Изучение, разработка и стандартизация микротест-системы для выявления и идентификации уреплазм

• Автор: Безруков, Владислав Михайлович
• Шифр специальности: 03.00.07
• Научная степень: Кандидатская
• Количество страниц: 176 с.

ОГЛАВЛЕНИЕ

Список сокращений.

Введение .

Часть 1. Обзор литературы.

Глава 1. Общая характеристика бактерий рода .

Глава 2. Питательные среды для культивирования и выявления уреаилазм

Глава 3. Определение концентрации урсаплазменных культур

Глава 4. Диагностика уреаплазменной инфекции

Глава 5. Оценка качества диагностических препаратов.

Часть 2. Собственные исследования

Глава 1. Материалы и методы исследования

Глава 2. Разработка питательной среды для выявления
Глава 3. Количественная оценка роста бактерий рода
в жидкой питательной среде
Глава 4. Оценки ростовых свойств питательной среды
для выявления .
Глава 5. Определение чувствительности штаммов .
к антибактериальным препаратам.
Глава 6. Разработка микротестсистемы для выявления и идентификации i . Уреаплазма Микротест и оценка
ее диагностической эффективности в государственных испытаниях.
Обсуждение
Выводы
Список литературы


Вследствие отсутствия у V . Кроме того, уреаплазмы обладают минимальным уровнем ацетаткиназной активности, обеспечивающей АТФ некоторые бактерии 5. Эти факты свидегельствуют о том, что уреаплазмы обладают принципиально другим механизмом получения энергии, сопряженным с их способностью гидролизовать мочевину. Бактерии рода , как и другие представители семейства асеае, обладают супероксиддисмутазой, но, в отличие от них, лишены оксидазной активности 1, 7. Уреаплазмы способны синтезировать v насыщенные и ненасыщенные жирные кислоты 6. Вследствие неспособности уреаплазм синтезировать пуриновые и пиримидиновые основания v и отсутствия рибонуклеотидредуктазы, образование предшественников ДНК происходит по пути утилизации. Уреаплазмы обладают тим идин киназой, ферментом, принимающим участие в утилизации пиримидиновых дсзоксинуклеозидов . Уреаплазмы проявляют А1, А2 и Сфосфолипазную активность . Показано, что клетки уреаплазм в экспоненциальной фазе роста культуры имели низкий уровень Афосфолипазной активности независимо от серотипа и высокий уровень Агфосфолипазной активности, превышающий фосфолипазную в 0 раз и варьирующий среди разных ссротипов. Кроме того, наблюдалась Сфосфолипазная активность с незначительными различиями среди серогипов уреаплазм, которая снижалась в раз при достижении клетками стационарной фазы роста. Все представители рода , выделенные от человека, обладают Iпротеазной активностью, расщепляющей человеческие I, но не I2, на два фрагмента 0 кДа и кДа 7, 3, 5. Представители рода являются хеморганотрофами и могут культивироваться на искусственных питательных средах неопределенного состава. Исключительно малый размер генома и сопряженные с этим раииченныс биосинтетические возможности делают уреаплазмы зависимыми от наличия в среде многих компонентов, необходимых для роста аминокислот, нуклеотидов, их предшественников, стсролов, витаминов и др. В связи с этим для культивирования уреаплазм используются среды сложного состава. При этом не следует забывать, что сложный состав сред может представлять угрозу для роста микроорганизмов в связи с наличием токсичных компонентов . Ростовые потребности представителей рода сходны с таковыми рода , за исключением обязательной потребности уреаплазм в мочевине и низкого значения в среде. Для роста . Сыворотка, повидимому, является также источником белков, способных связывать токсичные для микроорганизмов компоненты среды . Оптимальная температура роста штаммов урсаплазм, относящихся к видам . . v, находится в пределах С. Рост некоторых штаммов может наблюдаться при температуре в пределах С более высокая температура критически снижает жизнеспособность уреанлазм , . Оптимальное для роста уреанлазм значение культуральной среды находится в пределах 6,06,5 3. Культура уреанлазм в жидкой питательной среде проходит обычные для микроорганизмов фазы рост, однако, для уреаплазм характерен относительно непродолжительный рост с быстрой сменой фаз . После завершения недолгой экспоненциальной фазы роста наступает короткая стационарная фаза, сменяющаяся фазой отмирания с очень быстрым снижением жизнеспособности культуры. Через часов от момента начала роста т. Рост уреанлазм в бульонной культуре сопровождается накоплением не более организмов в I мл среды 1. Соответственно, накопление такой незначительной биомассы микроорганизмов, клетки которых обладают очень малыми размерами порядка 0,5 мкм, не сопровождается помутнением культуральной среды. Бульонные культуры уреаплазм абсолютно прозрачны даже при накоплении максимального количества клеток. На рост бактерий рода влияют различные факторы буферные системы, концентрация мочевины и ионов аммония в среде, осмотическое давление среды, ионы тяжелых металлов и марганца, сульфгидрильные агенты путресцин, состав газовой среды и концентрация агара в плотной питательной среде. Буферные системы.