранившимися в холодильнике мягкими сырами или полуфабрикатами мясных продуктов . Листер ии ферментируют глюкозу,
катал азоположительны, оксид азоотрицательны, образуют цитохром ы. Оптимальная температура роста С, хотя листерии как психрофильный микроорганизм может расти при С и при 4С. При С листерии подвижны за счет образования немногочисленных перитрихиальных жгутиков, при С жгутики, как правило, не образуются и листерии неподвижны. Листерии не кислотоустойчивы, не образуют споры и капсулы, факультативные анаэробы, хемоорганотрофы. Девятое издание определителя Берджи относит род ii к группе микроорганизмов грамположитсльные неспорообразующие палочки правильной формы. Анализ гомологии нуклеотидных последовательностей ДНК листерий и близких к ним микроорганизмов, исследования РНК показали, что листерии филогенетически наиболее близки к роду ix, и вместе с этим родом занимают промежуточное положение между бациллами и лактобациллами, несколько более удалены от стрептококков, а также i, и ix i . Из шести известных в настоящее время видов листерий . Листерии широко распространены во внешней среде, рядом исследователей показано их присутствие в почве, воде, растениях. По данным Вейса i i. Причем, чаще всего листерии выделяли из почвы тех полей, где травы не скашивались несколько лет, поскольку увядшая и разложившаяся трава способствует их размножению. Психрофильность листерий, т. С, способствуют активному увеличению концентрации листерий в почве весной и осенью. При выделении листерий из сточных вод и ила сточных вод их концентрация в ряде случаев превосходила концентрацию сальмонелл, а сроки выживаемости во внешней среде также превосходили таковые у сальмонелл. Анализ динамики размножения листерий в почвенной вытяжке иловатоболотная почва и вегетативных органах пшеницы, которую выращивали на данной почве, показал, что листерии проникают в вегетативные органы растений через корневую
систему и сохраняются там в высокой концентрации КОЕч в течение месяца Пушкарева и др. Таким образом, листерии способны адаптироваться к существованию в широком диапазоне условий внешней среды. Высокая метаболическая пластичность листерий, способность к переходу от сапрофитического образа жизни к паразитическому и наоборот, влечет за собой смену способа утилизации углекислого газа и водорода при этом во внешней среде листерии являются хемолитоавтотрофами. Листерии выделяют в различных климатических регионах планеты, даже за северным полярным кругом.