Нуклеаза и фосфатаза proteus mirabilis. Синтез, локализация, физико-химические и энзиматические свойства

• Автор: Салихова, Зифа Закарьевна
• Шифр специальности: 03.00.07
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2000
• Место защиты: Казань
• Количество страниц: 139 с. : ил.

ОГЛАВЛЕНИЕ

Список использованных в работе сокращении

ВВЕДЕНИЕ .

ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1. iii ссоврсмснные данные о фнзиологобиохимичсских и морфологических свойствах

2. Гидролитическне ферменты iii

3. Нуклеазы патогенных бактерий

ЗАКЛЮЧЕНИЕ ПО ОБЗОРУ ЛИТЕРАТУРЫ

ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ

1. Материалы и методы

1.1. Штаммы бактерий, использованные в работе

1.2. Питательные среды.
1.3. Выращивание бактерий и получение бесклсточных экстрактов
1.4. Контроль за ростом клеток
1.5. Методы обработки клеток.
1.6. Определение активности ферментов
1.7. Определение удельной скорости роста бактерий и удельной скорости синтеза фермента.
1.8. Концентрирование внеклеточных белков и электрофорез.
1.9. Выделение, очистка и характеристика нуклеазы
1 Использованные материалы. ммтчиитч
1 Математическая обработка результатов в
2. Результаты исследований
2.1. Нуклеазная и фосфатазная активность iii.
2.2. Локализация нукпеаз и фосфатазы в клетках iii4.
2.3. Использование различных методов освобождения периплазматичсских ферментов для получения нуклеаз и фосфатазы iii4 а
2.4. Состав белков с нуклеазной и фосфатазной активностью в культуральной жидкости и периплазме iii4
2.5. Зависимость биосинтеза ферментов от физиологического состоя
ния клеток по фазам роста
2.6. Выделение н очистка нуклеазы iii4
2.7. Характеристика свойств нуклеазы iii4.
2.8. Механизмы регуляции биосинтеза эндонуклеазы и фосфатазы iii4..
2.8.1. Влияние неорганического фосфата.
2.8.2. Влияние нуклеиновых кислот
2.8.3. Влияние митомицинаС классического индуктора ответа
2.8.4. Нуклеазная и фосфатазная активности гипержгутиковых роящихся клеток..
ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ.
ВЫВОДЫ
ЛИТЕРАТУРА


Согласно классификации, приведенной в Определителе бактерий Берджи , род относится к семейству i, и в пределах рода различают виды vi типовой внд, iii, xi и i. Морфологические и культуральнобиохимические признаки. Все представители рода протеев имеют форму прямых палочек размером 0. У некоторых штаммов . Езспчук, , . Описан белок ii . . Фимбрии определяют способность . . У ропатогенные штаммы . . Гены двух из них выделены и определена их нуклеотидная последовательность iii ii . ii ii i . Помимо фимбрий у Р iii обнаружены ворсинки, экспрессия синтеза белка которых зависит от температуры инкубации культу ры . В настоящее время изучена регуляция экспрессии локуса i . и ПаВ, тандемносвязанных и почти идентичных копий гена флагелина, основного белка жгутиков. Показано, что при дифференцировке вегогативных клеток в роящиеся формы уровень экспрессии гена i увеличивается в 8 раз , . Протеи не образуют капсул, подвижны, им не свойственно образование пигмента Энтеробактерии, . Однако сравнительно недавно обнаружен пигмент, продуцируемый формами . i . Антигенная структура бактерий рода сходна в принципе с таковой других членов семейства i и формируется из соматических О и жгутиковых Нантигенов, в некоторых случаях у протеев обнаруживали и поверхностные соматичеекие Кантигены. Установлено, что О и Нантигены могут иметь мозаичное строение Энтеробактсрии, . 1ротеи способны расти на простых по составу питательных средах в широком диапазоне температур от до С. Оптнмальная температура роста С. В зависимости от условий роста . . Представители рода обладают свойствами, характеризующими семейство i в целом Определитель бактерий Берджи, . Протей мало устойчив при высыхании, что, возможно, сказывается на результатах поиска его в некоторых объектах окружающей среды. Среди биохимических реакций особенно характерной, отличающей род от энтеробактерий других родов, является дезаминирование фенилаланина. Идентифицирован ген, кодирующий фенилаланииовую дезаминазу . . Характерной особенностью протеев является их способность к роению и быстрому распространению по поверхности плотной питательной среды Энтеробактерии, . Роль подвижности во взаимодействии бактериальных и хозяйских клеток подробно описана Оттеман и Миллер , i, . Феномен Шукевнча всползание вверх из конденсационной юдь по скошенной поверхности агара является одним из диагностических признаков при идентификации Нформ протеев. Со способностью протеев к роению связан и феномен i, выражающийся в том, что у посеянных на разных участках питательного агара в чашках Петри штаммов протея, различных по Нантигену, между зонами роения образуется разграничительная демаркационная полоса. Роение связано с образованием из коротких бациллярных длинных подвижных особей 0 мкм в длину, способных по одиночке или группами расползаться в радиальном направлении на поверхность свежей питательной среды, где они, делясь, превращаются в мелкие клетки, которые способны снова образовывать длинные формы роения Джавец, . Поведение, подобное роению i vi наблюдалось и при культивировании . Эти нити сочли идентичными роящимся клеткам, сформированным на агаре, потому что они прекратили беспорядочное деление, образовывали большое количество жгутиков, и распределение нуклеоида в нитях показывало, что сегрегация была нормальная i . На способность к роению . i, i, . Аллисон с соавторами идентифицировали 3 этапа в цикле роения . V в многоядерные многожгутиковые роящиеся клетки популяция роящихся клеток С и превращение роящихся клеток в короткие вегетативные V клетки консолидация i . В результате циклически повторяющихся событий на поверхности агара при посеве в цент чашки можно наблюдать образование концентрических колец рис.