Изучение области связывания IgA на рекомбинантном белке Bac стрептококка группы B

• Автор: Устинович, Ирина Анатольевна
• Шифр специальности: 03.00.07
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2000
• Место защиты: Санкт-Петербург
• Количество страниц: 110 с.

Iрецепторы стрептококков группы А и . Методы лизиса клеток Е. Выделение и очистка рекомбинантного 1Асвязывающего белка из штамма Е. Н ТМ 9 р4. Выделение и очистка рекомбинантного белка из штамма Е. Субклонирование фрагмента Д1I, содержащего ген Iрецептора Клонирование фрагментов гена размером 0 н. ТрисНС1 гидроксиметилам и пометам солянокислый ТЕ мМ Трис буфер, 8. Инфекции, вызванные стрептококками группы В, являются важной медицинской и социальной проблемой во всех странах мира. Стрептококки группы В способны вызывать тяжелейшие септические заболевания у новорожденных детей. Стрептококковая инфекция у новорожденных протекает быстро, иногда молниеносно. Легальность достигает . Ребенок заражается в родах или еще антенатально от матери, в родовых путях которой содержится СГВ. Причиной заболеваний новорожденных становится носигельство женщиной СГВ. Процент бессимптомного носитсльства достигает в разных странах от до , причем наиболее часто инфекция передаегся половым путем. Кроме инфекций у детей СГВ вызывают серьезные заболевания у взрослых пиелонефрит, артрит, эндокардит, мастит, септицемию, бронхопневмонию. Частой причиной самопроизвольного прерывания беременности также может являться инфекция СГВ. В последние годы накопились данные о способности СГВ вызывать серьезные инвазивные поражения различных органов и систем человека с летальных исходов, в том числе токсические состояния и некротические фасциты. Проблема стрептококковой патологии и детской смертности особенно остро стоит в нашей стране, где в связи е ухудшением экономической ситуации и снижением уровня жизни населения резко понизилась рождаемость. В ряде регионов страны смертность в раза превосходит рождаемост ь. Следовательно, изучение биологии и патогенных свойств стрептококков группы В актуально как с научной, так с социатыюй и экономической точек зрения. В настоящее время накоплена значительная информация относительно полисахаридной капсулы основного фактора патогенности стрептококков группы В. Однако, кроме полисахаридов. С5а пептидаза и др. В частности, на поверхности СГВ экспрессируется белок Вас. А человека через часть молекулы. Роль этого белка в развитии инфекционною процесса, структурная организация белковой молекулы и особенности строения гена мало изучены. Однако очевидно, что в местах колонизации СГВ влагалище, прямая кишка, где I превалирует в пуле иммуноглобулинов, наличие белка, связывающего I, биологически оправдано. Уровень I на слизистых и в биологических жидкостях часто указывает на общее состояние иммунной системы, а ею изменение свидетельствует о возникновении серьезных заболеваний, таких как I нефропатии, иммунодефициты, вирусные заболевания, включая ВИЧинфекции. Белок, способный связывать иммуноглобулин А человека, может быть использован для определения содержания I в биологических секретах, а значит, представляет интерес с практической точки зрения. Все вышесказанное определило цели и задачи настоящего исследования. Целью работы явилось изучение рекомбинантного Iрецепторного белка Вас ТВ. Осуществить клонирование фрагмента гена Iрецептора СГВ и получить рекомбинантный белок Вас, обладающий Iрецспторной активностью. Выделить и охарактеризовать рекомбинантный Iрецепторный белок. Установить область связывания I на молекуле белка Вас. ДНК, кодирующий аминокислотную последовательность I, по предварительным исследованиям отвечающую за связывание I. Получить рекомбинантный белок, содержащий последовательность I и проанализировать его на способность связывать иммуноглобулин А.