Изучение основных биологических свойств живой сибиреязвенной антибиотикоустойчивой вакцины СТИ-ПР в процессе длительного хранения

• Автор: Аксенова, Людмила Юрьевна
• Шифр специальности: 03.00.07
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2005
• Место защиты: Ростов-на-Дону
• Количество страниц: 0 с. : 147 ил.

СОДЕРЖАНИЕ
ВВЕДЕНИЕ

ГЛАВА I. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. Средства специфической профилактики сибирской язвы. .

1.2. Тестзаражающие штаммы, используемые при

определении иммуногенности сибиреязвенных вакцин.

СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ

ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ.

2.1. Материал

2.1.1. Экспериментальные животные

2.1 2 Бактериальные штаммы.

2.1.3. Антибиотики и ликопид.
2.1.4. Химические реактивы, диагностические
препараты и питательные среды
2.1.5. Лабораторное оборудование
2.2. Методы
2.2.1. Методы изучения фенотипических свойств различных серий вакцины СТИПР
2.2.2. Методы изучения иммуногенных свойств различных серий вакцины СТИПР.
2.2.3. Методы определения факторов неспецифической резистентности и специфического противосибиреязвенного иммунитета.
2.2.4. Определение безвредности вакцины СТИПР.
2.2.5. Методы определения плазмидного и генного профиля различных серий вакцины СТИПР и их генетической вариабельности
по разным доку сам.
2.2.6. Методы статистической обработки результатов экспериментальных исследований.
ГЛАВА 3. ИЗУЧЕНИЕ СТАБИЛЬНОСТИ СОХРАНЕНИЯ ОСНОВНЫХ БИОЛОГИЧЕСКИХ СВОЙСТВ РАЗЛИЧНЫХ СЕРИЙ ВАКЦИНЫ СТИПР ПОСЛЕ ДЛИТЕЛЬНОГО ХРАНЕНИЯ
3.1. Фенотипические свойства различных серий
вакцины СТИПР
3.2. Стабильность сохранения устойчивости к антибиотикам различных серий вакцины СТИПР
3.3. Иммуногенность различных серий вакцины СТИПР.
3.4 Генетические свойства различных серий вакцины СТИПР. .
ГЛАВА 4. АЛГОРИТМ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ИММУНОГЕННОСТИ ЖИВЫХ СИБИРЕЯЗВЕННЫХ ВАКЦИН В ЭКСПЕРИМЕНТЕ
4.1. Скрининг i vi наиболее иммуногенных клеточных популяций из различных серий вакцины СТИПР.
4.2. Изучение фенотипических и генетических свойств клеточных популяций вакцины СТИПР
4.3. Изучение i vi чувствительности вакцины к антибиотикам.
4.4. Изучение i viv иммуногенных свойств клеточных популяций, выделенных из различных серий вакцины СТИПР
ГЛАВА 5. ОСНОВНЫЕ БИОЛОГИЧЕСКИЕ СВОЙСТВА ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОПРОИЗВОДСТВЕННЫХ СЕРИЙ ВАКЦИНЫ СТИПР
5.1. Получение экспериментальнопроизводственных
серий вакцины СТИПР
5.2. Культуральноморфологические свойства экспериментальнопроизводственных серий вакцины СТИПР
5.3. Безвредность и реактогенность экспериментальнопроизводственных серий вакцины СТИПР.
5.4. Иммуногенность экспериментальнопроизводственной серии вакцины СТИПР
ГЛАВА 6. ИЗУЧЕНИЕ СОЧЕТАННОГО ПРИМЕНЕНИЯ ЖИВОЙ АНТИБИОТИКОРЕЗИСТЕНТНОЙ СИБИРЕЯЗВЕННОЙ ВАКЦИНЫ СТИПР С ЛИКОПИДОМ И АНТИБИОТИКАМИ.
6.1. Изучение иммуногенности экспериментальнопроизводственной серии вакцины СТИПР при сочетанном применении с ликопидом.
6.2. Действие ликопида на показатели специфического иммунитета и неспецифической резистентности морских свинок, иммунизированных экспериментальнопроизводственной серией вакцины СТИПР.
6.3. Иммунологическая эффективность вакцины СТИПР
при ее сочетанном использовании с антибиотиками и ликопидом
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАННОЙ ЛИТЕРАТУРЫ
ПЕРЕЧЕНЬ условных сокращений и обозначений
дв дистиллированная вода
ИИ индекс иммунитета
им иммуномодулятор
ЛФ летальный фактор
МИК минимальная инг ибирующая концентрация
нет нигросиний тетразолий
ОФ отечный фактор
ПА протективный антиген
п.н. пар нуклеотидов
П.о. питательная основа
ПЦР полимеразная цепная реакция
ПЯЛ полиморфноядерные лейкоциты
РИФ реакция иммунофлуоресценции
СтавНИПЧИ Ставропольский научноисследовательский противочумный институт
СОПЭК среда для сочетанного определения продукции экзотоксина и капсулы
У устойчив к антибиотику
УУ умеренно устойчив к антибиотику
Ч чувствителен к антибиотику
ген капсулообразования
суа ген отечного фактора
безусловно летальная доза
доза, вызывающая легальность у животных
е ген летального фактора
X плазмида сибиреязвенного микроба, несущая гены экзотоксинов
рХ плазмида сибиреязвенного микроба, несущая гены капсулы
V Vi вариабельное число тандемных повторов
v vi i область с вариабельным числом тандемных повторов
ВВЕДЕНИЕ
АКТУАЛЬНОСТЬ


Сказанное выше убедительно свидетельствует о широком диапазоне экспериментальнометодических подходов к изучению возбудителя сибирской язвы и живых вакцин против данного заболевания Однако анализ данных литературы показал, что сведения по изучению стабильности сохранения основных свойств вакцин после их длительного хранения носят единичный и разобщенный характер Гннсбург с соавт, Салтыков с соавт. Шенцев И В. Шереметьева Ю. В. с соавт. Исследования решено было выполнить на примере различных серий антибиотикорезистентной живой сибиреязвенной вакцины СТИПР, так как в доступной литературе имеются единичные сообщения о свойствах данной вакцины Буравцева Н. П., , v А. Р. . Изучить стабильность сохранения основных биологических свойств различных серий вакцины СТИПР после длительного хранения. Разработать алгоритм исследования живых сибиреязвенных вакцин в эксперименте. Получить новые экспериментальнопроизводственные серии вакцины СТИПР. Определить протективное действие сочетанного применения вакцины СТИПР с иммуномодулятором ликопидом. Определить иммунологическую эффективность вакцины СТИПР при ее сочетанном применении с антибиотиками и ликопидом. Доказана стабильность сохранения основных фенотипических, генетических и иммунологических свойств вакцины СТИПР на протяжении лет хранения срок наблюдения, что иллюстрирует и подтверждает значительное преимущество живых вакцин над другими видами. В результате впервые проведенного анализа плазмидного и генного профиля различных серий вакцины СТИПР после длительного хранения и сравнительного анализа их генетической вариабельности по разным локусам, установлено, что генетическая однородность на уровне отдельных серий вакцины СТИПР подтверждена принадлежностью к 4 УШПкатегории культур, выделенных из различных серий данной вакцины, по локусу уггА. Впервые выявлена высокая устойчивость вакцины СТИПР к карбснициллину ООО мкгмл. НАУЧНОПРАКТИЧЕСКАЯ ЗНАЧИМОСТЬ РАБОТЫ. Экспериментально доказана возможность увеличения срока годности вакцины СТИПР с лет до лет. Результаты исследований свидетельствуют о необходимости усовершенствования существующих и поиска новых сред бактериологического контроля за специфической стерильностью препарата. Определены критерии для скрининга наиболее иммуногенных клеточных популяций живых сибиреязвенных вакцин. Разработанный алгоритм изучения живых сибиреязвенных вакцин может служить научнометодической основой для дальнейшего усовершенствования существующих и разработки новых видов живых сибиреязвенных вакцин. При изучении иммунологической эффективности вакцины СТИПР на морских свинках экспериментально доказана возможность снижения иммунизирующей дозы с спор до спор при однократном подкожном методе введения. В соавторстве разработаны методические рекомендации Определение иммуногенности живых сибиреязвенных вакцин по двум дозам тестзаражающего вирулентного штамма, утвержденные директором СтавНИПЧИ профессором В. И. Ефременко, протокол заседания Ученого совета 6 от июня г. Изучение стабильности сохранения устойчивости к антибактериальным препаратам у антибиотикоустойчивых штаммов В. Игааз в процессе хранения, утвержденные директором СтавНИПЧИ профессором В. И. Ефременко, протокол заседания Ученого совета 5 от мая г. Федеральной целевой научнотехнической программы Исследования и разработки по приоритетным направлениям науки и техники на г. Поисковоприкладные исследования и разработки, раздел Технология живых систем, подраздел Защита от патогенов, где автор был исполнителем. Раздел 4. СтавНИПЧИ, кандидатом медицинских наук, Цыганковой О. Раздел 5. Жарниковой И. В., за что автор выражает им искреннюю благодарность. Изученные серии вакцины СТИПР стабильно сохранили свои основные биологические свойства после их длительного хранения. Алгоритм определения иммуногенности живых сибиреязвенных вакцин. Ликопид, вводимый однократно подкожно одновременно с вакциной СТИПР оказывает иммуностимулирующий эффект при поствакцинальном противосибиреязвенном иммунитете. Иммунологическая эффективность вакцины СТИПР повышается при сочетанном введении антибиотиков широкого спектра действия и ликопида. АПРОБАЦИЯ РАБОТЫ.