Липополисахариды бактерий рода Francisella как иммунодоминантные антигены и их фазовые вариации в условиях in vivo

• Автор: Аронова, Надежда Валентиновна
• Шифр специальности: 03.00.07
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2005
• Место защиты: Ростов-на-Дону
• Количество страниц: 112 с. : ил.

ОГЛАВЛЕНИЕ
ВВЕДЕНИЕ.

ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

ГЛАВА 1. ИММУНОДОМИНАНТНЫЕ АНТИГЕНЫ

ГРАМНЕГАТИВНЫХ БАКТЕРИЙ И БИОЛОГИЧЕСКАЯ ЦЕЛЕСООБРАЗНОСТЬ ИХ ФАЗОВЫХ ВАРИАЦИЙ

1.1. Поверхностные структуры и иммунодоминантные

антигены грамнегативных бактерий

1.2. Иммунодоминантные антигены бактерий рода i.

СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ

ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ.

2.1. Штаммы.

2.2. Питательные среды и реактивы.
2.3. Методы выделения препаратов ЛПС и получение бактериальных лизатов.
2.4. Получение иммунных сывороток и методы их характеристики
РИГА, РТПГА и истощение антигенными препаратами
2.5. ПААГ электрофорез и иммуноблоттинг препаратов ЛПС
и лизатов бактерий
2.6. Реакция лейкоцитолиза
2.7. Изучение фазовых вариаций i viv
2.8 Использование дотиммуноанализа дотблот для выявления
специфических антител против бактерий рода i.
ГЛАВА 3. ИЗУЧЕНИЕ ИММУНОДОМИНАНТНЫХ
АНТИГЕНОВ БАКТЕРИЙ РОДА I
3.1. Получение коллекции иммунных сывороток против бактерий рода
i.
3.2. Сравнительный анализ антигенов, представляемых живыми и убитыми бактериями вида Р.МагегШБ в организме кролика
3.3. Иммунодоминантные антигены Р.рЫкшйаа
ГЛАВА 4. ИЗУЧЕНИЕ ВОЗМОЖНОСТИ АНТИГЕННЫХ ВАРИАЦИЙ
ЛПС К. ТиЬАВЕ В ОРГАНИЗМЕ ЛАБОРАТОРНЫХ ЖИВОТНЫХ.
4.1. Изучение возможности антигенных вариаций ЛПС Р.шкгепБ на модели коллекции капсулодефицитных ЛПСдефектных мутантов .
4.2. Изучение возможности антигенных фазовых вариаций ЛПС Р.Ш1агепз в организме кролика, иммунизированного вакцинным
и вирулентным штаммами туляремийного микроба.
ГЛАВА 5. ИЗУЧЕНИЕ ВОЗМОЖНОСТИ АНТИГЕННЫХ ФАЗОВЫХ ВАРИАЦИЙ ЛПС . ТиЬАКЕ ПРИ ИНФЕКЦИОННОМ И ВАКЦИНАЛЬНОМ ПРОЦЕССАХ У ЧЕЛОВЕКА
5.1. Изучение возможности антигенных фазовых вариаций ЛПС РДиЛагегв
у больных туляремией людей.
5.2. Изучение возможности антигенных фазовых вариаций ЛПС Р.иЛагегБ
у людей, иммунизированных живой туляремийной вакциной
ГЛАВА 6. ПРИМЕНЕНИЕ ДОТИММУНОАНАЛИЗА ДЛЯ ВЫЯВЛЕНИЯ СПЕЦИФИЧЕСКИХ АНТИТЕЛ ПРОТИВ ФРАНЦИСЕЛЛ С ИСПОЛЬЗОВАНИЕМ В КАЧЕСТВЕ АНТИГЕННЫХ
ПРЕПАРАТОВ ЛПС.
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАННОЙ ЛИТЕРАТУРЫ


Впервые выявлено, что специфические иммунодоминантные антигены нового представителя рода РгапЫвеНа Р. Ы1опига1а представлены двумя иммунологически различными формами липоолигосахарида ЛОС и низкомолекулярным антигеном с белковым компонентом. Впервые установлено, что в сыворотках больных туляремией людей содержатся два самостоятельных типа антител с различной специфичностью против антигенных эпитопов ЛПС Р. ЛПС Р. Ыба. Доказано, что данные антитела не являются перекрестнореагирующими, а появление в процессе туляремийной инфекции человека противоновицидных иммуноглобулинов обусловлено модификацией эпитопов ЛПС возбудителя туляремии антигенные фазовые вариации. В то же время при иммунизации человека живой туляремийной вакциной феномен антигенных вариаций ЛПС Р. Однако, в исключительных случаях, при наличии у человека выраженных поствакцинальных реакций, ЛПС вакцинного штамма РЛи1агеп1з может подвергаться модификации. Практическая ценность работы. Получена коллекция иммунных сывороток человека и кролика против различных представителей рода РгапЫвеИа, которая может быть в дальнейшем использована при изучении антигенной структуры разных видов франциселл. ЛПС различных франциселл в дотиммуноанализе, что позволяет повысить специфичность метода по сравнению с применением бактериальных препаратов. Рассмотрены Ученым Советом РостНИПЧИ и утверждены директором института методические рекомендации по использованию препаратов ЛПС Р. Полученные в процессе выполнения исследования данные используются при чтении лекций на курсах специализации врачейбактериологов в РостНИПЧИ. Для представителей вида РлЫагегэ, включая Р. ПйагегБ зиЬэр. У1С1аШ. ЛПС является иммунодоминантным антигеном, на Ополисахариде которого локализованы высокоспецифичные эпитопы. Большинство иммунореактивных белков франциселл характеризуются наличием перекрестнореагирующих общеродовых антигенных детерминант. Иммунодоминантные специфические антигены Р. Ы1отпта значительно отличаются от Р. Б и представлены двумя иммунохимически различными липоолигосахаридами и низкомолекулярным протеинсодержащим антигеном. При туляремийной инфекции у человека, обусловленной природными вирулентными штаммами, происходит модификация ЛПС возбудителя туляремии с формированием антигенных детерминант, присущих ЛПС Р. БиЬвр. В то же время при иммунизации человека и кролика живой туляремийной вакциной феномен антигенных вариаций ЛПС Р. Применение ЛПС в качестве антигенного образца по сравнению с бактериальными препаратами позволяет повысить специфичность метода дотиммуноанализа и использовать его при детекции специфических антител против франциселл в сыворотках человека и животных. Материалы диссертации были доложены на научных конференциях РостНИПЧИ и конкурсах молодых ученых РостНИПЧИ , , , , , а также были представлены на III и IV международных конференциях по туляремии Швеция, Великобритания, , на научных конференциях Диагностика, лечение и профилактика опасных инфекционных заболеваний. Биотехнология. Ветеринария. Киров, , Диагностика, лечение и профилактика опасных инфекционных заболеваний. Биотехнология. Ветеринария. Екатеринбург, , на VIII съезде Всероссийского научнопрактического общества эпидемиологов, микробиологов и паразитологов Москва, , на IV межрегиональной научнопрактической конференции с международным участием Актуальные проблемы обеспечения санитарноэпидемиологического благополучия населения. Омск, , а также на Всероссийской научнопрактической конференции Медицинская микробиология век Саратов, . Публикации. По материалам диссертации опубликовано научных работ, из них 4 работы в центральной печати и 4 в зарубежных изданиях. Протокол И от ЗОЛ 1. Структу ра диссертации. Работа изложена на 2 страницах машинописи, состоит из введения, обзора литературы, материалов и методов исследования, результатов собственных исследований, заключения, выводов и списка литературы. Библиография включает 3 источника, в том числе отечественных. Диссертация иллюстрирована рисунками и 5 таблицами.