Разработка жидкой питательной среды накопления для выделения сальмонелл из водных объектов

• Автор: Панасовец, Ольга Петровна
• Шифр специальности: 03.00.07
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2007
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 132 с. : ил.

ОГЛАВЛЕНИЕ
ВВЕДЕНИЕ

ЧАСТЬ I. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

ГЛАВА 1

1.1. Распространение и выживаемость сальмонелл в водных объектах.

1.1.1. Загрязнение сальмонеллами сточных вод.

1.1.2. Загрязнение сальмонеллами открытых водоемов.

1.2. Некультивируемые формы бактерий НФ

1.2.1. Факторы, способствующие переходу микроорганизмов

в некультивируемое состояние НС

1.2.2. Методы определения НФ.

1.2.3. Факторы реверсии НФ.
1.3. Характеристика сред накопления для выделения сальмонелл
из объектов окружающей среды.
ЧАСТЬ II. СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ
ГЛАВА 2. Материалы и методы исследования.
2.1. Штаммы
2.2. Реактивы и питательные среды
2.3. Биологические методы
2.3.1. Чувствительность среды
2.3.2. Определение показателя эффективности и скорости роста сальмонелл
2.3.3. Показатель ингибирования роста возможной сопутствующей микробиоты
2.3.4. Определение стабильности основных свойств тестштаммов
сальмонелл, выращенных на предлагаемой среде и средах сравнения
2.4. Некультивируемые формы саимонелл
2.4.1. Получение некультивируемых форм сальмонелл
2.4.2. Проведение ПЦР
2.5. Методика реверсии некультивируемых форм сальмонелл
2.5.1. Определение вирулентности культур сальмонелл, находящихся в НФ,
на белых мышах.
2.5.2. Методика определения влияния различных сред накопления на восстановление биологических свойств сальмонелл, находящихся в НС
2.6. Физикохимические методы
2.6.1. Определение
2.6.2. Аминный азот
2.7. Исследования, проведенные в полевых условиях
2.7.1. Объекты изучения в полевых условиях.
2.7. Методика исследования воды поверхностных водоемов.
2.8. Исследование хозяйственнобытовых сточных вод.
2.9. Статистические методы.
ГЛАВА 3. ХАРАКТЕРИСТИКА СРЕДЫ НАКОПЛЕНИЯ
ДЛЯ ВЫДЕЛЕНИЯ САЛЬМОНЕЛЛ ИЗ ВОДНЫХ ОБЪЕКТОВ
3.1. Подбор оптимального соотношения ингредиентов в составе
предлагаемой среды.
3.2. Физикохимические показатели среды
3.3. Технология приготовления среды накопления для сальмонелл
3.4. Биологические свойства среды
3.4.1. Чувствительность среды
3.4.2. Определение показателя эффективности и скорости роста сальмонелл
3.4.3. Показатель ингибирования роста сопутствующей микробиоты.
ГЛАВА 4. НЕКУЛЬТИВИРУЕМЫЕ ФОРМЫ САЛЬМОНЕЛЛ
4.1. Переход сальмонелл в некультивируемое состояние
под действием повышенной температуры.
4.2. Переход сзьмонелл в некультивируемое состояние под действием пониженной температуры в условиях
отсутствия питательных веществ.
4.3. Реверсия НФ сальмонелл в организме теплокровных животных
ГЛАВА 5. ИСПЫТАНИЕ ПРЕДЛАГАЕМОЙ СРЕДЫ НАКОПЛЕНИЯ
И СРЕД СРАВНЕНИЯ В ПОЛЕВЫХ УСЛОВИЯХ
5.1. Распространение, количественная и видовая характеристика сальмонелл, выделенных из воды горканализации городов РостованаДону
и Азова с применением различных сред накопления
5.2. Распространение, количественная и видовая характеристика сальмонелл, выделенных из воды Нижнего Дона с применением
различных сред накопления
ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ ИССЛЕДОВАНИЙ
ВЫВОДЫ.
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ


С учетом выше сказанного, одной из наиболее актуальных задач современной санитарной микробиологии является создание и разработка эффективных, экономичных и легко воспроизводимых в условиях практических бактериологических лабораторий питательных сред, позволяющих получать объективную информацию о степени бактериологического загрязнения водных объектов Головина и др. Трухина, Онищенко, Онищенко, . Учитывая вышеизложенное, целью нашего исследования явилась разработка и обоснование возможности использования новой среды накопления для повышения эффективности выделения сальмонелл, в том числе и некультивируемых форм, из водных объектов различной степени бактериального загрязнения. В экспериментальных условиях подобрать минеральный состав новой среды, факторы роста, ингибирующие вещества для конкурирующих видов микроорганизмов, . В экспериментальных условиях проверить способность новой питательной среды к возможности размножения в ней сальмонелл и торможению роста сопутствующей микробиоты. Сравнить новую среду с наиболее используемыми в настоящее время средами. Показать возможность применения новой среды накопления для выделения некультивируемых форм сальмонелл из водных объектов. Разработать методические приемы, позволяющие проводить исследования на наличие сальмонелл с высокой степенью достоверности результата. В полевых условиях с использованием новой питательной среды и разработанными методическими приемами провести исследования проб воды взятых, в биотопах с различной степенью биологического загрязнения, в сравнении со средами общепринятыми в практике здравоохранения. Разработана новая жидкая среда накопления для выделения сальмонелл из водных объектов, превосходящая по чувствительности и эффективности накопления аналоги, используемые в настоящее время в практике здравоохранения РФ. Защищена патентом от г. Показана эффективность применения новой среды для реверсии некультивируемых форм сальмонелл, что позволяет повысить достоверность оценки загрязнения сальмонеллами водных объектов. Федеральной службы Роспотребнадзора Лг2 . Федеральной службой в практической работе. Материалы диссертации использованы при подготовке аналитической справки О степени загрязнения водных объектов Юга России патогенными, потенциальнопатогенными и санитарнопоказательными микроорганизмами письмо Управления Федеральной службы Роспотребнадзора по Ростовской области 7 от г об использовании документа для формирования Федерального информационного фонда социальногигиенического мониторинга. Разработан проект нормативнотехнической документации Технические условия, Пусковой регламент производства, инструкция по применению, этикетка на флакон и др. Питательной среды накопления для выделения сальмонелл из водных объектов. В настоящее время разработанная нормативнотехническая документация находится на согласовании в ФГУН ГИСК им. Л.А. Тарасевича Роспотребнадзора. Внедрение новой среды накопления для сальмонелл в практику здравоохранения позволит осуществлять более объективный мониторинг за санитарным состоянием водных объектов с целью своевременного проведения оперативных мероприятий против распространения сальмонеллезов водным путем. Результаты и основные положения работы представлены на научнопрактической конференции Региональные проблемы окружающей среды, здоровья населения и санитарноэпидемиологического благополучия РостовнаДону, , Всероссийской научнопрактической конференции молодых ученых и специалистов Окружающая среда и здоровье Суздаль, , на заседании Ученого совета ФГУН Ростовский НИИ микробиологии и паразитологии Роспотребнадзора РостовнаДону, , на межлабораторной конференции сотрудников лаборатории санитарномикробиологических методов исследования и экологической экспертизы и лаборатории микробиологии и разработки иммунобиологических препаратов ФГУН Ростовский НИИ микробиологии и паразитологии Роспотребнадзора РостовнаДону, . По материалам диссертации опубликовано 9 работ, из них 2 в реферируемых журналах из списка ВАК Минобразования РФ. Объем рукописи составляет 5 страниц. Работа иллюстрирована таблицами и рисунками. Список литературы содержит 3 источника, из них 4 отечественных авторов.