Генная и серологическая диагностика бруцеллеза крупного рогатого скота

• Автор: Павлов, Александр Александрович
• Шифр специальности: 03.00.07
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2002
• Место защиты: Саратов
• Количество страниц: 104 с.

СОДЕРЖАНИЕ

Перечень условных обозначений и сокращений

Введение

Глава I. Обзор литературы ч

1.1. Распространение бруцеллеза на территории РФ

1.2. Методы диагностики бруцеллеза сельскохозяйственных

животных

1.2.1. Серологическая диагностика бруцеллеза

1.2.2. Аллергическая диагностика бруцеллеза

1.3. Полимеразная цепная реакция

Собственные исследования

Глава 2. Материалы и методы
2.1. Материал для исследования
2.2. Выявление ДНК бруцелл методом ПЦР
2.3. Серологические методы
2.4. Статистические методы исследования
Глава 3. Применение тестсистемы ГенБру для молекулярнобиологической диагностики бруцеллеза животных
3.1. Оценка эффективности ПЦР при обследовании иммунизированного крупного рогатого скота и больных бруцеллезом животных
3.2. Использование ПЦР в комплексе с серологическими реакциями РА, РСК
Глава 4. Оценка информативности ПЦРанализа при исследовании различных образцов диагностического материала
4.1. Выбор диагностического материала от животных для детекции бруцелл методом ПЦР
4.2. Изучение диагностической чувствительности ПЦР при исследовании сыворотки крови и цельной крови у больных и
иммунизированных против бруцеллеза животных
Заключение
Выводы
Список использованной литературы


В настоящее время наметилась тенденция к снижению уровня заболеваемости сельскохозяйственных животных бруцеллезом. Если в году в России неблагополучными по этой инфекции было 9 населенных пунктов около 1,2 млн. За год удельный вес заболеваемости бруцеллезом среди крупного рогатого скота составил 4, , инфекционным эпидидимитом мелкого рогатого скота возбудитель В. Яременко Н. А., . Главную роль в улучшении эпизоотической ситуации сыграло применение методов специфической профилактики в системе мер по борьбе с бруцеллезом и, в частности, иммунизация поголовья рогатого скота вакцинными штаммами В. В. ii v1, а в последующем В. Несмотря на выше изложенное, на сегодняшний день территорий России остаются неблагополучными по бруцеллезу крупного рогатого скота и 6 регионов по бруцеллезу мелкого рогатого скота. Потенциазьно опасным с эпизоотической точки зрения может быть импорт племенного скота из ряда стран дальнего и ближнего зарубежья Голландии, Венгрии, Армении и Прибалтийских республик и мелкого рогатого скота из Польши, США, Австралии. Не исключена угроза распространения бруцеллеза животных с территории сопредельных государств Среднеазиатского региона и, прежде всего, Казахстана Косилов И. А. с соавт. Ситуация усугубляется тем, что бруцеллез наносит огромный экономический ущерб животноводству, который складывается из недополучения животноводческой продукции утилизация поврежденных органов и тканей и снижения ее качества, затрат на проведение ветеринарносанитарных мероприятий по ликвидации очага инфекции, яловости и абортов маточного поголовья, нарушения племенной работы изза выбраковки ценных племенных животных. Одним из наиболее надежных способов предупреждения энзоотий и ликвидации очагов бруцеллеза является эффективная диагностика инфекции, основанная на лабораторных методах исследования Антонов Б. И., Наставления по диагностике бруцеллеза животных, . Поэтому актуальной задачей является разработка и внедрение усовершенствованных методов диагностики бруцеллеза, а также выбор оптимального комплекса диагностических тестов. Только в этом случае можно с большей вероятностью гарантировать выявление не только манифестных, но и латентных, стертых случаев проявления бруцеллеза, вызванных диссоциированными БИ. Я, Ьформами бруцелл. Решение подобных задач возможно благодаря использованию в ветеринарной практике новых диагностических подходов, в частности, основанного на достижениях современной молекулярной биологии и генной инженерии метода полимеразной цепной реакции. Этот генетический способ выявления ДНК микроорганизмов отличают специфичность до 0 , высокая чувствительность 1х21 х 3 м. Ьформ бруцелл без специальной подготовки. Вместе с тем важной проблемой для практического использования ГГЦР является разработка оптимальной схемы анализа, стандартизация условий исследования, что позволяет снизить вероятность получения ложноотрицательных ответов и правильно интерпретировать полученные результаты. Для достижения максимальной эффективности ПЦР диагностики необходимо использование для анализа биологических образцов с наиболее высокой вероятностью содержания бруцелл, применение универсальных методов пробоподготовки. Важным является определение контингента животных, подлежащих исследованию в ГГЦР, оценка диагностической точности применения полимеразной цепной реакции в комплексе с методами иммуноанализа, специфичности и чувствительности ПЦРтестсистем различных производителей. Цель исследования изучение эффективности генной и серологической диагностики бруцеллеза, разработка оптимальной схемы ПЦРанализа при обнаружении бруцелл у сельскохозяйственных животных. Провести сравнительный анализ эффективности традиционных серологических методов РА, РСК и ПЦР, а также оценить перспективы их комплексного применения для лабораторной диагностики бруцеллеза. Оценить диагностическую точность применения тестсистемы для выявления . ПЦР ГенБру производства РосНИПЧИ Микроб при исследовании материала полученного от животных с верифицированным диагнозом бруцеллез.