Разработка лабораторных методов выявления ареала распространения листерий : На примере Ульяновской области

• Автор: Меркулов, Анатолий Викторович
• Шифр специальности: 03.00.07
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2004
• Место защиты: Саратов
• Количество страниц: 148 с. : ил.

СОДЕРЖАНИЕ
ВВЕДЕНИЕ

I. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1.Общая характеристика болезни.

1.2. Общая характеристика возбудителя болезни

1.3. Эпидемиология листериоза.

1.4. Некоторые особенности эпизоотологии листериоза.

1.5. Диагностика листериоза.

1.6. Фагоиндикация бактерий и фаготипирование.

1.7. Генетические методы идентификации

И. СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ

2.1. Материалы и методы
2.2. Результаты собственных исследований
2.2.1. Распространение листериозной инфекции на территории Ульяновской области за гг.
2.2.2. Анализ эпизоотологических показателей листериозной инфекции по Ульяновской области.
2.2.3. Разработка ускоренной схемы бактериологического исследования по индикации листерий
2.2.4. Разработка схемы индикации листерий методом РНФ с помощью смеси фагов Ь 2А и Ь 4А
2.2.5. Определение чувствительности ПЦР анализа на культуре Ь.топосуиепез, в клиническом материале, объектах окружающей среды для изучения ареала распространения листерий
2.2.6. Результаты ПЦР анализа в населенных пунктах Ульяновской области
2.2.7. Сравнение различных методов исследования по индикации
листерий
2.3. Обсуждение.
ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ .
СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАННЫХ ЛИТЕРАТУРНЫХ
ИСТОЧНИКОВ
ПРИЛОЖЕНИЯ
ВВЕДЕНИЕ
Актуальность


, когда была установлена идентичность выделенной ими бактериальной культуры, было дано официально признанное название рода i и вида . В году родовое название изменили на ii. Установлено, что листериоз поражает людей, многие виды домашних и диких животных, а также птиц. Бакулов, . . это неспорообразующие, короткие палочки, правильной формы, диаметром 0,40,5 мкм и длинной 0,52,0 мкм с закруглнными концами. Иногда встречаются клетки с слегка изогнутыми концами. Расположены в мазках либо по одиночке, либо в коротких цепочках, возможно в виде частокола или же римской буквы V. При микроскопии листерий в мазках можно увидеть их групповое расположение, параллельное, вдоль длинной оси. В мазках из инфицированного патологического материала или из жидкой среды встречаются листерии кокковой формы диаметром 0,40,5 мкм и длиной 0,40,6 мкм. Они могут быть ошибочно приняты за стрептококки. В более зрелых или необработанных культурах могут встречаться формы в виде волокон длинной до 6 мкм. Окраска по Граму положительная. Но в старых культурах теряют способность к сохранению окраски по Граму. Не кислотоустойчивы, споры не образуют. .i, . сообщили о наличии мукополисахаридной капсулы у листерий, однако другие исследователи, в частности, . i не подтвердили этого факта. Листериозная палочка во время культивирования при комнатной температуре всегда подвижна. При температуре С жгутики, как правило, не образуются и листерии оказываются неподвижны. Листериозная культура данного вида является аэробной и факультативно анаэробной. Температурный диапазон роста от 1 до С. Однако культура остатся жизнеспособной и при более высоких температурах до С. Температурный оптимум С. Листерии способны расти и размножаться в диапазоне от 6 до 9, но сохраняют свою жизнеспособность при величине 5. Оптимальные условия роста при 7,07,4 суточный рост листерий проявляется в виде росинчатых колоний. При обычном освещении колонии обладают сероголубоватым цветом. Размер 37дневных колоний достигает диаметра 35,5 мм с непрозрачным центром и неправильной формы. В полужидкой среде 0,ного агара суточный рост идт вдоль укола. В МГ1Б рост идт медленно, но через часов появляется нежное, опалесцирующее помутнение. Через 7 дней на дне пробирки образуется осадок, который при встряхивании образует поднимающуюся вверх косичку. Бактерии обладают гемолитической активностью. Слабая или едва уловимая гемолитическая активность может быть усилена использованием САМРтеста. Листериозная культура в большинстве случаев является каталазоположительной и оксидазоотринательной, но необходимо учитывать, что если питательные среды содержат низкие концентрации мясного или дрожжевого экстракта, то возможна отрицательная каталазная реакция. Активность каталазы подавляется и на средах, содержащих высокую более концентрацию глюкозы. Реакция с метилротом и ФогесПроскауера положительная. Листерии не разжижают желатин, не гидролизуют казеин и малонат. Индол не продуцируют, на обычных питательных средах не образуют сероводород. Метаболизм сахаров сопровождается образованием кислоты, но не газа. Листерии могут расти в сложных средах, содержащих до ЫаС1. При содержания поваренной соли 6,0 остаются жизнеспособными в течение года. Необходимо отметить, что хотя вышеперечисленные свойства листерий достаточно типичны, но возможны изменения, связанные с определнными питательными средами и выделения новых штаммов листерий. Нельзя забывать и о других видах листерий, характеристика которых приведена в таблице 1. п п Дифференци рующие свойства . . i . . i i . . i . Тест ФогесПроскуаэра. АНТИГЕННАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА. Штаммы вида различаются по антигенному составу и включают следующие серовары 12а, 12в, 12с, За, Зв, Зс, 4а, 4ав, 4с, , 4е и серовар 7. Результаты представлены на рисунке 1. Сераиры ii , I ivvi. i, I ii, I i. серологически неотличима от ii серопогиеои неотличима от . Рис 1. Антигенная структура листерий.